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时间:2017-12-24
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1、骨髓内皮细胞增殖研究论文6【摘要】本研究以内皮细胞培养液(End)培养小鼠骨髓内皮细胞,探讨粒巨噬系集落刺激因子(rGSF)对骨髓内皮细胞增殖的影响。用End培养小鼠骨髓内皮细胞,通过rightGiesa染色计数内皮细胞集落、应用免疫荧光法观察内皮细胞表型;加入不同浓度的GSF,通过集落形成率、TT法和流式细胞术检测内皮细胞生长周期,观察GSF对内皮细胞体外扩增的影响。结果表明:End诱导的骨髓细胞可以生成内皮细胞集落,vF检测呈阳性;集落形成率检测及TT法测定均证实GSF对内皮细胞的增殖具有明显的
2、促进作用;生长周期检测结果显示,GSF处理组的细胞进入S期的比率为93%,而对照组为21%,说明GSF可以通过促使内皮细胞进入S期而加快细胞的分裂,促进细胞增殖;比较第1代和第4次传代后细胞的生长曲线,两者无明显差别,说明多次传代后的细胞仍保持传代早期的增殖潜能。结论:GSF对内皮细胞的增殖具有促进作用,经多次扩增传代后内皮细胞的增殖潜能无明显改变。【关键词】骨髓内皮细胞 GSF 细胞增殖EffetsfGranultearphagelnStiulatingFatrnGrthfurineBnearrEndth
3、elialellsAbstratThepurpsefthisstudastinvestigatetheeffetsfgranultearphagelnstiulatingfatr(GSF)nthegrthfusebnearrendthelialellsEndthelialellultureediu(End)asusedtultureurinebnearrendthelialellsEndthelialelllniesereuntedunderirspebrightGiesastainingTheeffetfd
4、ifferentnentriatinfGSFntheprliferatinfbnearrendthelialellsasbservedbthefratinfendthelialelllnies,TTandfltetrTheresultsindiatedthattheendthelialspeifiarervFasexpressedbthelnells,GSFprtedtheprliferatinfbnearrendthelialelllniesandTTnfiredtheeffetfGSFnprtingthep
5、rliferatinfbnearrendthelialellsTheresultfdetetingellleshedthattheratefellsenteringintSphaseas93%inGSFaddedgrupandtheratefellsenteringintSphaseas21%inntrlThereasnsignifiantdiffereneinellgrthurvebeteenthefirstpassageandfurthpassageItisnludedthatGSFanprtetheprli
6、feratinfbnearrendthelialells,theprliferatinptentialfbnearrendthelialellsbeteenthefirstandfurthpassagensignifiantlhangeserdsbnearrendthelialells;GSF;prliferatinExpHeatl2007;1(3):622-62目前,已有许多报道证明内皮细胞(endthelialells,E)、内皮祖细胞(endthelialprgenitrells,EP)可以用治疗缺血性心脏病
7、以及各种疾病引起的肢体缺血[1,2]也可以用于组织工程的血管构建[3],并取得了一定的成果。aat等[4]报道,EP对缺血心脏病进行治疗具有良好的效果,一方面减少了缺血组织的面积,同时改善了心脏的功能。ala等[]则报道了利用EP对肢体缺血的小鼠模型进行治疗,实验结果表明了EP能显著增加缺血肢体的灌流,而且组织学检查发现缺血部位毛细血管的数目也大大增加。内皮细胞的有多种,可以从外周血、脐血及骨髓中获得[6],而外周血中的内皮祖细胞于骨髓。从病人自体的骨髓中获得内皮细胞,一方面比较方便,而且也可以避免GVHD的发生。但
8、是由于骨髓基质细胞种类多,难以分离纯化骨髓内皮细胞或内皮祖细胞。本研究用本实验室配制的内皮细胞培养液(End)体外培养小鼠骨髓细胞,分离纯化骨髓内皮细胞及内皮祖细胞,并观察粒巨噬系集落刺激因子(rGSF)对小鼠骨髓内皮细胞体外增殖的影响以及体外增殖后内皮细胞增殖机能的改变,这对临床运用内皮细胞或内皮祖细胞治疗疾病有一定的指导意义。动物昆明
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