编制说明-粮油检验 谷物中黄曲霉毒素B1的测定 时间分辨荧光免疫层析定量法-征求意见稿

《编制说明-粮油检验 谷物中黄曲霉毒素B1的测定 时间分辨荧光免疫层析定量法-征求意见稿》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、《粮油检验谷物中黄曲霉毒素B1的测定时间分辨荧光免疫层析定量法》标准编制说明黄曲霉毒素（Aflatoxins，AFT）是一类由黄曲霉和寄生曲霉产生的次级代谢产物，是最为常见的真菌毒素之一[1-3]，已知的黄曲霉毒素约20多种，其中黄曲霉毒素B1（AFB1）最为常见且毒性最强，具有强致癌和致突变性，毒性是砒霜的38倍，是迄今为止已知毒性最强的物质之一，被国际癌症研究机构列为Ｉ类致癌物。农产品中黄曲霉毒素污染范围广、环节多、管控难，随着气候变暖和农业耕作方式的变化，中国农产品受黄曲霉毒素污染呈加重趋势，成为威胁农产品生产、消费者安全与国际贸易的重要风险隐患。国内外非常重视黄曲霉毒素的防控，为

2、控制黄曲霉毒素的污染，我国在2005年颁布了粮食和食品中黄曲霉毒素B1（AFB1）的限量标准，2017年最新颁布的国家食品安全标准《食品中真菌毒素限量》规定了玉米、玉米面（渣、片）及玉米制品中AFB1的最高限量为20μg/kg，稻谷、糙米、大米中AFB1的最高限量为10µg/kg，小麦、大麦、麦片、小麦粉、其它谷物及去壳谷物AFB1的最高限量为5μg/kg[4]。目前，国标（GB）规定的谷物中黄曲霉毒素B1的检测方法有同位素稀释液相色谱-串联质谱法、高效液相色谱-柱前衍生法、高效液相色谱-柱后衍生法、酶联免疫吸附筛查法和薄层色谱法。粮食行业标准（LS/T）规定的黄曲霉毒素B1的检测方法有

3、胶体金快速定量法。液相法或质谱法处理过程复杂，需要大型精密仪器和专业人员操作，费时、费力、费钱；薄层色谱法前处理过程复杂，费时费力；ELISA法和胶体金免疫层析法稳定性相对较差，批间差大，均不能很好满足快速检测的要求。基层检测单位迫切需要方便、准确、快速和低成本，可实现大量样本快速筛查的黄曲霉毒素B1检测方法，以满足农产品生产过程监控、现场监督、检查的工作需要。时间分辨荧光免疫层析定量法能很好地满足上述要求。时间分辨荧光免疫分析技术（time-resolvedfluoroimmunoassay，TRFIA）是20世纪80年代中期发展起来的一种新型非放射性免疫标记技术，利用免疫反应的高度特

4、异性和标记示踪物的高度灵敏性相结合而建立的一类微量物质检测技术，其灵敏度、可测范围和稳定性都优于现有的酶联免疫分析法和胶体金法，具有广阔的应用前景。本标准旨在建立谷物中黄曲霉毒素B1的时间分辨荧光免疫层析检测技术，用于谷物中黄曲霉毒素B1的快速、准确定量检测。便于基层粮库、粮油企业以及粮食监管部门中对谷物中黄曲霉毒素B1的准确定量和检测，实现对谷物中黄曲霉毒素B1的有效监管。保障粮食的质量安全和人民群众的身体健康，最终实现我国农业等行业的健康发展。-9-1工作简况1.1任务来源及起草单位根据《国家粮食局办公室关于下达2017年第三批粮油行业标准制修订计划的通知》（国粮办发[2017]29

5、7号）的要求，由国家粮食局科学研究院负责《粮油检验谷物中黄曲霉毒素B1的测定时间分辨荧光免疫层析定量法》起草工作。起草单位成立标准起草组进行本标准制定的各项工作。1.2标准研制主要工作过程（1）根据该标准的特点，2017年11月-2017年12月，查询了国内外资料，对相关检测机构、粮库、粮食加工企业进行了调研，并召开了第一次标准起草讨论会，确定了标准制订方案和工作计划。（2）2018年1月-2018年3月，在国家粮食局科学研究院实验室进行标准的研制工作，主要包括方法的建立，方法灵敏度测试，方法的线性范围确定，方法的回收率研究等。（3）2018年3月，编写了《粮油检验谷物中黄曲霉毒素B1的

6、测定时间分辨荧光免疫层析定量法》标准草案及编制说明。（4）2018年3月-2018年7月，组织实验室间方法验证。验证结果处理统计，并形成标准编制说明草案。（5）2018年7月，召开了第二次讨论会，形成标准和编制说明的征求意见稿，进行意见征询。2标准的编制原则和标准的主要内容2.1标准编制原则本标准是根据GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构与编写规则》、GB/T20001.4-2015《标准编写规则第4部分：化学分析方法》的规定进行编制的。2.2确定标准主要内容2.2.1标准的适用范围本标准规定了时间分辨荧光免疫层析定量法测定谷物中黄曲霉毒素B1的原理、试剂及材料、

7、仪器及设备、样品制备、样品测定、结果表述、重复性。本标准适用于糙米、玉米和小麦等谷物中黄曲霉毒素B1的快速检测。本标准的方法检出限为0.7μg/kg，定量限为2μg/kg。2.2.2标准研制的总体思路2.2.2.1最佳反应时间优化将5ul/ml喷涂量荧光微球标记物组装大板，切4mm宽的试剂条分别取100μLAFB1浓度为0、0.35、0.7、1.4、3.5、7、14、35ng/mL标准液体加入试纸条加样孔，10min-9-后用荧光读