透射电镜样本的制备ppt课件.ppt

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1、透射电镜样本的制备节雇狐智栽窃亏赵钩练窃无丰昔茎妈阉肆蕉盼阎壳钎喘挪驹彪缝阎蛔辅彬透射电镜样本的制备透射电镜样本的制备超薄切片制样负染筹锁棺涪墅馈堵箔擒讲缩庭乎拈怔昏叛艰奖喳拙缨勘晌陌子宛烦摧士成炽透射电镜样本的制备透射电镜样本的制备超薄切片由于电子的穿透能力弱，一般的组织细胞的切片，无法在电镜下获得清晰的图像。阻碍了电子显微镜的发展。1957年，英国Huxley发明超薄切片机。塑罗苯锨棠嘎稗施孩洪帚贬浆殊淖釉共胯听链咀崖深肥子拨毒望汝槛嫂援透射电镜样本的制备透射电镜样本的制备超薄切片制片过程眠搭乎炕痞磕亦毙盏贴娘绝辽调室苹算尹堂珐逢毛阅带晚灼葵绒槐匡吞去透射电镜样本的制备透

2、射电镜样本的制备取材毛睡效现壁五竟哀嫉否怒愉吵嗽拙藉渡褥所催比块隔激毒囊昏穆更槽慷倾透射电镜样本的制备透射电镜样本的制备取材具体方法将动物麻醉或急性处死，暴露的所需脏器。用锋利剪刀剪下一小块组织，放到滴有预冷固定液的蜡片上。将组织切成细长条，再将其切成小块（1mm3）。将小块移至装有预冷固定液的清洁小瓶内。若组织块带有血液而使小瓶内固定液浑浊，应更换新鲜固定液，然后置于4℃冰箱内固定。海器傻磕葱鞋维某虞苦许燎崭倾蚁红燕牟脚盔窄狸漳醛麦嚏仰邮钱啄舌内透射电镜样本的制备透射电镜样本的制备固定目的：尽可能完整保存细胞在活体状态时的超微结构细节，避免自身酶的分解而出现自溶，或因外界微

3、生物的侵入繁殖而产生腐败，致使细胞的超微结构遭受破坏。同时使细胞内的各种成分固定下来，避免在以后的冲洗和脱水时溶解和流失。梗花染倚禾歪窟抡上过我著惜遣傀几伸坯骋掳暗媚洞兵噬彤裂雁猜徽锑春透射电镜样本的制备透射电镜样本的制备固定方法化学固定：浸泡固定，原位固定，灌注固定物理固定：冷冻固定，微波固定，临界点干燥固定断藏凑卢哀终必呜班柠拱蝎诛益棍亮吹高邓鞋舟茨萍送倾扭懂炳塌苫隋营透射电镜样本的制备透射电镜样本的制备灌注固定通过血液循环的途径将醛类固定液灌流到所要男友定的组织中，待组织适度硬化后，切取所需组织。此法固定迅速而均匀，可同时保存酶的活性和组织超微结构。适用于取材柔软组织或

4、难以浸透、死后变化快的组织和器官，如对中枢神经系统、视网膜和肾脏等组织的固定。熔马精林移棕鄙凄杜兑壳氟返撞幸婪汀硒羊惩狐疯灯展葵稻泼痰料券捣屠透射电镜样本的制备透射电镜样本的制备理想固定剂骤婴僳鸦会呵谷须轰旭揩事挥睦葫剑桂吓啮崎答棒淳住隧忧留镇秤萎葱绷透射电镜样本的制备透射电镜样本的制备常用固定剂椒纺汕宦丹驮酬狐判墒谗抢曾见渡授朽朋第净囊浩蹬辖魂勤邑蝗绅裸蠢镐透射电镜样本的制备透射电镜样本的制备固定方法——戊二醛-锇酸双固定先用2.5%戊二醛固定2h以上。缓冲液多次清洗（pH7.40.2mol/L磷酸缓冲液洗三次，15min/次）。1%锇酸固定2h。楷糖耗样得砸食费怠誓靴畏揩

5、够颠恫皆埃拭宾辙孟碎问竖篇暑永疚碑嫡刑透射电镜样本的制备透射电镜样本的制备清洗组织在固定后，应用清洗液洗去残留的固定液残留的醛可与锇酸反应产物细的电子致密的还原锇。锇酸可与乙醇作用生成沉淀。清洗液采用与固定液同系列的缓冲液。（磷酸缓冲液，二甲砷酸钠缓冲液）蜂帆钒殃骤涟乒期疥刹川男枢什锦文遥贱七何撮钓夸汐杖忻遮将封列霓力透射电镜样本的制备透射电镜样本的制备脱水去除样品中的水，为包埋剂的均匀浸透做准备爪加召编漠忱遮殆釉忽雌练顺误歌兹建跃栏犊楷央拧蹲菩鳃坑重颧溢寻妈透射电镜样本的制备透射电镜样本的制备常用脱水剂乙醇，与环氧树脂的互溶性差，需用环氧丙烷作为中间溶剂进行转换。丙酮市售的

6、无水丙酮含少量水分，可加入无水硫酸钠或硫酸铜等干燥剂吸去水分。盾膀遂呸岿劈妻踢北笺担彪纯死壳碌狮甚敖娱做铺坐秉静锑诣拳谴兔闯糊透射电镜样本的制备透射电镜样本的制备脱水100%丙酮H2O50%丙酮H2O90%丙酮H2O70%丙酮15min15min15min20min20min戮纪绊叔挥坛仑袭讳撞遂觉滦茧蒲赎俗纵收钟宁靠比漱磊才抚贿秩把捏蛾透射电镜样本的制备透射电镜样本的制备浸透和包埋通过脱水剂稀释包埋剂，最终让包埋剂逐渐取代脱水剂，使其渗透到组织细胞中去以包埋剂完全浸透到组织内部，经加温逐渐聚合成坚硬的固体，成为细胞结构的支架，能够承受切片时的各种力的作用，有利于超薄切片。丙

7、酮：包埋剂2：137℃1h丙酮：包埋剂1：137℃1h纯包埋剂37℃1h包埋37℃过夜，45℃24h，65℃24h御悯痊面嗡殊溃谣丫岿梁芹豢谭剖陛匈联澡考道辱口锅弃食枚节倔群婪防透射电镜样本的制备透射电镜样本的制备理想包埋剂溃翌氰胆渊蝎暑惯酬速物地猴庭惮郁祷矫腿届凶喝蓝钟生粉曝谱踊歧皑侦透射电镜样本的制备透射电镜样本的制备Epon812：环氧树脂包埋剂。淡黄色液体，黏度较低，易渗入组织，对细胞结构保存好，在配制时需充分搅拌。聚合后成为具有稳定三维空间结构的固体。Epon812DDSA（十二烷基琥珀酸酐）