免疫分析法在体内药物分析中的的应用和发展.doc

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1、免疫分析法在体内药物分析中的的应用和发展摘要：免疫分析法是采用荧光素、同位素或酶等示踪物质标记抗体（或抗原）进行抗原-抗体反应，通过对免疫复合物中的标记物的测定，达到对免疫反应进行监测的目的。文章通过介绍放射免疫标记技术、酶免疫标记技术、荧光免疫分析、化学发光免疫技术等技术简要介绍在体内药物分中的应用和发展。关键词：免疫分析法、放射免疫标记技术、酶免疫标记技术、荧光免疫分析、化学发光免疫技术、体内药物。在药物分析中，免疫分析法的应用主要集中在以下几方面：(1)在实验药物动力学和临床药物学中测定生物利用度和药物代谢动

2、力学参数等生物药剂学中的重要数据，以便了解药物在体内的吸收、分解、代谢和排泄情况；(2)在药物的临床检测中，对治疗指数小、超过安全剂量易发生严重不良反应或最佳治疗浓度和毒性反应浓度有交叉的药物血液浓度进行监测；(3)在药物生产中从发酵液或细胞培养液中快速测定有效组分的含量，以实现对生产过程的在线监测；(4)对药品中是否存在特定的微量有害杂质进行评价。1959年,由美国Yallow和Berson等人将放射性同位素示踪技术的高灵敏性和免疫反应的高特异性结合起来,首先测定了糖尿病人血浆中的胰岛素含量,从而创立了放射免疫分

3、析方法(Radioimmunoassay,RIA).通过多年的发展，免疫分析法不仅可用于测定酶、蛋白质等大分子物质，而且在测定小分子量药物也同样适用，特别是一些色谱法难以分析的药物。1.免疫分析法的基本原理实质都是抗原一抗体竞争结合反应。被分析药物（Ag）和标记后的药物（Ag*）与该药物特异性抗体（Ab）竞争有限的结合，未标记药物（Ab）的浓度决定于标记药物（Ag*）与特异性抗体（Ab）结合的量。标记物可能是放射性同位素、酶、荧光物质或者是化学物质等，依据标记物的属性，测定其放射性、酶反应后的UV吸收和荧光强度。2

4、.免疫分析法的分类2.1放射免疫标记技术（RIA）根据抗原抗体特异性结合的原理，以放射性同位素标记抗原或抗体，根据射线的多少定性或定量测定待检标本中抗体或抗原的量。该法具有灵敏度高、特异性强、标记物容易制备以及放射性强度容易检测等优点，特别适合复杂样品中微量或痕量物质的分析，在体内药物分析中占有独特的地位。随着单克隆抗体的出现及固相化技术的巩固和发展，出现了以标记过量抗体与被测抗原或被测物的非竞争结合为基础的免疫放射分析(IR2MA)，是免疫分析技术的重大进展。2.2酶免疫标记技术（EIA）指酶标记抗体或酶标记抗体

5、进行的抗原抗体反应，然后通过酶与底物产生颜色反应，用于定量测定。其催化底物可与核素一样起到信息放大作用，具有很高的灵敏度，检测下限可达到ng甚至pg水平，有效期大大超过了125I标记物，而且能减少放射性废物。2.3荧光免疫分析（FIA）荧光免疫分析是以荧光物质作为标记物与待测药物结合，所形成的荧光标记药物能与抗体发生免疫反应，引起荧光强度发生变化的一种分析方法。时间分辨荧光免疫分析、荧光偏振免疫分析、荧光淬灭免疫分析、底物标记荧光免疫分析、荧光增强免疫分析均属于荧光免疫分析，但目前应用最多的是荧光偏振免疫分析。2.

6、4化学发光免疫技术（CLIA）化学发光免疫分析包含化学发光反应和免疫反应俩个部分。化学发光反应是利用某些特定的化学反应所产生的能量能使其产物或者反应中间态分子激发，形成电子激发态分子，当这种激发态分子回到稳定的基态时释放出的化学能量能亦可见光的形式发射。化学发光法应多属于氧化反应。能产生化学发光反应的物质称为化学发光剂或者化学法发光底物。如果将化学发光物质直接标记在抗原或者抗体上，或者酶作用于发光底物，即可进行化学发光免疫分析，根据免疫反应所产生的光信号强度，即可求得待测药物的含量。3.结语从药物的生产到临床上的应

7、用，药物有效性和安全性是评价药物的标准。如果没有体内药物分析提供数据和相关信息，药物的临床研究是不可以想象的。然而随着科技的进步，免疫分析法以其分析快速、灵敏度高和专一性强在体内药物分析中的的应用成为了不可或缺的有力工具。多种方法并存共同发展，在体内药物分析中相辅相成。