高三一轮复习选修1-专题2-微生物的培养与应用ppt课件.ppt

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1、专题2微生物的培养与应用第2课时　微生物的实验室培养土壤中分解尿素的细菌的分离与计数分解纤维素的微生物的分离高频考点1、培养基的种类、营养要求及配制原则2、无菌技术的内容及方法3、分离纯化微生物的研究思路、方法一、培养基的营养构成1、微生物需要的五大类营养物质：碳源、氮源、生长因子、无机盐和水另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质（如:生长因子）以及氧气的要求。培养乳酸菌——添加维生素培养霉菌——PH调至酸性培养细菌——PH调至中性或微碱性培养厌氧微生物——无氧环境【特殊要求】定义作用主要来源碳源能提供碳元素的物质构成生物体的物质，异养生物的能源物质无机物：CO2、NaHCO3有机

2、物：糖类、脂肪酸、石油、花生粉饼等异养微生物的碳源是有机物，最常利用的是糖类；自养微生物利用CO2或碳酸盐作为碳源（以无机碳源作为主要碳源）。定义作用主要来源氮源能提供氮元素的物质合成蛋白质、核酸以及含氮代谢产物无机物：N2、NH3、氨盐、硝酸盐有机物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等能把氮气作为氮源的只限于固氮菌、某些放线菌和藻类等。霉菌仅以无机氮素化合物为氮源；部分细菌不用有机氮化合物作为氮源就不能生长。生长因子生长不可缺少的微量有机物酶和核酸的成分维生素、氨基酸、碱基等(1)微生物最常利用的碳源是糖类(特别是葡萄糖)，常利用的氮源是氨盐、硝酸盐。(2)在微生物所需要的化合物中需要量最大的是碳

3、源。(3)微生物之所以需要补充生长因子，是由于缺乏合成这些物质所需要的酶或合成能力有限。【特别提醒】结果常用的方法消毒仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法灭菌杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌二、消毒和灭菌培养基培养皿空气接种环双手牛奶②巴氏消毒③化学消毒⑤紫外线消毒⑥高压蒸气灭菌①灼烧灭菌④干热灭菌常用的消毒方法和灭菌方法无菌技术主要操作要求:①实验前应对操作空间、操作人员消毒，对所有器具和培养基灭菌。②实验进行时需在酒精灯火焰周围无菌区操作，另外要避免已灭菌处理材料再次污染

4、。三、微生物实验室培养1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板2、微生物接种最常用的方法中的是：平板划线法和稀释涂布平板法如果未接种的培养基在恒温箱中保温1~2天后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。思培养基的制作是否合格？平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。平板划线的操作方法为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？第一步：避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前：杀死上次划线结

5、束后接种环上残留的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。思在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。思稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。1、根据培养基的用途可分为:四、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数培养基中加入某种化学物质，将允许特定种类的微

6、生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长。选择培养基Q3:培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入_____________以纤维素作为唯一碳源的选择培养基，可以分离分解纤维素的微生物。Q1:分离利用石蜡油的微生物，用____________________的培养基Q2:分离产生蛋白酶的微生物，用___________________的培养基Q4:分离固氮微生物用______的培养基。以石蜡油作为唯一碳源以蛋白质作为唯一氮源青霉素缺氮鉴别培养基如：可用伊红—美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽)在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物

7、。2、统计菌落数目的方法(1)显微镜直接计数法①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计一定容积的样品中微生物数量。②方法：用计数板计数。③缺点：不能区分死菌与活菌。四、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(2)间接计数法(活菌计数法)①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。②为了保证结果准确，一般选择菌落数在30~30