复习选修1-专题2-微生物的培养与应用课件.ppt

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1、专题2微生物的培养与应用1.微生物的实验室培养2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数3.分解纤维素的微生物的分离考点1、培养基的种类2、无菌技术的内容及方法3、分离纯化微生物的研究思路、方法一、培养基的成分、配制、主要种类及其应用2．培养基的主要成分营养物质概念作用来源碳源能提供所需碳元素的物质①用于合成微生物细胞结构的物质和代谢产物②异养微生物的主要能源无机化合物：CO2、NaHCO3；有机化合物：糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等氮源能提供所需氮元素的物质主要用于合成、蛋白质、核酸以及含氮代谢产物无机化合物：N2、NH3、铵盐、硝酸盐

2、；有机化合物：尿素、牛肉膏、蛋白胨生长因子生长必不可少的微量有机物一般是酶和核酸组成成分维生素、氨基酸、碱基3.培养基的主要种类划分标准培养基种类特点用途物理性质液体培养基不加凝固剂工业生产、连续培养固体培养基加入凝固剂，如琼脂微生物分类、鉴定、活菌计数等化学成分天然培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产合成培养基培养基成分明确分类、鉴定用途选择培养基添加(或缺少)某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长促进需要的微生物的生长,培养、分离出特定微生物鉴别培养基在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物结果常用的方法消毒

3、仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)灭菌杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子二、消毒和灭菌煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌培养基培养皿空气接种环双手牛奶②巴氏消毒③化学消毒⑤紫外线消毒⑥高压蒸气灭菌①灼烧灭菌④干热灭菌常用的消毒方法和灭菌方法三、微生物实验室培养1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板2、微生物接种最常用的方法中的是：平板划线法和稀释涂布平板法1、根据培养基的用途可分为:四、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数培养基中

4、加入某种化学物质，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长。选择培养基Q3:培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入_____________以纤维素作为唯一碳源的选择培养基，可以分离分解纤维素的微生物。Q1:分离利用石蜡油的微生物，用____________________的培养基Q2:分离产生蛋白酶的微生物，用___________________的培养基Q4:分离固氮微生物用______的培养基。例以石蜡油作为唯一碳源以蛋白质作为唯一氮源青霉素缺氮鉴别培养基如：可用伊红—美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆

5、菌(若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽)在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物。2、统计菌落数目的方法(1)显微镜直接计数法①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计一定容积的样品中微生物数量。②方法：用计数板计数。③缺点：不能区分死菌与活菌。四、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(2)间接计数法(活菌计数法)①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。②为了保证结果准确，一般选择菌落数在30~300的平板

6、进行计数。③计算公式：每克样品中的菌株数C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)M代表稀释倍数土壤取样→样品稀释→取样涂布→微生物培养→观察并记录结果→细菌计数3、细菌分离与计数的实验流程在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的_____将尿素分解成了____。氨会使培养基的碱性_____，PH______。因此，我们可以通过检测培养基____变化来判断该化学反应是否发生。脲酶氨增强升高PH4、对分离的菌种的鉴定在以_____为唯一氮源的培养基中加入______指示剂。培养某种细菌后，如果PH

7、升高，指示剂将变___，说明该细菌能够_________。尿素酚红红分解尿素4、对分离的菌种的鉴定1、纤维素酶五、分解纤维素的微生物的分离纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。纤维素纤维二糖葡萄糖C1酶Cx酶葡萄糖苷酶(1)筛选纤维素分解菌的方法是__________该方法可以通过______反应直接筛选。刚果红染色法颜色2、纤维素分解菌的筛选原理(2)其原理是：刚果红可以与纤维素形成_________，当纤维素被________分解后，红色复合物无法形成，出现以___________为中心的____

8、__，我们可以通过_____________来筛选纤维素分解菌。红色复合物纤维素酶纤维素分解菌透明圈是否产生透明圈土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落3、分离分解纤维素的微生物的实验流程土