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时间:2017-12-14
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1、骨髓检查目的1.掌握骨髓检查的指针。2.掌握骨髓细胞学的基本知识。3.掌握分析骨髓报告的方法。4.掌握常见的组织化学染色的临床意义及常见病的骨髓象特点。一、骨髓细胞学检查的临床运用(一)骨髓检查的适应症1.不明原因的发热、骨痛、恶病质。2.不明原因的肝、脾、淋巴结肿大。3.周围血中出现幼稚细胞,可疑细胞以及血细胞的单项或多项原因不明的减少、增多时。(二)骨髓检查的禁忌症有明显出血倾向,特别是血友病患者禁忌进行骨髓穿刺。二、血细胞生成、发育规律及形态特点(一)血细胞的生成所有的血细胞均起源于全能干细胞(TotipotentialStemCell、
2、TSC),此细胞具有高度自我复制能力,可分为淋巴系和髓系干细胞。血细胞的发育是连续的过程,需要造血微环境和造血生长因子的支持。(二)血细胞形态变化的一般规律1.细胞大小及形态大小:由大到小。2个例外:巨核细胞及早幼粒细胞。形态:红细胞始终圆形,粒细胞圆形或椭圆形,单核细胞由圆形、椭圆形变为不规则形,巨核细胞由圆形变为不规则形。2.细胞核大小:由大到小。巨核细胞除外。核形:各系细胞有不同表现。核位置:红系核居中,粒、单系核偏位,淋巴细胞核一侧着边,仅一侧有胞浆。核染色质:颜色由浅到深,染色质由细致疏松到粗糙密集,最后紧缩成块。核膜:
3、不明显到明显。核仁:清晰、模糊、消失。3.细胞浆量:由少到多。颜色:粒、红、巨核由深蓝或浅蓝到浅红;淋巴、单核保持浅蓝或灰蓝色;浆细胞由灰蓝变为深蓝。颗粒:从无到有,由非特异性到特异性。4.胞核与胞浆之比:由大变小。三、骨髓细胞学检查(骨髓涂片检查)(一)肉眼观察涂片观察骨髓取材、制片情况。(二)低倍镜检查1.骨髓涂片的取材、制片及染色是否满意。2.判断骨髓增生程度部位:选择涂片中段,细胞均匀的部分。判断标准:(见下页表)表5-2-1骨髓增生程度分级骨髓增生程度成熟红/有核细胞有核细胞数/LP增生极度活跃1:1>600增生明显活跃1
4、0:1200~600增生活跃20:120~200增生减低50:110~20增生极度减低300:1<103.计数巨核细胞:多在片尾,计数。4.注意有无特殊细胞。尾部及边缘。(三)油镜观察1.有核细胞分类:通常计数200个。2.计数粒:红比值(M:E)判断临床意义。(1)正常值2~4:1(2)M:E正常正常骨髓象;粒、红系以外的造血系统疾病如ITP;粒、红系平行增多或减少。(3)M:E增高粒系明显增多;红系明显减少;(4)M:E减少红系增多粒系减少3.观察细胞形态有无异常4.观察有无特殊细胞及寄生虫(四)结果分析1.归纳骨髓检查结果应
5、注意的问题(1)骨髓增生程度。(2)各系统之间的比例以及同一系统各阶段的比例。(3)单个细胞形态有无异常。(4)有无正常骨髓片中不应该存在的异常细胞和寄生虫。(5)与骨髓细胞分类计数的正常值比较。2.正常骨髓象(见书P280)四、常用的细胞化学染色细胞化学染色是以形态学为基础,应用特殊的染色方法,以观察单个细胞内在的生化特征,有助于了解这些细胞的组成及病理生理改变,对于血液病特别是白血病的诊断,鉴别诊断有一定价值。过氧化物酶染色(peroxidasePOX)(一)试验原理过氧化物酶(POX)存在于粒、单系细胞中,能分解试剂中底物的过氧化氢,产生
6、氧,使联苯胺氧化为联苯胺蓝,后者与亚硝基铁氰化钠结合形成暗蓝色的颗粒,定位于细胞浆中。(二)结果1.阴性:细胞胞浆中无蓝色颗粒2.阳性:细胞胞浆中出现蓝色颗粒者。正常情况下,粒系细胞除早期原始粒细胞外以及各阶段嗜酸性粒细胞均呈阳性。细胞越成熟,阳性越强。单核细胞系列自幼单以下为弱阳性。淋巴细胞系列为阴性反应。(三)临床意义本染色法主要用于急性白血病分型的鉴定:急粒为强阳性。急单为弱阳性或阴性。急淋为阴性。中性粒细胞碱性磷酸酶染色(neutrophilalkalinephosphatase,NAP)(一)试验原理NAPβ-甘油磷酸钠碱性条件磷酸钠
7、+硝酸钙、硝酸钴、硫化胺硫化钴(胞浆中的棕黑色颗粒)(二)结果1.胞浆中出现灰色到棕黑色沉淀者为阳性反应,反应强度分为5级:“—”阴性反应,胞浆呈淡红色。“+”胞浆呈灰色,无颗粒或有少量细小灰黑色颗粒。“++”胞浆呈均匀的灰黑色或出现较粗的棕黑色颗粒。“+++”胞浆中充满棕黑色颗粒,密度较低。“++++”胞浆中充满粗大的棕黑色颗粒,致使全部胞浆呈深黑色,可掩盖胞核。2.积分法:计数100个成熟中性粒细胞,记录阳性率,并按阳性程度分级,将其百分率乘以级数,然后再相加,即为积分。NAP主要存在于成熟的中性粒细胞中。(三)参考值NAP阳性率<40%积
8、分<80分(四)临床意义1.慢性粒细胞性白血病与类白血病反应的鉴别。2.急性白血病类型的鉴别:急粒NAP明显减低急淋NAP增高急单NAP正常或减低3.
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