资源描述：
《母源性mRNA脱腺苷化和经piRNA途径衰减.docx》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、Nature.Authormanuscript;availableinPMC2015July17.MaternalmRNAdeadenylationanddecaybythepiRNApathwayintheearlyDrosophilaembryoChristelROUGET1,CatherinePAPIN1,AnthonyBOUREUX2,Anne-CécileMEUNIER,BénédicteFRANCO,NicolasROBINE3,EricC.LAI3,AlainPELISSON4,andMartineSIMONELIG*mRNARegulati
2、onandDevelopment,InstituteofHumanGenetics,CNRSUPR1142,141ruedelaCardonille,34396MontpellierCedex5,France2.CRBM,UMR5237,UniversitéMontpellierII,CNRS,1919routedeMende,34293Montpellier,France3.Sloan-KetteringInstitute,DepartmentofDevelopmentalBiology,1017RockefellerResearchLaboratori
3、es,1275YorkAvenue,NewYork,NewYork10065,USA4.MechanismsandControlofRetrotransposition,InstituteofHumanGenetics,CNRSUPR1142,141ruedelaCardonille,34396MontpellierCedex5,France果蝇早期胚胎中母源性mRNA脱腺苷化和经piRNA途径衰减Piwi相关RNA（piRNA），是一种长24到30个核苷酸，由它产生的Piwi类型的ago蛋白在抑制转座子方面有特定功能。这种抑制作用被认为涉及异染色质形成、
4、转录和转录后的基因沉默。piRNA途径还有一个基本功能：保持种系干细胞和DNA完整性。Nos作为研究母源性mRNA衰败的例子，我们发现CCR4介导的nos脱腺苷化取决于PIRNA途径的成分包括与特定nos非翻译区互补。当piRNA诱导的调控损伤时，脱腺苷化降低与胚胎里nosmRNA稳定化和翻译的去阻遏有关，导致头部发育缺陷。AUB是piRNA途径中一个ago蛋白，它在大块的胚胎里和SMG，CCR4,nosmRNA，piRNAs结合的复合物，它目标定位在3′端非编码区。我们提出piRNA和其相关蛋白与Smg一起招募CCR4脱腺苷复合物到特定mRNA上以促进其
5、衰败。因为参与这一调控的piRNA由转座子产生，这说明转座子在基因表达调控中的直接发育功能。在果蝇胚胎里，NOS表达含量呈现出后极部梯度分布并指导腹部分节。NOSmRNA主体分布在整个细胞质中，起翻译性抑制作用，随后在发育的前2–3小时中退化。这种抑制是必不可少的头胸部分节。少量NOS转录，定位在胚后极，未降解并活跃转录，导致NOS蛋白梯度上升。NOSmRNA在细胞质的衰减取决CCR4-NOT脱腺苷化复合物并由Smg招募到NOS处。这有助于胚胎体的转录性抑制且是胚胎前后轴模式形成的要求。SMG被认为不是早期胚胎发育过程中唯一降解NOSmRNA的活化剂。在斑
6、马鱼胚胎中合子表达的miRNA据报道激活母源性mRNA脱腺苷化和在果蝇胚胎中衰减。我们研究了其他种类的小RNA基因在mRNA脱腺苷化和合子性表达之前衰败中的潜在作用。由于piRNA是在生殖细胞中是母源性表达的并出现在早期胚胎中，我们分析了piRNA途径在母源性mRNA脱腺苷酸化作用。Piwi，Aub和Ago3是特定的ago蛋白，ARMI和SPN-E是RNA解旋酶，SQU是一种核酸酶参与piRNA的生物合成和功能。Poly(A)测试分析被用来测定在胚胎发育过程中的前四个小时每一个小时的时间间隔nosmRNA多聚A尾长度。和观察到的野生型胚胎相关NOSmRNA
7、的poly（A）尾在这段时间内逐步缩短相反，在雌性突变体胚胎里NOS的多聚A尾缩短是受piRNA通路影响的（图1a）。这一脱腺苷化缺陷和雌性突变体胚胎里nosRNA高表达量相关，量化原位杂交显示稳定的NOSmRNA散布在突变体胚胎细胞质内，而野生型正常退化。piRNA途径在早期发育中防止DNA损伤起作用，可能是通过抑制转座子的转座。DNA双链断裂引发突变体piRNA途径而导致胚胎体轴特化受影响。这一发育缺陷被Chk2（检验点激酶2）DNA损伤信号转导途径所抑制。我们发现nosmRNA在脱腺苷化方面的缺陷和在aub和armi突变体里观察到的衰变不会被Chk2
8、突变抑制，这表明这些缺陷并不是由发育过程中Chk2途径过早激活造成
