加热炮制对巴豆霜溶血效应影响的初步研究-论文.pdf

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1、2013年3月第15卷第3期中国现代中药ModemChineseMedicine加热炮制对巴豆霜溶血效应影响的初步研究△陈彦琳，杜杰，周林，白宗利，梁焕(中国药材公司，北京100195)[摘要】目的：对巴豆霜蛋白成分加热前后发生的溶血效应的变化加以研究，为巴豆霜加热炮制减毒提供依据。方法：对不同炮制方法和不同加热时间制备巴豆霜所含巴豆毒蛋白的溶血现象发生情况进行比较，观察溶血行为。结果：发现巴豆霜蛋白加热后有明显溶血效应消失的现象，并与加热时间有一定相关性。结论：具溶血效应的巴豆霜蛋白在炮制后发生变性，其溶血效应可用于巴豆霜减毒质量控制。[关键词]溶血效应；巴

2、豆霜；蛋白；炮制巴豆为大戟科植物巴豆CrotontigliumL的干燥现代研究认为，巴豆中的脂肪油成分为巴豆中的成熟果实。多系栽培，药材以颗粒饱满、种仁色黄主要毒性成分，具较强的泻下作用，但是通过炮制除白者为佳。巴豆含有机酸及甘油酯类成分、生物碱去部分油脂，又可体现缓泻作用，因此，巴豆油是巴类成分及植物蛋白质类成分。生巴豆味辛、性热，豆毒效兼具的主要成分。现在除去巴豆中油脂的通用有大毒，归胃、大肠经，外用蚀疮，用于恶疮疥癣，方法为去油制霜法，即通过加热和压榨，除去巴豆中疣痣。巴豆霜是巴豆除去部分巴豆油后的炮制品，的部分脂肪油，部分学者通过研究提出的方法还有稀味

3、辛、性热，有大毒，归胃、大肠经，具有峻下冷释法_3和提油返油法刮等。巴豆中含有另一种物质积，逐水退肿，豁痰利咽的作用，用于寒积便秘，巴豆毒蛋白，能够溶解兔、猪、蛇、鸡的红细胞J，乳食停滞，腹水臌胀，二便不通，喉风，喉痹J。被认为是主要毒性成分，应尽量除去。通过阅读文献巴豆从汉时人药至今，炮制方法有30多种。巴和分析巴豆毒性物质基础，我们推测在本草里强调巴豆制霜法最早记载于宋《苏沈良方》：“以巴豆剥去豆炮制过程中的“极熟”与现代的压榨过程中反复加壳，取净肉，去肉上嫩皮，纸包水湿，入慢火中煨热能够降低毒性，可能与巴豆毒蛋白加热后失去溶血极熟，取出，另以绵纸包之，缓

4、缓捶去其油，纸湿活性有关，观察巴豆毒蛋白在加热过程中发生的溶血则另换，以成白粉为度”，以后各代均沿袭使用巴豆效应变化，有助于推测巴豆炮制加热时间、加入辅料仁或巴豆霜。对于其炮制原理，传统经验认为“得等是否会对其溶血效应产生影响。火则良，若急治为水谷道路之剂，去心皮，膜油，1材料生用。若缓治为消坚磨积之剂，炒烟去令紫黑研用，1．1仪器可以通肠，可以止泄”，“本草云生温有毒，熟寒无UV2802．pc紫外分光光度计[尤尼柯(上海)仪毒，今之去油生用为避寒也，殊不知寒不足避，当器有限公司]，Fw一100高速粉碎机(天津泰斯特仪器避其大毒，况本经全无去油之制法，陶氏煮令

5、黄黑，有限公司)，DHG-9053A干燥箱(上海飞越实验仪器然亦太过，不如取其心膜者五度换水，各煮一沸为有限公司)，1500干法热压去油制霜机(杭州春江自佳。局方化滞丸而巴豆不去油，只以巴豆煮熟用之，动化研究所)，CX-41生物显微镜(奥林巴斯有限公深得其性也”_2J。由此我们可以看到，古人已经认识司)，SE2分析天平(德国Sa~ofius公司)，PB一10自到了巴豆加热后不仅易于除去油脂，更重要的是破动pH计(德国Sartofius公司)，85．2型磁力搅拌器坏了毒性成分，保证了用药安全。(天津泰斯特仪器有限公司)，Milli—Q纯水器(美国[基金项目]中药

6、质量控制技术国家工程实验室中药饮片过程控制技术平台；2010、2011年中医药行业科研专项——附子等中药炮制方法传承与规范化应用研究(201107008)[通讯作者]陈彦琳，Tel：(010)61252955，E—mail：carro129@yahoo．eom．cn·219·2013年3月第15卷第3期中国现代中药ModemChineseMedicineMar．2013Vo1．15No．3Millpore公司)，centfifuge5417R超速离心机(德国2溶血实验方法Eppendof公司)，低温离心机(德国Beckman公司)，2．12％红细胞混悬液的制备

7、SHH．W21．420恒温水浴箱(余姚市东方电工仪厂)。家兔麻醉后(戊巴比妥钠，40mg·kg～，耳缘静1．2试药脉注射)，自颈总动脉取血，放人含玻璃珠的锥形瓶石油醚(30～60℃)(北京化工厂，批号：中振摇10min，除去纤维蛋白原，使成脱纤血液。20080806)，石油醚(60—90℃)(北京化工厂，批加入0．9％氯化钠溶液约l0倍量，摇匀，1000～号：20080303)，戊巴比妥钠(urchem公司，批号：1500r·min离心15min，弃去上清液，沉淀的红ws20050411)。细胞再用0．9％氯化钠溶液按上述方法洗涤2～3次，1．3动物至上清液不

8、显红色为止。将所得红细胞用0．9％氯化