葡萄糖测定方法.doc

《葡萄糖测定方法.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、葡萄糖测定方法原理3,5-二硝基水杨酸（DNS）与还原性糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物，该物质在520nm处有最大吸收峰，且在一定范围内吸收峰的强度（OD值）与还原糖浓度成线性关系，利用比色法可测得样品的含糖量。该方法是半微量定糖法，操作简便，快速，杂质干扰少。试剂1）3,5-二硝基水杨酸试剂（DNS试剂）甲液：溶解6.9g苯酚于15.2mL10%NaOH中，并稀释至69mL，在此溶液中加入6.9gNaHSO3；乙液：称取255g酒石酸钾钠，加到300mL10%NaOH中，再加入880mL1%的

2、3,5-二硝基水杨酸。甲、乙液混合得黄色试剂，贮存于棕色瓶中，室温放置7-10天后备用。2）0.1%葡萄糖标准液（1g/L）准确称取100mg分析纯的葡萄糖（预先在105℃干燥至恒重），加少量的蒸馏水溶解后定容至100ml，冰箱中保存备用。操作步骤2mL样品（稀释）+1.5mLDNS→沸水浴5min→流水立即冷却至室温→定容至25mL→520nm处检测OD值浓度范围0~0.5g/L标准曲线葡萄糖母液1g/L：称取1.1g葡萄糖，溶于1000mL去离子水。反应体系：试管号项目01(0.1g/L)2(0

3、.2g/L)3(0.3g/L)4(0.4g/L)5(0.5g/L)DNS（mL）1.51.51.51.51.51.5葡萄糖母液（mL）00.20.40.60.81水（mL）21.81.61.41.21注意事项1）考虑葡萄糖的结晶水；2）可以根据稀释倍数计算加入反应体系的样品量，不足的补水。3）OD520在0.1~1.0之间时，葡萄糖的浓度基本上与吸光值呈线性关系，超过该范围，则应当适当稀释。参考文献[1]MillerGL.Useofdinitrosalicylicacidreagentfordete

4、rminationofreducingsugars[J].Anal.Chem.,1959,31:426-428亲爱的用户：烟雨江南，画屏如展。在那桃花盛开的地方，在这醉人芬芳的季节，愿你生活像春天一样阳光，心情像桃花一样美丽，感谢你的阅读。1、最困难的事就是认识自己。21.7.307.30.202110:0310:03:56七月-2110:032、自知之明是最难得的知识。二〇二一年七月三十日2021年7月30日星期五3、越是无能的人，越喜欢挑剔别人。10:037.30.202110:037.30.2

5、02110:0310:03:567.30.202110:037.30.20214、与肝胆人共事，无字句处读书。7.30.20217.30.202110:0310:0310:03:5610:03:565、三军可夺帅也。星期五,七月30,2021七月21星期五,七月30,20217/30/20216、最大的骄傲于最大的自卑都表示心灵的最软弱无力。10时3分10时3分30-七月-217.30.20217、人生就是学校。21.7.3021.7.3021.7.30。2021年7月30日星期五二〇二一年七月三十

6、日8、你让爱生命吗，那么不要浪费时间。10:0310:03:567.30.2021星期五,七月30,2021