shR-377联合细胞因子诱导人脂肪间充质干细胞向神经干细胞定向分化.pdf

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1、·２３１２·中国老年学杂志２０１５年５月第３５卷〔２，３〕伤模型的造模，但是国内鲜少有这方面的报道。4参考文献笔者运用小动物超声技术，选择最新型号的Ｖｅｖｏ２１００小动1ＬＵＳＩＳＡＪ畅Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ〔Ｊ〕．Ｎａｔｕｒｅ，２０００；４０７（６８０１）：２３３-４１畅物超声机，使用超高分辨率的ＭＳ-５５０Ｄ血管探头，动态观察小2ＴｏｍｉｔａＨ，ＨａｇａｍａｎＪ，ＦｒｉｅｄｍａｎＭＨ，etal畅Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｈｅｍｏ-鼠的颈动脉情况，直至观察到颈动脉的内中膜增厚，甚至可明ｄｙｎａｍｉｃｓａｎｄａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓｉｎａｏｒｔｉｃａｒｃ

2、ｈｅｓｏｆａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎＥ-ｎｕｌｌｍｉｃｅｏｎ１２９Ｓ６／ＳｖＥｖＴａｃａｎｄＣ５７ＢＬ／６Ｊｇｅｎｅｔｉｃｂａｃｋｇｒｏｕｎｄｓ〔Ｊ〕．Ａｔｈｅｒｏ-确见到密度稍高的斑块影。病理形态学检查结果也证明模型ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，２０１２；２２０（１）：７８-８５畅组造模成功。颈动脉是全身动脉的窗口，故用小动物超声评价3ＭｅｎｇＸ，ＺｈａｎｇＦ，ＶａｌｊｉＫ，etal畅Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄｇｕｉｄａｎｃｅｆｏｒｔｈｅｃｒｅａｔｉｏｎｏｆ颈动脉血管斑块形成的情况，可大大增加ＡＳ模型的成功率。ａｓｍａｌｌａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌｏｆａｏｒｔｉｃｉｎｊｕｒｙ〔Ｊ〕．ＪＶａｓｃＩ

3、ｎｔｅｒｖＲａｄｉｏｌ，２０１１；２２综上，小动物超声是一种简单快速评价ＡＳ小鼠模型成功（８）：１１９３-７畅建立与否的诊断方法，并且能够动态观察，方便快捷，准确性〔２０１４-１２-２５修回〕高，值得在ＡＳ等动物实验研究中推广。（编辑徐杰）ｓｈＲ-３７７联合细胞因子诱导人脂肪间充质干细胞向神经干细胞定向分化张淑华刘秋玲吴志婷王云霞温明华葛郁芝（江西省人民医院江西省心血管病研究所，江西南昌３３０００６）〔摘要〕目的探索ｓｈＲ-３７７联合细胞因子诱导人脂肪间充质干细胞（ＨＡＤＭＳＣｓ）向神经干细胞（ＮＳＣｓ）定向分化。方法采用吸脂术获取健康青年人腹部大网膜脂肪组织，胶原酶消化法分离Ｈ

4、ＡＤＭＳＣｓ，行表型鉴定和细胞周期检测。ｓｈＲ-３７７转染第三代ＨＡＤＭＳＣｓ，４８ｈ后流式检测ｎｅｓ-ｔｉｎ表达率，７２ｈ后行ＲＴ-ｑＰＣＲ和免疫细胞化学测定ｎｅｓｔｉｎ和ｍｕｓａｓｈｉ，并对转化后细胞增殖培养分析。结果流式结果显示ＨＡＤＭＳＣｓ表面标志ＣＤ４５及ＣＤ１１７表达呈阴性，ＣＤ２９及ＣＤ４４呈阳性，诱导２４ｈ后ｎｅｓｔｉｎ表达率为（６４畅６±３畅２％）；ＲＴ-ｑＰＣＲ结果表明诱导７２ｈ后神经干样细胞球ｎｅｓ-ｔｉｎ、ｍｕｓａｓｈｉ表达阳性，免疫细胞化学染色可见ｎｅｓｔｉｎ染色阳性。神经干样细胞球增殖培养７ｄ可见多个克隆球。神经干样细胞球进一步分化培养，可见到很明显的

5、细长突触，双极或多极神经元样形态。结论ｓｈＲ-３７７联合细胞因子的诱导方法可以使ＨＡＤＭＳＣｓ定向分化为ＮＳＣｓ，诱导时间约４８ｈ。转化时间和转化率比传统方法有较大提高，为体外大量获得ＮＳＣｓ提供了实验依据。〔关键词〕ｓｈＲ-３７７；人脂肪间充质干细胞；神经干细胞；定向分化〔中图分类号〕R54〔文献标识码〕A〔文章编号〕1005-9202（2015）09-2312-04；doi：10畅3969／j畅issn畅1005-9202畅2015畅09畅004Directeddifferentiationofhumanadiposetissue-dreivedmeesnchymalstem

6、cellstowardsneuralstemcellinducedbyshR-377com-binedwithcytokinesinvitroZHANGShu-Hua，LIUQiu-Ling，WUZhi-Ting，etal畅JiangxiProvincialPeople＇sHospital，JiangxiProvincialInstituteofCardiovascularDisesae，Nanchang330006，Jiangxi，China【Abstract】ObjectiveＴｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｄｉｒｅｃｔｅｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆＨＡＤＭＳＣｓｔｏｗａｒｄ

7、ｓｎｅｕｒａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｉｎｄｕｃｅｄｂｙｓｈＲ-３７７ｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｃｙｔｏｋｉｎｅｓｉｎｖｉｔｒｏ．MethodsＡｂｄｏｍｉｎａｌｏｍｅｎｔａｌａｄｉｐｏｓｅｔｉｓｓｕｅｓｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄａｎｄｓｅｐａｒａｔｅｄｗｉｔｈｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅｄｉｇｅｓｔｉｏｎａｎｄａｔｔａｃｈｍｅｎｔｃｕｌｔｕｒｅｍｅｔｈｏｄｓ．ｓｈＲＮＡ３７７ｗａｓｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄｉｎｔｏＨＡＤＭＳＣｓ．Ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｎｅｓｔｉｎｗａｓａｓｓａｙｅｄｂｙｆｌ