实验二温度和pH对酶活性的影响ppt课件.ppt

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1、实验二温度和pH对酶活性的影响实验目的1、了解温度对酶活性的影响；2、了解酶活性的最适pH及掌握一种检测最适pH的方法实验原理酶的催化作用受温度的影响，在最适温度下，酶的反应速度最高。大多数动物酶的最适温度为37～40℃，植物酶的最适温度为50～60℃。酶对温度的稳定性与其存在形式有关。有些酶的干燥制剂，虽加热到100℃，其活性并无明显改变，但在100℃的溶液中却很快地完全失去活性。低温能降低或抑制酶的活性，但不能使酶失活。淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色。糊精按其分子的大小，遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不显颜色，麦芽糖遇碘也不显色。在不同温度下，淀粉

2、被唾液淀粉酶水解的程度，可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断。酶的活力受环境pH的影响极为显著。不同酶的最适pH值不同。本实验观察pH对唾液淀粉酶活性的影响，唾液淀粉酶的最适pH约为6.8。实验试剂1、0.2%淀粉的0.3%氯化钠溶液2、淀粉酶或稀释50～100倍的唾液用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一口蒸馏水，半分钟后使其流入量筒并稀释50-100倍，(稀释倍数可根据各人唾液淀粉酶活性调整)混匀备用。3、碘化钾-碘溶液实验器材1、试管及试管架2、恒温水浴3、冰浴4、沸水浴取3支试管，编号后按下表加入试剂:1、温度对酶活性的影响管号淀粉溶液（ml）淀粉酶（ml）煮沸的淀粉

3、酶（ml）11.5121.5131.51各取不同pH的缓冲液3ml，分注入4支带有编号码的试管中，随后于每个试管中添加0.5%淀粉溶液2ml和淀粉酶2ml。将各试管内容物混匀，并依次置于37℃恒温水浴中保温。每隔1分钟由第3管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加1小滴碘化钾－碘溶液，检验淀粉的水解程度。待混合液变为棕黄色时，向所有试管依次添加1－2滴碘化钾－碘溶液。观察各试管中物质呈现的颜色，分析pH对唾液淀粉酶活性的影响。锥形瓶号0.2mol/L磷酸氢二钠（ml）0.1mol/L柠檬酸（ml）pH15.154.855.026.053.955.837.722.286.849.

4、720.288.0取4个50ml锥形瓶，并编号。用移液管按下表添加0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和0.1mol/L柠檬酸溶液制备pH5.0～8.0的四种缓冲液。2、pH对酶活性的影响注意事项1．加入酶液后，要充分摇匀，保证酶液与全部淀粉液接触反应，得到理想的颜色梯度变化。2．取混合液前，应将试管内溶液充分混匀，取出试液后，立即放回试管中一起保温。思考题1、唾液淀粉酶的最适温度是多少?2、低温对酶有什么影响?3、什么是酶的最适温度及其应用意义？4、什么是酶反应的最适pH？对酶活性有何影响？