农产品中黄曲霉毒素的时间分辨荧光免疫层析快速检测技术研究.pdf

《农产品中黄曲霉毒素的时间分辨荧光免疫层析快速检测技术研究.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、中国农业科学2014，47(18)：3668—3674ScientiaAgriculmraSinicadoi：10．3864~．issn．0578—1752．2014．18．014农产品中黄曲霉毒素的时间分辨荧光免疫层析快速检测技术研究张兆威，李培武，张奇，丁小霞(中国农业科学院油料作物研究所／农业部生物毒素检测重点实验室／农业部油料作物生物学与遗传育种重点实验蓟农业部油料产品质量安全风险评估实验室(武汉)／农业部油料及制品质量监督检验测试中心，武汉430062)摘要：【目的l黄曲霉毒素严重污染农产品，威胁人畜生命健康，是政府重视、社会关注的一大焦点问题，因此亟需研究

2、建立黄曲霉毒素高灵敏高快速检测方法。目前已研制出高特异性高灵敏度黄曲霉毒素单克隆抗体，本研究旨在应用该抗体，建立黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析快速检测技术，为农产品质量监管、风险评估提供技术支持。【方法l本研究通过将黄曲霉毒素抗体与乳胶铕进行偶联标记，利用自主研制的黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析试纸条进行黄曲霉毒素检测，通过检测线T信号值与质控线c信号值的比值和标准溶液浓度的自然对数值实现定量。针对花生、稻米、植物油等不同农产品，研究建立样品粉碎均质提取一体化技术。对铕标记时间分辨荧光免疫层析检测技术进行方法学考核，以花生、稻米、植物油等为例，进行实际样品检测，并与H

3、PLC法进行结果比对。【结果l在花生、稻米、植物油等农产品实际样品检测中，本研究建立的时间分辨荧光免疫层析检测技术检测黄曲霉毒素B。得到检测限均为0．3ug·kg～，线性范围分别为0．8—25、0．8—15和0．8—3O·kg～。上述3种农产品对应的标准曲线的线性方程分别为y=O．238x+0．654(=O．992)、y=0．3210．811(=O．990)和y=0．146x+0．173(R=0．993)，标准偏差分别为0．024、0．039和0．021。该方法的批内准确度和精密度添加回收试验结果表明，添加回收率在81．0％一113．O％，变异系数在7．2％一14．2

4、％；批间准确度和精密度试验结果显示，添加回收率在75．8％一114．9％，变异系数在7．7％一15．3％。说明该检测技术批内、批间均具有良好的准确度和精密度。该方法与HPLC法检测结果相比，相对误差小于1O％，说明黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析技术与行业标准方法检测结果具有良好的一致性。【结论】时间分辨荧光免疫层析检测技术灵敏度高、线性范围宽，重复性和稳定性好，是一种适合中国国情的实用快速检测技术，具有广阔的应用前景。关键词：黄曲霉毒素；时间分辨荧光免疫层析；农产品；快速检测StudyonTime—ResolvedFluorescenceImmunochromatog

5、raphyforAfaltoxinDeterminationinAgriculturalProductZHANGZhao—wei，LIPei-WU，ZHANGQi，DINGXiao—xia(OilCropsResearchInstitute，ChineseAcademyofAgriculturalSciences~KeyLaboratoryofDetectionforMycotoxins，MinistryofAgriculture~KeyLaboratoryofBiologyandGeneticImprovementofOilCrops，MinistryofAgric

6、ulture~LaboratoryofRiskAssessmentfo，OilseedsProducts(Wuhan)，Min&tryofAgriculture~QualityInspectionandTestCenterforOilseedsProducts，Min&tryofAgriculture,Wuhan430062)Abstract：[Objective]Aflatoxincontaminatesagriculturalproductseverely,threatenshealthandlifeofpeopleandlivestocks．Itisoneoft

7、hemajorfocusissuesandattractsbothgovernmentalandsocialconcerns．Thus，itisrequiredtoestablisharapidandsensitivedeterminationmethodforaflatoxin．Highspecificandsensitivemonoclonalantibodyagainstaflatoxinhasbeendeveloped．收稿日期：2014—03．25；接受日期：2014—05．27基金项目：国家科技支撑计划(20l2BABl9BO9)、国家公