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时间:2020-09-08
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1、DNA甲基化是一种表观遗传修饰,它在在甲基转移酶的催化下,DNA的CG两个核苷酸的胞嘧啶被选择性地添加甲基基团的化学修饰现象。DNA的甲基化会抑制基因的表达,DNA的甲基化对维持染色体的结构、X染色体的失活、基因印记和肿瘤的发生发展都起重要的作用。主要应用于基因转录调控机制的研究、很多疾病的诊断和治疗。常用的检测方法:MSP法基因组DNA经亚硫酸钠修饰处理后,设计针对甲基化和非甲基化序列的引物进行PCR扩增,通过电泳检测甲基化状态。服务内容(1)基因组DNA的Bisulfite转化。(2)DNA甲基化检测—基于MSP(Met
2、hylationSpecificPCR)法。我们提供:(1)剩余的Bisulfite处理的基因组DNA;(2)实验报告(包括MSP产物的电泳图片)。BSP法:基因组DNA经亚硫酸钠修饰处理后,设计BSP引物扩增目的片段,然后将PCR产物进行TA克隆,最后测序,判断CpG位点是否发生甲基化。服务内容(1)基因组DNA的Bisulfite转化。(2)BSP(BisulfiteSequencingPCR)法,克隆测序。我们提供剩余的Bisulfite处理的基因组DNA;实验报告(包括BSP产物的电泳图片,测序的峰图)。HRM法:基
3、因组DNA经亚硫酸钠修饰处理后,在非CpG岛位置设计一对针对经亚硫酸氢钠处理后DNA链的引物,这对引物中间包含有意义的甲基化CpG岛,一旦这些CpG岛发生甲基化,胞嘧啶(C)不发生变化,而未甲基化的胞嘧啶(C)转变成胸腺嘧啶(T),样品中的GC含量发生了变化,最终被转化成了熔解曲线Tm值之间的差异。服务内容(1)基因组DNA的Bisulfite转化。(2)HRM(HighResolutionMelting)法(Real-TimePCR)。客户提供:纯化后的基因组DNA,所需量>2ug,浓度>50ng/ul。若提供的材料为新鲜
4、组织、血液、细胞等生物材料,请提供足够提取2ug以上基因DNA的材料量。根据所选择的DNA甲基化检测方法,请提供相应的引物或引物序列。我们提供(1)剩余的Bisulfite处理的基因组DNA;(2)实验报告(包括扩增曲线、HRM曲线)。
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