天然药物金纳多诱导人脂肪间充质干细胞神经向分化的浓度优化条件研究

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1、中图分类号密级天然药物金纳多诱导人脂肪间充质干细胞神经向分化的浓度优化条件研究ResearchonOptimalConcentrationofGinatonforNeuronalDifferentiationofHumanAdipose—-derivedStemCells计：学位论文：45页表格：2个插图：22幅指导教师：姜长斌教授申请学位级别：硕士学位王革—L土学科(专业)：神经病学培养单位：大连医科大学附属第一医院完成时间：二O一三年四月答辩委员会主席：附件1：独创性声明hllllllillllllllhlllllllllUllllllllllll

2、llllY2311052本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：夏受签字目期：盖殳￡；年』月卫日附件2：关于学位论文使用授权的说明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。

3、本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于(请在以下相应方框内打“√")：1．保密口，在一年解密后适用本授权书。2．不保密酣作者签名：五亟导师签名：轨谜目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯Ioooo⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯··1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯5(二)材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯81．材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯81．1人脂肪组织来源⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯81．2主要仪器设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯81．3主要试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯81．4基本试剂配制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯92．方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯92．1hADSCs的分离、培养及鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯92．2金纳多诱导hADSCs神经向分化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131．

5、hADSCs的分离、培养及鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131．1hADSCs形态学观察⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131．2hADSCs表面抗原鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131．3hADSCs成骨诱导鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯141．4hADSCs成脂肪诱导鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯142．金纳多诱导hADSCs神经向分化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯152．1hADSCs成神经分化形态学观察⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯152．2免疫荧光法检测试诱导神经元标记物结果⋯⋯⋯⋯⋯182．3MTT法检测金纳多对hADSCs生长活性的影响⋯⋯192．4流式细胞仪检测金纳多对hA

6、DSCs凋亡的影响⋯⋯192．5免疫荧光检测Nestin、MAP．2的表达情况⋯⋯⋯⋯⋯202．6免疫荧光检测GAP．43、Syn的表达情况⋯⋯⋯⋯⋯212．7免疫荧光检测Nissl、GFAP的表达情况⋯⋯⋯⋯⋯222．8统计阳性率⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30三、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

7、⋯⋯⋯⋯35(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯40四、附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯44五、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯45大连医科大学硕士学位论文天然药物金纳多诱导人脂肪间充质千细胞神经向分化的浓度优化条件研究硕士生姓名：指导教师：指导小组：专业名称：王莹姜长斌教授刘晶教授神经病学摘要目的观察金纳多注射液能否在体外促进人脂肪间充质干细胞(humanadipose．derivedstemcells，hADSCs)向神经元样细胞分化，并探索其安全、有效的最佳诱导浓度，使这种为人熟知的良药有

8、望在新的干细胞领域为人类神经损伤或退行性疾病的治疗发挥更重要的作用。方法本研究分为两部分进行：