第二章 提取分离方法和技术ppt课件.ppt

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1、第二章天然药物化学成分提取分离方法与技术（5）Extractionandisolationtechnology第三节天然药物化学成分的结构测定主要内容测定程序结构测定中常用波谱法简介紫外吸收光谱红外吸收光谱核磁共振谱质谱一、测定程序第三节天然药物化学成分的结构测定(一)化合物的纯度确定在进行结构测定前必须进行纯度鉴定，样品的纯度是获得准确信息的重要保证。纯度的检查可通过样品的晶形、熔点、溶程、比旋度、色泽等物理常数进行判断，如果是液体化合物需要测其沸点、比重、折光率及比旋度等。纯的化合物外观和形态较为均一，通常有明确的熔点，熔程一般应小于2℃

2、。实际研究中，更多的是采用薄层色谱或纸色谱方法。使用这两种色谱方法进行测定时，一般要求至少选择在三种溶剂系统中展开，并要求样品呈单一斑点，方可判断其为纯化合物。必要时，需采用高效液相色谱加以确认。一、测定程序第三节天然药物化学成分的结构测定(二)分子式的测定确定一个化合物的分子式时，经典的方法是先进行元素定性分析，再测定各元素在化合物中所占的百分含量，从而求出化合物的实验式。并依据测出的相对分子质量，计算出该化合物的分子式。此法样品用量较大，准确性差。目前，最常用、最精确的是质谱法（MS），高分辨质谱（HR-MS）不仅可给出化合物精确的分子量

3、，还可直接给出分子式。还可利用同位素丰度比法求算。其原理是通常组成有机化合物的主要元素(氟，磷、碘除外)均由相对丰度比一定的同位素所组成，且重元素一般比轻元素重1～2个质量单位。故由重元素组成的分子将比由轻元素组成的分子重1一2个质量单位。据此。在大多数有机化合物的MS图上，如能见到稳定的分子离子峰[M]+.时，则在高出其1～2个质荷比(m/z)处还可同时见到[M+1]+.及[M+2]+.两个同位素蜂;对一定的化合物来说，其[M]+.、[M+1]+.及[M+2]+.峰的相对强度应为一定值(含Cl、Br时除外),据此，可算出化合物的分子式。具体

4、方法参见有关文献。同位素丰度比法对分子量在500以下、又能生成稳定分了离子的化合物来说常优先选用。一、测定程序第三节天然药物化学成分的结构测定(三)结构测定化合物的分子式被确定之后，就需要推定官能团和分子骨架。一般先计算化合物的不饱和度，准确计算出结构中含有的双键数或环数，并结合所测的物理常数、化学定性试验、化学降解等反应，以及所测UV,RI,NMR和MI等波谱数据，综合分析，以确定化合物含哪些官能团，具何种母核，属于哪类化合物。不饱和度计算不饱和度(u或Ω)，表示分子中存在的双健或环的数目，是解析化合物的一个重要参教。计算不饱和度的方法如下

5、:1、化合物官能团和分子骨架的推定计算不饱和度的方法如下:一、测定程序第三节天然药物化学成分的结构测定结合文献调研，综合分析谱学数据及官能团定性、定量分析结果以及与已知化合物进行比较或化学沟通(化学降解、衍生物制备或人工合成)以确定其平面结构；通过测定CD谱、ORD谱、NOE谱或2D-NMR及进行X射线衍射分析以确定其立体结构。2、推断并确定分子的平面结构和立体结构(三)结构测定二、结构测定中常用波谱法简介第三节天然药物化学成分的结构测定(一)紫外吸收光谱紫外吸收光谱(ultravioletabsorptionspectrum,UV)是用不同

6、波长的紫外光为光源(常用波长范围在200--400nm)，依次照射一定浓度的样品溶液，化合物分子因紫外线照射吸收能量而产生电子跃迁，在不同波长下测定其吸收度，并用波长对吸收度或摩尔吸收系数作图而得的吸收光谱图也称吸收曲线。紫外光谱中吸收峰所对应的波长称为最大吸收波长(λmax),吸收曲线的谷所对应的波长称为最小吸收波长(λmin)，若吸收峰的旁边出现小的曲折，称为肩峰，用λsh表示，若在最短波长200nm处有一相当强度的吸收却未显现吸收峰，称为末端吸收。二、结构测定中常用波谱法简介第三节天然药物化学成分的结构测定(一)紫外吸收光谱紫外光谱是电

7、子光谱，是化合物分子中的电子从低能级的基态跃迁到高能态时吸收了紫外光而产生的吸收光谱。一般而言，只有在分子结构中具有共扼双键、发色团和共扼体系的助色团，即在分子中具有产生:π→π*、n→π*跃迁的化合物才能在紫外光区产生紫外吸收光谱。二、结构测定中常用波谱法简介第三节天然药物化学成分的结构测定(一)紫外吸收光谱UV常用术语生色团：能在某一段光波内产生紫外吸收的主要功能基团，称为这一段波长的生色团或生色基,是不饱和基团：（C=C、C≡C、C=O、COOH、COOR、COR、CONH2、NO2、－N=N－，Ph-…）助色团：当具有非键电子的原子或

8、基团连在双键或共轭体系上时，会形成非键电子与电子的共轭(p-共轭)，从而吸收向长波方向位移，颜色加深，这种自身不产生紫外吸收(>200nm的光)但能产生助色效应