人基质细胞衍生因子1对骨髓间充质干细胞增殖的影响的论文

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1、人基质细胞衍生因子1对骨髓间充质干细胞增殖的影响的论文作者：孔霞,唐俊明,郭凌郧,杨建业,陈龙,黄永章,王家宁【摘要】目的：探索人基质细胞衍生因子1（sdf1）对间充质干细胞（msc）增殖的影响.方法：采用经典的全骨髓贴壁法培养msc,通过成骨、成脂肪等多向诱导分化以及流式细胞仪分析其表面标记（cd133，cd34，cd90，cd105）等鉴定msc特征；以p3msc为实验材料，采用h3tdr参入法分析sdf1对msc增殖的影响.以50nmol/l渥曼青霉素，10mmol/lly294002，50mmol/lpd98059，0.1g/lamd3100等分别处理p3msc,观察sd

2、f1影响msc增殖的信号机制.结果：培养的msc呈现出cxcr4，cd90和cd105强阳性，具有成骨、成脂肪等多向分化能力；含有100mg/lsdf1的20ml/l促进了msc增殖，而含有100mg/lsdf1的150ml/lfbs抑制了msc增殖.sdf1抑制msc增殖的效应与其使msc停滞在g1/s期有关.促分裂原活化蛋白激酶p38mapk阻断剂sb203580和cxcr4阻断剂amd3100取消了sdf1抑制msc增殖的效应，而细胞外信号调节激酶阻断剂pd98059加强了sdf1抑制msc增殖的效应.结论：sdf1/cxcr4介导的抑制msc增殖的效应与促分裂原活化蛋白激

3、酶和细胞外信号调节激酶等信号分子有关.【关键词】人基质细胞源衍生因子1;间充质干细胞;增殖;促分裂原活化蛋白激酶　　【abstract】aim:toexploretheeffectofstromalcellderivedfactor1alpha(sdf-1α)onmesenchymalstemcell(msc)proliferation.methods:msccultureedarroethod;mscultidifferentiationandsurfacemarkerassay(cxcr4,cd133,cd34,cd90,cd105);aftermscsg/lsdf1a,50nm

4、ol/lannin,10mmol/lly294002,50mmol/lpd98059and0.1g/lamd3100inhibitors,theproliferationrateseasuredby［3h］thymidineincorporationassay.results:culturedmscshadtheabilityofmultidifferentiationandhighlyexpressedcxcr4,cd105andcd90.20ml/lfbsincluding100mg/lsdf1apromotedmscproliferation,hoscsto150ml/lfbsin

5、cluding100mg/lsdf1acouldinducemarkedinhibitionofmscproliferationthroughthearrestintheg1/scheckpoint.anditsinhibitoryeffectonmscproliferationitogenactivatedproteinkinase（mapk）inhibitorsb203580andcxcr4inhibitoramd3100.hoscproliferationscproliferationisrelatedtoerk1/2andp38mapk.　　【keyesenchymalstemce

6、ll;proliferation;mapk　　0引言　　骨髓来源的间充质干细胞（bonemarroesenchymalstemcell,msc）在一定条件下可以分化为心肌、成骨、软骨、脂肪、胰岛、肌腱等多种类型的细胞［1］.在心肌内、静脉内、冠脉内等不同途径移植msc或粒系集落刺激因子动员骨髓发现其可以迁移到心肌梗死部位，通过参与血管新生、心肌再生等改善修复受损的心脏［1］.有研究［2］发现，sdf1/cxcr4轴不仅调控造血干细胞（hematopoieticstemcell，hsc）的迁移，而且也影响hsc的增殖和分化.新近研究发现msc表达cxcr4［3］，显示sdf1/cxcr4轴可

7、介导msc的迁移［4］.但是就sdf1/cxcr4轴是否影响msc的增殖分化，目前仍不清楚.我们利用h3tdr参入法检测sdf1α对msc增殖的影响，并初步探索sdf1α影响msc增殖的信号机制.　　1材料和方法　　1.1材料spf级em培养基（美国gibcol公司）；胎牛血清（fetalbovineserum，fbs，杭州四季青生物工程有限公司）；胰酶（美国sangon公司）；co2细胞