PCR技术在甘蔗病害检测中的应用.pdf

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1、广西农业科学2010。41(12)：1299-1303GumlgxiAgriculturalSciencesPCR技术在甘蔗病害检测中的应用颜梅新，黄伟华，黄诚华，邓展云，韦金菊，潘雪红，魏吉利，商显坤(广西农业科学院甘蔗研究所，南宁530007)摘要：甘蔗病害是制约甘蔗产业稳定可持续发展的主要因素之一，而病害检测在甘蔗育种、健康种苗繁育以及植物检疫等方面起着重要的作用。文章综述了PCR技术在甘蔗真菌性病害、细菌性病害、病毒性病害以及植原体病害检测中的应用概况，并列出相应的检测引物，为相关SIVA．员检测甘蔗病害提供参考。关键词：甘

2、蔗；病害；PCR；检测中图分类号：$435．661文献标识码：A文章编号：1002—816l(加lO)12—1299-05ApplicationofPCRbaseddiseasedetectionmethodsinsugarcaneYANMei-xin，HUANGWei-hua，HUANGCheng-hua，DENGZhan-yun，WEIJin-ju，PANXue-hong，WEIJi-1i，SHANGXian-kun(GuaagxiSugarcaneResearchInstitute，Naming530007，China)Abs

3、tract：Sugarcaneisthemostimportantsugarcropworldwide，themostimportantconstraintsinitsproductionanddevelopmentofnewvarietiesarethebioticstresses(diseases)，whichaffectitsproductivityallovertheworld．Forsustain·ablesugarcaneandsugarproduction，themanagementofdisease，intermso

4、fdetectionandapplicationofcontrolmeasures，playsapivotalrole，andisthekeyfordevelopingnewvarietyandproducingvirus-freeseedcancandplantquarantineap-pIications．ThispaperreviewstheapplicationofPCRindetectionofmajorf呻gal，bacterial，virusandphytoplasmadiseasesofsugarcane．Furth

5、er,alistofprimersforPCRdetectionofgomcmostimportantdiseases，occurringinChina，havealsobeenprovidedforthel'esesLrcher8involvedindiseasemanagementforthesugarcanecrop．Keywords：sugarcane；diseases；PCR；detection甘蔗是我国制糖的主要原料，而甘蔗生产面临着许多困难与问题。其中甘蔗病害是制约甘蔗产业稳定可持续发展的主要因素之一。目前全世界甘蔗病

6、害有120多种．对甘蔗生产造成的损失达15％一30％。我国目前已发现的甘蔗病害有64种。据调查，我国每年因黑穗病、宿根矮化病、花叶病等病害造成的甘蔗减产达20％以上。甘蔗先进生产国如美国、澳大利亚、巴西、印度等的实践证明，甘蔗病害问题可以通过种植抗病品种及推广种植脱毒健康种苗加以饵决．在这一环节中，病害检测手段的应用显得特别重要。甘蔗病害诊断技术经历了从内外部症状观察叶显微镜检查-+免疫技术_+PCR快速检测4个阶段。我国在甘蔗病害诊断方面的研究起步较晚，诊断方法主要以内外部症状观察和显微镜检查为主，免疫技术和PCR检测技术的应用还

7、处于起始阶段。本文就PCR技术在甘蔗病害检测中的应用情况进行概述。1PCR技术和荧光定量PCR特点聚合酶链式反应(Polymerasechainreaction，PCR)是1983年由美国PE—Cetus公司的Mullis等发明的一种体外核酸扩增系统【l】。PCR技术具有快速、灵敏、操作简便等优点，已广泛应用于分子生物学、医学、微生物学等领域。通过引物设计，PCR能特异性扩增某一目的DNA片段，因此在病原微生物检测上优于传统方法，特别是对于那些用常规方法研究较困难的植物病害。PCR因其灵敏、特异的特点已成为分子生物学实验室和医院I临

8、床分子诊断的核酸分子定性检测技术。但是在进行病毒检测、基因表达量分析等试验中必须对目的核酸做出定量检测，这是普通PCR不能胜任的。实时定量PCR是20世纪90年代中期发展起来的核酸定量新技术，它通过检i贝!JPCR反应中荧光信号的变化