色谱分析法概述ppt课件.ppt

《色谱分析法概述ppt课件.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、Chapter.16色谱分析法概述信建豪第一节色谱法的历史、分类和发展一、色谱的历史①.1903年，俄国植物学家MikhailTswett最先发明。他采用填充有固体CaCO3细颗粒的玻璃柱，将植物色素的提取物加于柱顶端，然后以溶剂淋洗，被分离的组份在柱中显示了不同的色带，他称之为色谱。(希腊语中“chroma”=color;“graphein”=write)。②20世纪30到40年代出现了薄层色谱和纸色谱.③1941年,马丁和辛格提出用气体代替液体的可能性,出现了分配色谱,还提出了著名的塔板理论,并于1952年获得了诺贝尔奖

2、.④1948年瑞典科学家Tiselins因电泳和吸附的研究而获得了诺贝尔奖.⑤20世纪60年代,范第姆特(VanDeameter)提出速率理论;同时代出现了气质联用技术;70年代高效液相色谱飞速发展;之后,产生了超临界流体色谱、毛细管电色谱等等。二、色谱法的分类：三、色谱法的发展趋势①新型固定相和检测器的研制②色谱新方法的研究③色谱联用技术的开发④色谱专家系统的开发四、色谱分析法的特点1.选择性高2.灵敏度高3.效能高4.分析速度快5.应用范围广总结：1.色谱：混合色素被分为不同色带的现像。（像一束光线通过棱镜时被分成不同色

3、带的光谱现象一样）2.色谱法：将待分析样品的各组分一一进行分离，然后顺序检测各组分的方法。3.色谱法基本组成部分：固定相和流动相。4.色谱法的用途：分离（实质）分析第二节色谱过程和基本原理一、色谱过程：return二、色谱分离的基本原理1.组分移动速度低于流动相证明：各组分和固定相存在一定的化学亲和力2.各组分移动速度不同证明：各组分和固定相的亲和力大小不同化学亲和力定向力诱导力色散力氢键超分子作用三、色谱流出曲线和基本概念(一)色谱流出曲线和色谱峰:1.色谱流出曲线：由检测器输出的电信号强度对时间所绘制的曲线（色谱图）2.

4、基线：在操作条件下，没有组分流出时的色谱流出曲线。3.色谱峰：流出曲线上的突起部分。（对称形正态分布曲线）对称因子：fs=W0.05h/2A=(A+B)/2A其中，fs为0.05倍色谱峰高处的色谱峰宽；A，B分别为在该处的色谱峰前沿与后沿和色谱峰顶点至基线的垂线之间的距离。fs>1.05拖尾峰fs<0.95前延峰0.95

5、(t0):不被固定相吸附或溶解的组分的保留时间=流动相流经色谱柱所需要的时间=组分在流动相中所消耗的时间3.调整保留时间(tR'):扣除死时间后的保留时间.tR′=tR-t0t0试样通过色谱柱所消耗的时间tR实际上由两部分组成:一部分由于组分与固定相之间相互作用而引起组分在柱内滞留所消耗的时间,即组分在固定相上滞留时间tR’;别一部分是由于组分在柱内流动相所占的空间内运行所消耗的时间t0.故tR’反映了组分与固定相之间的作用,t0反映了柱内流动相所占的体积大小,而与组分性质无关.总结4.保留体积(VR):由进样开始到某个组分

6、在柱后出现浓度极大时,所需通过色谱柱的流动相的体积.VR=tR·FC(FC流速,mL/min)5.死体积(V0):由进样器至检测器的流路中未被固定相占据的空间.V0=t0·FC6.调整保留体积(VR’):是由保留扣除死体积后的体积.VR’=VR-V0用调整保留体积定性结果较为准确，但用调整保留时间定性，结果更加直观。则通常用调整保留时间定性。7.相对保留值：8.保留指数：Ix（三）色谱峰高和峰面积（定量）：1.峰高(h):组分在柱后出现浓度极大时的检测信号，即色谱峰顶至基线的距离。2.峰面积(A):色谱曲线与基线间包围的面积

7、。(四)色谱峰区域宽度：1.标准差(σ):正态色谱流出曲线上两拐点距离的一半。正常峰，σ为0.607倍峰高处的峰宽.2.半峰宽(W1/2):峰高处一半的峰宽。W1/2＝2.355σ3.峰宽(W):通过色谱峰两侧拐点作切线在基线上所截得的距离。W＝4σ　或W＝1.699W1/2（五）、分离度(Resolution,R)同时反映色谱柱效能和选择性的一个综合指标。也称总分离效能指标或分辨率。其定义为：利用此式，可直接从色谱流出曲线上求出分离度R。R越大，相邻组分分离越好。当R=1.5时，分离程度可达99.7%，因此R=1.5通常用

8、作是否分开的判据。R=1.5R=0.75R=1.0响应信号保留时间t,min三、分配系数与色谱分离(一)容量因子与分配系数分配系数K：组分在两相间的浓度比；容量因子k：平衡时，组分在各相中总的质量比；k=Ms/MmMs为组分在固定相中的质量，Mm为组分在流动相中的质量。容量因子k与分配系数