骨髓间充质干细胞分泌基质细胞衍生因子1保护心肌细胞.docx

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1、中国组织工程研究  2013, Vol.17  Issue(6):963-968    DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.2013.06.003骨髓干细胞骨髓间充质干细胞分泌基质细胞衍生因子1保护心肌细胞Stromalcell-derivedfactor-1frombonemarrowmesenchymalstemcellsprotectsmyocardialcells全文: PDF (531KB) 摘要 背景：有研究显示表达CXCR4的干细胞能够沿着基质细胞衍生因子1的浓度

2、梯度迁移到心肌梗死部位再生心肌和血管而改善心脏的功能。目的：探索间充质干细胞通过其分泌的基质细胞衍生因子1对心肌细胞的保护作用。方法：收集培养2d的间充质干细胞条件培养基。在缺氧条件，利用基质细胞衍生因子1受体CXCR4阻断剂AMD3100或PI3-K/Akt途径阻断剂LY预处理H9C2细胞后，利用AnnexinV/PI双标法流式细胞术分析间充质干细胞条件培养基作用下H9C2细胞凋亡的变化；Westernblotting分析H9C2细胞磷酸化Akt蛋白的表达；RT-PCR分析间充质干细胞基质细胞衍生

3、因子1的表达。结果与结论：RT-PCR结果显示间充质干细胞表达基质细胞衍生因子1，Westernblotting结果显示间充质干细胞条件培养基增加了H9C2细胞磷酸化Akt蛋白的水平。AnnexinV/PI分析发现间充质干细胞条件培养基明显降低了H9C2细胞缺氧复氧后的凋亡，且这种抗凋亡作用能被CXCR4阻断剂AMD3100或PI3-K/Akt途径阻断剂LY所阻断。说明间充质干细胞通过其分泌的基质细胞衍生因子1通过激活PI3-K/Akt途径保护H9C2细胞，增加H9C2细胞的幸存能力。关键词 ： 干

4、细胞； 骨髓干细胞； 间充质干细胞； H9C2细胞； 心肌细胞； 心肌梗死； 基质细胞源衍生因子1； 凋亡； PI3-K/Akt； 国家自然科学基金； 干细胞图片文章；  Abstract：BACKGROUND: SeveralstudieshavedemonstratedthatstemcellsexpressingCXCR4canmigrateintomyocardialinfarctionregiontoimprovetheheartfunctionbyregeneratingmyocardi

5、altissueandvesselsunderthegradientconcentrationsofstromalcell-derivedfactor-1.OBJECTIVE: Toinvestigatetheprotectiveeffectofstromalcell-derivedfactor-1frombonemarrowmesenchymalstemcellsonmyocardialcells.METHODS: Conditionedmediumofbonemarrowmesenchymals

6、temcellsculturedfor2dayswascollected.Underhypoxiccondition,H9C2cellswerepretreatedwithCXCR4inhibitorAMD3100(5mg/mL)orPI3-K/AktinhibitorLY(10μM)for1hour.Aftertreatedwithbonemarrowmesenchymalstemcellconditionedmedium,H9C2cellapoptosiswasanalyzedbyAnnexin

7、V/PIdoublestainingmethods.ExpressionofAktandpAktinH9C2cellswasanalyzedbyWesternblotting.Expressionofstromalcell-derivedfactor-1wasanalyzedbyRT-PCR.RESULTSANDCONCLUSION: RT-PCRresultsshowedthatbonemarrowmesenchymalstemcellsexpressedstromalcell-derivedfa

8、ctor-1.WesternblottingresultsshowedthatbonemarrowmesenchymalstemcellconditionedmediumincreasedpAktproteinlevelinH9C2cells.AnnexinV/PIanalysisshowedthatbonemarrowmesenchymalstemcellconditionedmediumsignificantlydecreasedapoptosisofH9C2ce