选修一专题2微生物的培养与应用.ppt

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1、一、微生物的实验室培养1．培养基(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的。(2)成分：一般都含有碳源、氮源、水和无机盐，还需满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。2．无菌技术营养基质煮沸消毒法灼烧灭菌3．实验操作(1)牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备计算→→溶化→灭菌→。称量倒平板(2)微生物的分离方法①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面的操作，将聚集的菌种逐步分散开来。②稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到表面，进行培养。连续划线琼脂固体培

2、养基二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1．分离原理：土壤中细菌之所以能分解尿素，是由于它们体内能合成，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到催化作用。2．统计菌落数目：统计样品中的活菌一般用。3．实验流程：土壤取样→制备→微生物的培养与观察→细菌的计数。脲酶稀释涂布平板法培养基三、分解纤维素的微生物的分离1．纤维素酶一种复合酶，它包括、和，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。2．纤维素分解菌的筛选原理(1)可以与纤维素形成红色复合物，但并不和发生这种反应。(2)纤维素分解菌能产生纤维素酶分解纤维素

3、，从而使菌落周围形成透明圈。C1酶Cx酶葡萄糖苷酶刚果红纤维二糖和葡萄糖3．土壤中纤维素分解菌的筛选实验流程土壤取样—→→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生的菌落。选择培养梯度稀释透明圈考点一培养基的配置与应用命题解读培养基的制备与应用是历年高考的热点，又是微生物培养与应用的基础，其中选择培养基的作用是考查的重点。新课标省份的考题多以简答题的形式出现，分值比重加大，但难度不大，预计2012年高考中将延续这种趋势。[示例1]如下所示为培养某种微生物的培养基的配方，请回答：成分含量NaNO3K2HPO4KClMgSO4

4、·7H2OFeSO4CH2OH2O青霉素3g1g0．5g0．5g0．01g30g1000mL0．1万单位(1)依物理性质，该培养基属于________培养基；依用途划分，则属于________培养基。(2)根据培养基原料，所培养微生物的同化作用的类型是______，培养的微生物可能是________。(3)该培养基中的碳源是________。不论何种培养基，在各成分都溶化后分装前，要进行的是________和________；倒平板时，一般需冷却至________左右，在________附近操作。(4)若用该培养液培养纤维素分解

5、菌，应除去的物质是_____，至少应加入的物质是________，为检测纤维素分解菌的存在与否还应加入________，形成________色复合物，若产生________，则证明有纤维素分解菌存在。[解析](1)从培养基成分看，没有琼脂等凝固剂，属于液体培养基；从用途上分析，加入青霉素可以杀死细菌、放线菌，选择出霉菌、酵母菌等属于选择培养基。(2)该生物以培养基中的(CH2O)作碳源，为异养型微生物。(3)考查微生物培养的基本操作。(4)培养纤维素分解菌，是以纤维素作碳源，故应去除(CH2O)；培养细菌应去除能杀灭细菌的青霉素

6、。可用刚果红与纤维素形成红色复合物，检测纤维素分解菌的存在。若存在，菌落周围会形成透明圈。[答案](1)液体　选择(2)异养型　酵母菌或霉菌(3)(CH2O)调整pH灭菌50℃　酒精灯火焰(4)青霉素和(CH2O)琼脂和纤维素粉　刚果红　红　透明圈划分标准培养基种类特点用途物理性质液体培养基不加凝固剂工业生产固体培养基加凝固剂，如琼脂微生物分离、鉴定等1．培养基的类型划分标准培养基种类特点用途用途选择培养基培养基中加入某种化学物质，用来抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长培养和分离出特定微生物(如分离酵母菌和霉菌，

7、可以在培养基中加入青霉素)鉴别培养基根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物，如用伊红—美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否含有大肠杆菌(若有，则菌落呈深紫色并带有金属光泽)(1)加入培养基中的凝固剂(如琼脂)，一般不能被微生物利用，只起到凝固作用。(2)选择培养基一般只生长具有特定目的的微生物，鉴别培养基可以存在其他微生物，而且能鉴别特定的微生物。2．微生物的营养营养要素含义作用主要来源碳源凡能提供所需碳元素的物质构成生物体细胞的物质和一些代谢产物，有些是异养生物的能源物质无机化合物：O2Na

8、HCO3；有机化合物：糖类、脂肪酸、花生饼粉、石油等营养要素含义作用主要来源氮源凡能提供所需氮元素的物质合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物无机化合物：N2、NH3、铵盐、硝酸盐；有机物化合物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等生长因子生长必不可少的微量有机物酶和核酸的组成成