《红细胞检验》ppt课件

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1、1第二章红细胞手工检验--红细胞检验主讲人：丁肖华医学技术学院红细胞检查红细胞计数血红蛋白测定血细胞比容红细胞平均指数计算网织红细胞计数嗜碱性点彩红细胞计数红细胞沉降率测定3红细胞检查红细胞的发育过程造血干细胞→早幼红细胞→中幼红细胞→晚幼红细胞→网织红细胞→成熟红细胞上一页下一页返回EPO红系祖细胞→原始红细胞成熟红细胞120天上一页下一页返回铁→铁代谢原卟啉→胆色素代谢珠蛋白→蛋白质代谢衰老红细胞红细胞的发育过程6检测方法1.手工显微镜法：2.血液分析仪法：一、红细胞计数手工显微镜法7定义：用等渗稀释液将血液稀释一定倍数后，滴入改良

2、Neubauer计数板，在显微镜下计数一定范围内的红细胞数，经换算即可求得每升血液中的红细胞数。8改良牛鲍计数板计数板910红细胞稀释液组成与作用稀释液组成作用备注Hayem液NaCl、Na2SO4、HgCl2调节渗透压、增加红细胞悬浮性和防腐作用高球蛋白血症时，蛋白质沉淀致红细胞凝集枸橼酸钠稀释液NaCl、枸橼酸钠、甲醛NaCl和枸橼酸钠调节渗透压，枸橼酸钠具抗凝，甲醛防腐生理盐水生理盐水急诊时用1%甲醛生理盐水甲醛、生理盐水急诊时用11【操作】1.准备计数板2.加稀释液：2ml3.加血：10μl混匀4.充池5.计数6.计算：红细胞数

3、=N/5*25*10*200*106/L121.分析前质量控制患者准备、标本采集、存储温度和时间2.分析中质量控制计数误差（技术误差和固有误差）、白细胞影响3.分析后质量控制结合临床资料质量控制131.手工显微镜法（1）血液分析仪的校正（2）白细胞减少时的对照核实。（3）血小板计数受小红细胞干扰时的校正2．血液分析仪法方法精确，且操作简便、快速，已广泛应用。方法学评价14成年：男性（4～5.5）×1012/L女性（3.5～5.0）×1012/L新生儿：（6.0～7.0）×1012/L参考值151．生理性变化(1)年龄与性别的差异(2)精

4、神因素(3)剧烈体力运动和劳动(4)气压降低(5)妊娠中、后期临床意义162．病理性变化(2)红细胞增多1)原发性红细胞增多2)继发性红细胞增多3)相对性红细胞增多(1)红细胞和血红蛋白量减少1）红细胞生成障碍2）造血原料缺乏3）利用障碍红细胞4）破坏过多和失血临床意义17医学决定水平①高于6.8×l012/L，应采取相应的治疗措施。②低于3.5×1012/L为诊断贫血的界限，应继续寻找原因。③低于1.5×l012／L应考虑输血指该项目结果如高于或低于某一个值时就应该采取一定的措施，为患者处理起提供依据的作用。临床意义血红蛋白(血色素，

5、Hb或HGB)组成二、血红蛋白测定珠蛋白：4条，种属特异性亚铁血红素：4个，无种属特异性19每个Hb分子由2条α类肽链和2条β类肽链组成，每条珠蛋白肽链含有1个亚铁血红素。在人体不同生长时期，Hb种类与比例不同：21定义：血红蛋白测定是测定外周血液中各种血红蛋白的总浓度，用g/L表示血红蛋白测定221．氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定法2．其他测定法十二烷基硫酸钠血红蛋白（SDS-Hb）法叠氮高铁血红蛋白(HiN3)法碱羟血红蛋白法沙利(Sahli)酸化血红蛋白法溴代十六烷基三甲胺血红蛋白测定法（CTAB）等检测原理23HiCN转化液：

6、即文齐氏液540nm处有一吸收波峰，用分光光度计测定换算成每升血液中的血红蛋白浓度，或制备标准曲线供查阅。CN-血红蛋白高铁血红蛋白氰化高铁血红蛋白高铁氰化钾540nm血红蛋白浓度吸光度24血红蛋白浓度计算公式：Hb(g/L)=Aג540HiCN/44×64458/1000×251=A×367.7Aג540HiCN：测定管吸光度44：毫摩尔消光系数64458/1000：1mmol/LHb溶液中所含Hb克数251为稀释倍数25血红蛋白SDS-HbSDS540nm血红蛋白浓度吸光度十二烷基硫酸钠血红蛋白（SDS-Hb）法方法优点缺点HiCN

7、操作简便、快速(5min)，结果稳定可靠，试剂容易保存，便于质控，为参考方法①KCN有剧毒②高白细胞和高球蛋白可致浑浊。③HbCO转化慢SDS-Hb不用剧毒试剂、无公害，操作简便，呈色稳定，准确度和精度高①SDS-Hb消光系数未确定②SDS质量差异性大。③SDS溶血活力大，不适于同时进行自动化分析AHD575同HiCN法，不用剧毒试剂不便于自动检测、氯化血红素纯度达不到标准HiN3准确度和精密度高，试剂毒性低HbCO转化慢CTAB溶血活力强，但不破坏白细胞，适合自动化分析精密度和准确性低2627分析前质量控制：同红细胞计数分析中质量控制

8、技术误差：稀释倍数、分光光度计波长、光缝、比色杯光径需校正HiCN转化液：棕色玻璃瓶HiCN参考液：关键质控物：室内质控分析后质量控制：同红细胞计数质量控制28①成年：男性：120～160g／L；女性：ll