植物基因转化受体系统ppt课件.pptx

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1、第七章植物基因转化受体系统主要内容1、植物基因转化受体的条件；2、植物基因转化受体的类型及其特性；3、植物基因转化受体系统的建立；4、受体系统常见的问题及其解决途径。我国科学工作者，用转基因技术，可以转变矮牵牛花的花色，使矮牵牛花的花色更加丰富多彩。转基因牵牛花转基因油菜油菜是人们食用油的主要来源之一。一般油菜籽的含油量约为40％左右。通过转基因技术，培育出来的油菜籽，可以大大地提高它的出油率。而且油的纯度质量更好转基因小麦从植物体中分离出合成赖氨酸的基因，把这基因转入小麦植株中，培育出转基因小麦。用这种转基因小麦制造出来的面粉，更适合用来烤面包，而且面粉

2、中赖氨酸含量高，这种面包的营养价值高。第一节植物基因转化受体的条件植物基因转化的受体系统：一般是指通过组织培养途径或其他非钻石培养途径，能够高效、温度地再生无性系，并能接受外源基因的整合，对用于转化选择的抗生素敏感的再生系统高效稳定的再生能力具有较高的再生频率；具有良好的实验稳定性和重复性。较高的遗传稳定性植物周倜系统接受外源基因后不影响吱声非改造遗传体系又能外源基因遗传给后代，保持其遗传的稳定性同时选材时注意尽量减小受体系统体细胞变异的发生具有温度的外植体来源由于基因转化频率低，实验重复较多，因此需要稳定的外植体来源；常用转化外植体：种子，无菌实生苗的胚

3、轴、子夜或幼叶，一些植物的试管苗，以及可较高频率诱导的营养变态器官。抗生素敏感性为了便于转化子的筛选需要使用标记基因（如抗生素抗性基因等）选择性抗生素需满足的条件：（1）植物受体材料对所选用的抗生素具有一定的敏感性；（2）抗生素对受体植物没有剧烈的毒性，不会很快杀死植物细胞对抗生素过度敏感或过度钝化的植物材料都不适合于构建植物转基因的受体系统农杆菌敏感性农杆菌介导的基因转化由于具有转化效率高、多为单拷贝插入等优点，是常用的植物基因转化方法；使用农杆菌介导的转化方法，需要植物受体对农杆菌敏感在选择农杆菌转化系统前，必需测试受体系统对农杆菌的敏感性第二节植物基

4、因转化受体的类型及其特性由于众多类型的植物离体培养技术的完善，使转基因受体系统有了很大的选择范围不同的受体类型具有不同的缺点，适合的转化方法也不同实际操作中应根据受体的特性，基因转化方法，选择适宜的受体系统特点外植体来源广泛扩繁量大，可获得较多的转化植株使用的植物范围广从愈伤组织分化的不定芽的多细胞起源特点，形成嵌合体较多再生植株无性系变异较大，转化的外源基因遗传稳定性较差注意问题直接使用外植体组织进行农杆菌侵染时，应注意从活跃生长的植物部位取材用愈伤组织进行转化，应在愈伤组织细胞处于分省细胞状态时进行转化，此时易于接受外援基因，转化效率高愈伤组织必需保持

5、良好的生长状态，继代周期不能太长不经过愈伤组织的受体系统不经过愈伤组织的受体系统也称为直接分化再生系统，是指外植体细胞越过脱分化阶段，直接分化出不定芽，从而获得再生植株的受体系统；研究显示，采用叶片、幼茎、子叶、胚轴以及一些营养变态器官为外植体时，在适宜的培养技术控制下，均可直接分化出芽特点获得再生知足周期短，操作简单体细胞无性系变异相对较小，可较好的维持受体植株的遗传特性转化的外源基因能稳定遗传（特别是茎尖）同样可能出现较多的嵌合体外植体直接分化出芽较难，转化细胞直接分化成植株难度更大注意问题直接分化受体系统比较适合于无性繁殖植物选材：从组织类型上讲，子

6、叶、叶片、胚轴和某些营养变态器官通常比较容易诱导；从细胞状态上讲。薄壁细胞状态外植体较容易诱导原生质体再生系统原生质体由于除去了细胞壁的屏障，能够直接高效的摄取外源DNA或遗传物质，甚至细胞核适合于现在建立的所有转化方法特点原生质体受体系统利于准确的转化和鉴定转化原生质体获得的转基因植株嵌合体少但由于目前许多的原生质培养体系还不成熟，受原生质体培养技术的限制，转化试验的重复性较差原生质体培养周期长，受体细胞本身的体细胞变异频率高，遗传稳定性差细胞系及其体细胞胚受体系统经过筛选和优化的植物细胞悬浮培养的细胞系，具有较好的遗传和生理一致性，经过培养基调节，可形

7、成体细胞胚培养技术相对于原生质体培养来说要容易的多，转化效率优于其他组织培养系统被认为是最为理想的基因转化受体系统特点胚性细胞繁殖量大，同步性好，具有较强的接受外源DNA的能力，转化率高转化后胚性细胞可通过体细胞胚途径发育成完整植株，嵌合体少体细胞胚具有双极性，减少了不定芽发育途径中的生根培养过程来自同一体细胞胚的后代个体间遗传背景一致，无性系变异小生殖细胞受体系统以生殖细胞如花粉粒和卵细胞为周倜细胞进行基因转化的系统称为生殖细胞受体系统，也叫种质系统。途径：（1）利用小孢子和卵细胞的单倍体培养，诱导出胚性细胞或愈伤组织细胞，建立单倍体的基因转化受体系统；

8、（2）直接利用划分和卵细胞受精过程进行基因转化，如花粉管通道法，花