色谱分析法概论ppt课件.ppt

《色谱分析法概论ppt课件.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、色谱法是一种重要的分离、分析技术混合试样→分离→单组分→检测→定性、定量分析色谱法的由来色谱法的创始人－俄国植物学家茨维特(M.Tswett)色谱法的由来在茨维特的实中：装有CaCO3的玻璃管——色谱柱CaCO3——固定相纯石油醚——流动相色谱法的由来在该实验中，碳酸钙上混合色素被分成不同色带的现象，像一束光线通过棱镜时被分成不同色带的光谱现象一样，因此茨维特把这种现象称为色谱，相应的分离方法称为色谱法（色层法，层析法）高分离效能、高灵敏度、高选择性、分析速度快、应用范围广色谱法的特点:色谱学的重要作用诺贝尔化学奖：1948年，瑞典提塞留斯(Tiselius)，电泳和吸

2、附分析；1952年，英国马丁(Martin)和辛格(Synge)，分配色谱。应用的科学领域：生命科学、材料科学、环境科学等。（科学的科学）药学（药物分析）：各国药典收载了许多色谱分析方法。中国药典二部，700多，纯度检查、定性鉴别或含量测定，一部，600多鉴别或含量测定。中药复方制剂质量测检和中药配伍中的应用色谱法实质是分离色谱分离的基本条件：1.互不相溶的两相（流动相、固定相）；2.被分离组分在两相之间作相对运动色谱法实质—分离分离依据：各组分在两相之间作用力不同　(吸附能力　分配系数　离子交换能力大小排阻能力　其他亲合作用)各组分差速异行→分离色谱法分类按两相状态分

3、色谱法分类按分离过程机制分吸附色谱法—利用吸附剂表面对不同组分物理吸附性能的差异分配色谱法—组分在两相中分配系数不同离子交换色谱法—利用离子交换原理排阻色谱法—利用多孔性物质对不同大小分子的排阻作用等等色谱法分类按固定相的固定形式分色谱法分类附：根据所使用的技术不同分高效液相色谱(HPLC)化学键合相色谱衍生气相(液相)色谱裂解色谱顶空气相色谱色谱制备色谱分析第二节色谱过程一、色谱过程实现色谱操作的基本条件是必须具备相对运动的两相，固定相(stationaryphase)和流动相(mobilephase)。色谱过程是组分的分子在流动相和固定相间多次“分配”的过程。色谱过

4、程组分的结构和性质微小差异与固定相作用差异随流动相移动的速度不等差速迁移色谱分离。1.气相色谱分离过程当试样由载气携带进入色谱柱与固定相接触时，被固定相溶解或吸附;随着载气的不断通入，被溶解或吸附的组分又从固定相中挥发或脱附;挥发或脱附下的组分随着载气向前移动时又再次被固定相溶解或吸附;随着载气的流动，溶解、挥发，或吸附、脱附的过程反复地进行。当试样由载气携带进入色谱柱与固定相接触时，被固定相溶解或吸附;随着载气的不断通入，被溶解或吸附的组分又从固定相中挥发或脱附;色谱图被分析试样从进样开始，经色谱柱分离，到各组分全部流过检测器在此期间所记录下来的响应信号随时间而变化的

5、曲线（分布的图像），称为色谱流出曲线或色谱图。色谱图及常用术语色谱峰在一定色谱条件下，组分通过检测器时，响应信号随时间而变化的曲线称为色谱峰。色谱过程按近理想条件和分配系数恒定时的流出曲线为对称的高斯分布曲线，对应的高斯分布函数为：色谱图及常用术语基线在色谱操作条件下仅有流动相通过检测器时，反映检测器噪声随时间变化的曲线。稳定的基线是一条直线。峰高从色谱峰顶点到基线的距离区域宽度1.峰底宽度在色谱峰两边的转折点(也叫拐点即EF)所画的切线与基线相交的截距。两个拐点E和F之间的距离为EF=，分别位于处。区域宽度2.半峰宽峰高一半处的宽度GH3.标准偏差σ两个拐点E和F之间

6、的距离的一半4.峰面积A色谱峰与基线延长线所包围的面积，精确计算时保留值的定义1.保留时间从进样开始到色谱峰最大值出现时所需的时间保留值的定义2.死时间不被固定相保留的组分，从进样开始到色谱峰最大值出现时所需的时间。(空气、甲烷或乙醚峰的保留时间）。实际上为流动相流经色谱柱所需要的时间：——柱长（cm)——流动相平均线速度(cm/s)保留值的定义3.调整保留时间组分的保留时间与死时间之差色谱保留值表明色谱峰在色谱图中的位置（可用时间t、体积V、距离d表示）。它是由色谱分离过程中的热力学因素所决定的。色谱常用术语保留值的定义4.保留体积从进样开始到色谱峰最大值出现时所需通

7、过的流动相的体积5.死体积6.调整保留体积在LC中为实测值（mL/min)在GC中为校正到柱稳住压下的平均流速相对保留值某一组分与基准物质的调整保留值之比：总分离效能指标分离度(resolution；R)：又称分辨率。是相邻两色谱峰保留时间之差与两色谱峰峰宽均值之比。设正常峰，W1≈W2=4σ，则R=1.5时，99.7%面积(tR±3σ)被分开，∆tR=6σ，称6σ分离。R＜1,峰重叠，未分开R=1,认为基本分开，4σ分离R=1.5,两峰完全分离，6σ分离三、分配系数与色谱分离(一)分配系数和容量因子分配系数(distributionco