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时间:2020-04-04
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1、第38讲 微生物的培养与应用[最新考纲]1.微生物的分离和培养。2.培养基对微生物的选择作用。3.某种微生物数量的测定。4.微生物在其他方面的应用。考点一 微生物的实验室培养1.培养基(1)概念:人们按照微生物对的不同需求,配制出供其的营养基质。(2)营养组成:一般都含有和无机盐。此外,还需要满足微生物生长对、氧气以及的要求。(3)种类:按照物理性质可分为培养基和固体培养基。营养物质生长繁殖水、碳源、氮源pH特殊营养物质液体2.无菌技术(1)含义:指在培养微生物的操作中,所有防止的方法。(2)关键:
2、防止的入侵。(3)不同对象的无菌操作方法(连线)杂菌污染外来杂菌3.大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基①操作步骤②倒平板的方法及注意事项称量灭菌倒平板a.请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程:。b.甲、乙、丙中的灭菌方法是。c.丁中的操作需要等待才能进行。(2)纯化大肠杆菌的方法①纯化培养原理:想方设法在培养基上得到__________________的肉眼可见的,即可获得较纯的菌种。②纯化大肠杆菌的关键步骤:。③常用的微生物接种方法有两种a.平板划线法:是通过在琼脂固体培养基表面
3、__________的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。丙→乙→甲→丁灼烧灭菌平板冷却凝固由一个细胞繁殖而来菌落接种接种环连续划线b.法:是将菌液进行一系列的,然后将的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。(3)菌种的保存方法①对于频繁使用的菌种,可以采用的方法。②对于需要长期保存的菌种,可以采用的方法。稀释涂布平板梯度稀释不同稀释度临时保藏甘油管藏1.(教材P16旁栏思考题解答)请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。①培养细菌用的培养基与培养皿②
4、玻棒、试管、烧瓶和吸管③实验操作者的双手提示①、②需要灭菌;③需要消毒。①为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?提示通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。②平板冷凝后,为什么要将平板倒置?提示平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。2.(教材P17“倒平板操作讨论”解答)3.下图甲、乙是微生物接种常用的两种方法,请思考:(1)图甲是利用________法进行微生物接种,图乙是利用___
5、_____法进行微生物接种。这两种方法所用的接种工具分别是________和________;对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是________和酒精消毒。(2)接种操作为什么一定要在火焰附近进行?______________________________________________________。(3)下图是采用上述接种方法接种后培养的效果图解,其接种方法是________(填“图甲”或“图乙”)。提示(1)平板划线 稀释涂布平板 接种环 涂布器 灼烧灭菌(2)火焰附近存在着无菌区
6、域(3)图乙1.(2016·全国课标卷Ⅰ,39)空气中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物,以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下:①配置培养基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O);②制作无菌平板;③设置空白对照组和若干实验组,进行相关操作;④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间,统计各组平板上菌落的平均数。回答下列问题:(1)该培养基中微生物所需的氮来源于________。若要完成步骤②,该培养基中的成分X通常是___
7、_____。(2)步骤③中,实验组的操作是_______________________________________________________________________________。(3)若在某次调查中,某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板,而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落,这种结果说明在此次调查中出现了________现象。若将30(即36-6)个/平板作为本组菌落数的平均值,该做法________(填“正确”或“不正确”)。解析(1)牛肉膏和蛋白胨都含有蛋白质的水解
8、产物,都可以作为氮源;平板为固体培养基,故需要加入凝固剂琼脂。(2)实验探究的是教室内“不同高度空气”中微生物的分布,其中变量为不同高度,故需在不同高度下放置开盖平板。同时,为了保证单一变量,需要保证开盖放置时间一致。为了保证实验可靠性,需要设置多个平行组。(3)在完全正确的操作情况下,空白对照组中不应出现菌落。若出现菌落,表明操作过程中存在杂菌污染,属于实验失误,所有实验数据均不应采用。答案(1)牛肉膏、蛋白胨 琼脂(2)将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上
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