荧光分析法在药物分析中的应用.doc

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1、荧光分析法在药物分析中的应用应用化学0901高军梅0915020111西安科技大学化学与化工学院[摘要]简要概述了药物分析中荧光分析法的原理、目前在药物方面的应用以及发展前景和发展趋势,特别介绍了药物荧光分析在抗菌素及中枢神经药物方面的分析应用。[关键词]荧光分析药物检测1.前言药物分析是分析化学原理、方法和技术在药学研究及生命科学研究领域中的具体应用。目前,药物分析(包括体液中的药物及药物残留量的分析)发展的主要趋势是如何能够简便、快速地从复杂组成的样品(含体液)中灵敏、可靠地检测一些痕量成分,了解进入体内的药物在体内的吸收、分布、排泄、代谢及转化信息,以及药物分子与受体分子之间的关系,减少

2、药物的毒副作用,改造药物的分子结构,为研制疗效更好、毒性更低的药物提供可靠信息。原子和分子发射的荧光是激发态电子跃迁到基态过程中所伴随的一种发光现象，物质的相对荧光光谱可作为物质定性和定量分析的重要手段，荧光分析法因具有高灵敏度、高选择性、信息量丰富、检测限低等特点,广泛用于生物化学、生物医学、临床分析等研究领域的痕量分析,以及从分子水平上对核酸、蛋白质、多肽等生物大分子及超痕量、超微量生物活性物质、单个细胞内神经传递物质(多巴胺儿茶酚胺等)的分析等，使荧光分析不断朝着高效、痕量、微观和自动化方向发展,极大地提高了荧光分析法的灵敏度、选择性和特异性,应用范围不断扩大。随着荧光分析方法研究与应用

3、的迅猛发展,荧光光谱分析法在药物分析中已得到广泛应用,取得了许多重要的研究成果。2.荧光分析法的原理[1]（1）荧光分析法即是根据物质的荧光谱线位置及强度进行物质鉴定和含量测定的方法。其优点是灵敏度高（比紫外-可见吸收高2~4个数量级）、选择性好（既可依据特征发射光谱，又可根据特征吸收光谱），其检测限10-10g/mL,甚至10-12g/mL。（2）荧光的产生：分子吸收能量后，从基态最低振动能级跃迁到第一电子激发态或更高激发态的不同振动能级，成为激发单重态分子。所以物质分子体系中存在着电子能级、振动能级和转动能级。室温时，多数分子处在电子基态最低振动能级（S0），当受到一定辐射能的作用时，就会

4、发生能级之间的跃迁。从基态(S0)跃迁至激发态(S1*、S2*、激发态振动能级)，此过程吸收了特定频率的辐射；激发态不稳定又会释放能量回到基态。从激发态回到基态有多种途径和方式(见能级图)；图1荧光能级图振动弛豫：同一电子能级内以热能量交换形式由高振动能级至低相邻振动能级间的跃迁。发生振动弛豫的时间10-12s。内转换：当两个电子激发态之间的能量相差较小以致其振动能级有重叠时，受激分子由高电子能级以非辐射方式转移至低电子能级的过程。外转换：激发分子与溶剂或其他分子之间产生相互作用而转移能量的非辐射跃迁；外转换使荧光或磷光减弱或“猝灭”。系间跨越：处于激发态分子的电子发生自旋反转而使分子的多重性

5、发生变化的过程。3.荧光分光光度计测量荧光的仪器主要由四个部分组成：激发光源、样品池、双单色器系统、检测器。激发光源:能够在紫外-可见光区连续发光，常用氙灯、高压汞灯或激光光源.样品池:石英池,四壁透明.单色器:两个光栅单色器,分置于样品池前后.检测器:光电池或光电倍增管,与激发光成直角的方向检测荧光.4.荧光分析法在药物中的分析就现在来说，在药物分析方面紫外、可见分光光度法、高效液相色谱法法在药物分析中的研究进展及应用则是最基础的技术方式，在抗菌素类药物如青霉素、四环素、头孢类抗菌素及中枢神经类药物如苯二氮杂羹、血平等药物荧光分析法都发挥着重要的作用下面具体说明它的应用4.1抗菌素的荧光分析

6、4.1.1青霉素类药物的荧光分析青霉索是一种使用最广泛的广谱抗菌素药品[2]，它本身不发荧光，但它与α-甲氧基-6-氯-9-(β一氨乙基)一氨基氮杂蒽的缩合产物会发生蓝绿色荧光，激发峰在420nm，荧光峰在500nm，可用于血液及尿液中青霉素的测定，测定范围为0．0625--0．625ug·mL-1[7]．阿莫西林(强氨苄青霉素)为广谱半合成青霉素，具有毒性低、杀菌力强的特点．马丽花等L8J用荧光法对其进行了研究，以最大激发波长=277nm,最大发射波长=303nm为测定渡长，探索了pH值、温度、溶剂等的影响．发现阿奠西林有良好的荧光性质，在微碱条件下测定荧光强度最大，温度每升高1O℃，荧光强

7、度下降3％，与无机离子Mg2+、Ca2+、Al3+、Ga3+有配合作用，其中与Mg2+、Al3+离子配合使其荧光强度降低，CTAB对阿莫西林有增敏作用．4.2.2头孢类抗菌素的荧光分析荧光分析是目前头孢类抗菌素的快速、方便且高灵敏的分析方法，采用PH2的缓冲溶液且有H2O2存在下，于100℃加热20mL,使头孢氨苄水解进行了荧光测定[3]．在pH4的缓冲溶液中，头孢氨苄在紫外光照射下能发生光化学反