选修一专题2 微生物的培养与应用.doc

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1、选修一专题2微生物的培养与应用考纲要求：1.微生物的分离和培养2.某种微生物数量的测定3.培养基对微生物的选择作用4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用课前基础知识梳理一．微生物的培养（一）培养基1．微生物的培养基营养成分有、、、。培养基还需要满足微生物生长对、以及的要求。培养乳酸杆菌时需向培养基中添加，培养霉菌时需将培养基的PH调至性，培养细菌时需将培养基的PH调至性。牛肉膏提供的营养物质有：、、、蛋白胨提供的营养物质有：、、、2．培养基按物理状态分为液体培养基和，前者变成后

2、者需添加培养基按功能分为和3.固体平板培养基制备步骤.：、、、、、。溶化后，先调，再。灭菌后，先将培养基到℃左右再倒平板。（二）无菌技术获得纯净培养物的关键是：无菌技术的常用方法：和1．消毒的常用方法有、、、2．灭菌的方法有、、连线练习：3.实验操作过程中所有操作在附近进行4.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他微生物污染外，还能有效避免(三)微生物的接种方法微生物的常见的接种方法有和，还包括和1.平板划线法操作①将接种环放在火焰上____________，直到接种环烧红。②在火焰旁______

3、_______接种环，并打开盛有菌液的试管的棉塞。③将试管口通过_______________。④将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液。⑤将通过火焰，并塞上棉塞。⑥左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条______，盖上皿盖。注意不要划破______。⑦灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的______开始往第二区域内划线。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。注意______（要或不要）将最后一区的划线与第一区相连。⑧将平板______放入培养箱中培养。2.稀

4、释涂布平板法操作（1）样品稀释稀释方法：稀释过程：取1ml原菌液加入得到101的菌液，取101的菌液ml加入到中，得到102的菌液，以此类推，增大稀释倍数。（2）将稀释后的菌液涂布到培养基表面①将______浸在盛有酒精的烧杯中。②取______菌液(不超过0.1mL)，滴加到培养基表面。③将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精______后，______8～10s。④用涂布器将菌液______地涂布在培养基表面。二．微生物的分离纯化和鉴定（一）分离纯化方法：1.，如图2.，如图（二）分离纯化的

5、目的：获得，即由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体（三）分离纯化原理：平板划线法稀释涂布平板法原理通过接种工具，在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种分散到培养基表面，以便得到。将菌液进行一系列的，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成，从而在培养基表面形成（四）微生物分离纯化步骤及鉴定实验设计:取样→选择培养*→梯度稀释→取样涂布→微生物培养与观察→计数→鉴定1.对比尿素分解菌和纤维素分解菌的分离与纯化尿素

6、分解菌的分离纤维素分解菌的分离1.土壤取样到环境中采集土壤样品到环境中采集土壤样品2.样品稀释稀释方法：将10g土壤样品加入中，得到101的菌液，取101的菌液ml加入到中，得到102的菌液，以此类推，增大稀释倍数。先进行选择培养，再进行梯度稀释选择培养在所有实验中均需要做么？1.选择培养的目的：2.培养基类型：3.选择培养的结果：液体培养基变3.取样涂布选择培养基：以为唯一的氮源的固体平面培养基选择培养基：以为唯一的碳源的固体平面培养基2.对比尿素分解菌和纤维素分解菌的鉴定方法尿素分解菌纤维素分解

7、菌鉴定方法：在以为唯一氮源的培养基中加入原理：尿素分解菌能合成，将尿素分解为和，NＨ3使酚红指示剂变。方法：染色法原理：分解纤维素的微生物能合成，它是一种复合酶，由、和组成纤维素在和的作用下分解成，再在的作用下分解成葡萄糖。刚果红可以与纤维素这样的多糖物质形成，但并不能与纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当纤维素被分解后，刚果红－纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的。通过是否产生来筛选并鉴定纤维素分解菌。为进一步确定得到的是纤维素分解菌，可进行的实验。纤维素酶的发酵方法有和。纤

8、维素酶的测定方法：采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素的产物进行定量测定。三．微生物的计数1.常用计数方法：和.其中活菌计数法是此外细菌数目还可以通过法来测定，例如饮用水中大肠杆菌数目的测定。（1）计数原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个。（3）计算每克土壤样品中的活菌数：计算公式其中：C为.C值一般为3个平板上菌落数的值。V为M为注意：1.将某一样品稀释液涂布到培养基表面，培养后选择菌落数在的平板进行计数2.统计菌落数目时，选取菌