红细胞检验的基础理论

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时间:2017-12-14

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1、红细胞检验的基础理论红细胞膜红细胞膜的组成与结构红细胞膜的功能影响膜稳定的因素红细胞膜的组成与结构红细胞(redbloodcell,erythrocyte)是结构最简单的细胞,特别是成熟的红细胞没有细胞器,质膜是它的惟一结构,并且易于提纯和分离,是研究膜结构的最好材料。红细胞膜的组成与结构成熟的红细胞呈双面凹或单面凹陷的盘状,直径为7.5~8.3μm,厚度1.7μm,体积8.3μm3,表面积为14.5μm2,表面积与体积的比值较大,有利于细胞变形、气体交换和携带。红细胞膜的组成与结构蛋白质--4

2、9.3%脂质--42%糖类--8%无机盐—少量三层区带结构红细胞膜的组成与结构外层中间层内层红细胞膜的组成与结构血浆排列整齐的磷脂分子组成双分子层,中间嵌入未酯化的胆固醇及糖脂分子。磷脂的“头”部(羧基端)一层面向胞浆,另一层面向血浆。磷脂含酰基的长“尾”部(氨基端)交织成网状,成为膜的亲脂质而疏水的核心。在正常温度下,疏水核心处于液晶状态。胞浆红细胞膜的组成与结构--蛋白质红细胞膜的蛋白质可区分成十多种成分。所有的糖蛋白均暴露在膜外层脂质的表面,呈树枝样结构。这些蛋白质大多携有红细胞抗原及/或

3、受体,如血型糖蛋白,各种运转蛋白(阴离子运转蛋白、葡萄糖运转蛋白等),Na-K-ATP酶等。这些完整的膜蛋白贯穿或延伸在双层脂质中,与疏水的脂质核心相互作用,紧紧地固定在膜上。不含糖蛋白质的分布只限于邻近内膜的表面。这些蛋白中有酶(如三磷酸甘油醛脱氢酶、磷酸甘油酸激酶)、结构蛋白和血红蛋白。这些膜蛋白处于脂质层之外,与膜的结合相当松散。在外膜的表面有一层膜支架蛋白,其主要成分为收缩蛋白及肌动蛋白。红细胞膜的组成与结构--蛋白质SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰凝胶电泳)利用SDS处理蛋白

4、质后,在变性条件下进行的聚丙烯酰凝胶电泳。即“变性”电泳。分离依据:蛋白质分子的大小(质量)。红细胞膜的组成与结构--蛋白质红细胞膜的组成与结构--蛋白质SDS-PAGE红细胞膜的组成与结构--蛋白质几种主要的红细胞膜蛋白是(其中血影蛋白、血型糖蛋白、带3蛋白约占膜蛋白的60%以上):●血影蛋白(spectrin)●血型糖蛋白A(glycophorinA)●带3蛋白(band3protein)●肌动蛋白(actin)●锚定蛋白(ankyrin)●带4.1蛋白(band4.1protein)●内收

5、蛋白(adducin)红细胞膜骨架(theerythrocytemembraneskeleton)红细胞质膜的内侧有一种特殊的结构,是由膜蛋白和纤维蛋白组成的网架,它参与维持细胞质膜的形状并协助质膜完成多种生理功能。锚蛋白(ankyrin):与血影蛋白和带3蛋白的胞质部相连,将血影蛋白网络连接到质膜上。血影蛋白(spectrin)又称收缩蛋白,是红细胞膜骨架的主要成份,约占膜提取蛋白的30%。带三蛋白:是阴离子载体,通过交换Cl-,使HCO3-进入红细胞。为二聚体。血影蛋白四聚体游离端与短肌动蛋

6、白纤维(约13~15单体)相连,形成血影蛋白网络。并通过带4.1蛋白与血型糖蛋白连结,通过锚蛋白与带3蛋白相连。这一骨架系统赋与了红细胞质膜的刚性与韧性,得以几百万次地通过比它直径还小的微血管、动脉、静脉。至于红细胞的双凹型可能还与肌球蛋白的作用有关。红细胞膜的组成与结构细胞表面存在着一层富含糖类物质的结构,称为细胞外被(cellcoat)或糖萼(glycocalyx)。用重金属染料如:钌红染色后,在电镜下可显示厚约10~20nm的结构,边界不甚明确。细胞外被是由构成质膜的糖蛋白和糖脂伸出的寡糖

7、链组成的,糖脂和糖蛋白的糖链部份,几乎都裸露于膜的外表面。红细胞膜的组成与结构红细胞膜脂质分为磷脂、胆固醇及中性脂肪和糖脂三大类红细胞膜磷脂主要是甘油磷脂(磷脂酰胆碱(PC)、丝氨酸磷脂(PS)和乙醇胺磷脂(PE))和鞘磷脂(SM)。所有的膜脂都是一些双嗜性分子。即它们的一端是亲水性极性基团,另一端是疏水性非极性基因。由于疏水性基团受到具有极性的水分子的排斥。脂质的熔点较低,在一般体温条件下是液态,脂质分子的这种特性是膜具有一定流动性的一个前提条件。红细胞膜的组成与结构膜结构的两个最基本的特征流

8、动性不对称性红细胞膜的组成与结构--流动性流动性由膜脂和蛋白质的分子运动两个方面组成。膜脂分子的运动1.侧向扩散:同一平面上相邻的脂分子交换位置2.旋转运动:膜脂分子围绕与膜平面垂直的轴进行快速旋转。3.摆动运动:膜脂分子围绕与膜平面垂直的轴进行左右摆动。4.伸缩震荡:脂肪酸链沿着与纵轴进行伸缩震荡运动。5.翻转运动:膜脂分子从脂双层的一层翻转到另一层。是在翻转酶(flippase)的催化下完成。6.旋转异构:脂肪酸链围绕C-C键旋转,导致异构化运动。红细胞膜的组成与结构--流动性影响膜流动的因

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