菟丝子含药血清对成骨细胞代谢调控的影响.pdf

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1、中医杂志２０１１年１１月第５２卷第２２期ＪｏｕｒｎａｌｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，２０１１，Ｖｏｌ．５２，Ｎｏ．２２·１９５１·菟丝子含药血清对成骨细胞代谢调控的影响杜波１＊王婧２（１．白城医学高等专科学校，吉林省白城市棉纺路２７号，１３７０００；２．首都医科大学附属复兴医院）＊通讯作者：ｚｇｙｙｚｎｚｂ＠１６３．ｃｏｍ，１３５２２９４２１８４［摘要］目的探讨菟丝子含药血清对体外培养大鼠成骨细胞代谢调控的影响。方法采用血清药理学方法制备菟丝子含药血清；采用改良的组织块法体外培养大鼠成骨细胞；分别用５％、１０％、１５％、２０％菟丝子含药血清诱导培养成骨细胞

2、２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ后，ＭＴＴ法检测大鼠成骨细胞的增殖情况；用对硝基苯二钠基质动力学法（ＰＮＰＰ）测定细胞内碱性磷酸酶（ＡＬＰ）的活性；培养４８ｈ后用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测Ⅰ型胶原（ＣＯＬ－Ⅰ）ｍＲＮＡ的表达。结果５％和１０％菟丝子含药血清在４８ｈ和７２ｈ能显著促进成骨细胞增殖并提高ＡＬＰ活性；在４８ｈ时１０％菟丝子含药血清可促进ＣＯＬ－ⅠｍＲＮＡ的表达。结论１０％菟丝子含药血清能够明显促进大鼠成骨细胞的增殖与分化，表明其具有促进成骨作用。［关键词］菟丝子；含药血清；成骨细胞；增殖；分化ＥｆｆｅｃｔｏｆＤｏｄｄｅｒ－ＣｏｎｔａｉｎｉｎｇＳｅｒｕｍｏｎｔｈｅＭｅｔａｂｏｌｉｓｍｏｆＯｓ

3、ｔｅｏｂｌａｓｔｓＩｎＶｉｔｒｏ１，ＷＡＮＧＪｉｎｇ２ＤＵＢｏ（１．ＢａｉｃｈｅｎｇＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，ＪｉｌｉｎＰｒｏｖｉｎｃｅ，１３７０００；２．ＢｅｉｊｉｎｇＦｕｘｉｎｇＨｏｓｐｉｔａｌＡｆｆｉｌｉａｔｅｄｔｏＣａｐｉｔａｌＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）ＡＢＳＴＲＡＣＴＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＤｏｄｄｅｒ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒｕｍｏｎｔｈｅｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｏｆｒａｔｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｓ（ＯＢ）ｃｕｌｔｕｒｅｄｉｎｖｉｔｒｏ．ＭｅｔｈｏｄｓＴｈｅＤｏｄｄｅｒ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒｕｍｗａｓｐｒｅｐａｒｅｄｂｙｓｅ

4、ｒｏｌｏｇｉｃａｌｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｍｅｔｈｏｄ，ａｎｄｔｈｅｉｍｐｒｏｖｅｄｔｉｓｓｕｅｂｌｏｃｋｃｕｌｔｕｒｅｗａｓａｄｏｐｔｅｄｔｏｃｕｌｔｕｒｅｔｈｅｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｓｉｎｖｉｔｒｏｏｆｎｅｗｌｙｂｏｒｎＳＤｒａｔｓ．ＡｆｔｅｒｔｈｅｃｕｌｔｕｒｅｏｆＯＢ（ｎ＝８）ｆｏｒ２４，４８，ａｎｄ７２ｈｏｕｒｓｗｉｔｈ５％，１０％，１５％，ａｎｄ２０％Ｄｏｄｄｅｒ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒｕｍｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｔｈｅＭＴＴｍｅｔｈｏｄｗａｓｕｓｅｄｔｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，ｔｈｅＰＮＰＰｍａｔｒｉｃａｌｄｙｎａｍｉｃｍｅｔｈｏｄｗａ

5、ｓａｐｐｌｉｅｄｆｏｒｏｂｓｅｒｖｉｎｇｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒａｌｋａｌｉｎｅｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ（ＡＬＰ），ａｎｄａｆｔｅｒ４８ｈｃｕｌｔｕｒｅ，ｔｈｅＲＴ－ＰＣＲｔｅｃｈｎｉｑｕｅｗａｓｅｍｐｌｏｙｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅＣＯＬ－ＩｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．ＲｅｓｕｌｔｓＡｆｔｅｒ４８ｈａｎｄ７２ｈｃｕｌｔｕｒｅ，ｔｈｅ５％ａｎｄ１０％Ｄｏｄｄｅｒ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒｕｍｆｕｎｃｔｉｏｎｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｉｍｐｒｏｖｉｎｇｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆＯＢａｎｄｅｎｈａｎｃｉｎｇｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＡＬＰ．

6、Ａｆｔｅｒ４８ｈｃｕｌｔｕｒｅ，ｔｈｅ１０％Ｄｏｄｄｅｒ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒｕｍｆｕｎｃｔｉｏｎｅｄｉｎｐｒｏｍｏｔｉｎｇｔｈｅＣＯＬ－ＩｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＴｈｅ１０％Ｄｏｄｄｅｒ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒｕｍｃａｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｐｒｏｍｏｔｅｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａ－ｔｉｏｎｏｆＯＢ，ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇｔｈａｔｉｔｂｅｎｅｆｉｔｓｏｓｔｅｏｇｅｎｅｓｉｓ．ＫｅｙＷｏｒｄｓＤｏｄｄｅｒｓｅｅｄ（ＳｅｍｅｎＣｕｓｃｕｔａｅ）；ｍｅｄｉｃｉｎｅ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ；ｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｓ；ｐｒｏ

7、ｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ；ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ菟丝子是旋花科植物菟丝子（Ｃｕｓｃｕｔａｃｈｉｎｅｎｉｓ－基（Ｇｉｂｃｏ，批号：２０１０１０１６）；碱性磷酸酶（ＡＬＰ）试剂Ｌａｍ）的干燥成熟种子，味辛甘，性平，归肝、肾、脾盒（保定长城试剂有限公司，批号：２０１１０１１５）；［１］经，具有补肾益精、养肝明目、安胎的功效。其主Ｒｅｄｚｏｌ总ＲＮＡ提取试剂（北京赛百盛基因技术公要成分为黄酮类化合物、多糖类化合物、生物碱类化司，批号：０４２８１１）；Ｍ－ＭＬＶ