红细胞计数-手工法.doc

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1、二红细胞计数一、原理用等渗稀释液将血液按一定倍数稀释，充人计数池后显微镜下计数一定体积内红细胞数，换算求出每升血液中红细胞的数量。二、试剂与耗材1.红细胞稀释液枸橼酸钠1.0g;36%甲醛液1.0ml氯化钠0.6g加蒸馏水至100ml,混匀、过滤两次后备用。2.其他显微镜、改良Neubauer血细胞计数板等。三、操作1.取中号试管1支，加红细胞稀释液2.0ml。2.用清洁干燥微量吸管取末梢血10μl，擦去管外余血后加至红细胞稀释液底部，再轻吸上层清洗吸管2-3次立即混匀。3.混匀后，用干净微量吸管将红细胞悬液充人计数池

2、，不得有空泡或外溢，充池后静置2-3min后计数。4.高倍镜下依次计数中央大方格内四角和正中共5个中方格内的红细胞。对压线细胞按"数上不数下、数左不数右"的原则进行计数。四、计算红细胞数/L=5个中方格内红细胞数×5×10×200×106=5个中方格内红细胞数×1010=5个中方格内红细胞数÷100×1012式中：×55个中方格换算成1个大方格；×101个大方格容积为0.1μl，换算成1.0μl；×200血液的实际稀释倍数应为201倍，按200是便于计算；×106由1μl换算成1L。五、参考区间男：（4.09～5.74

3、）×1012/L女：（3.68～5.13）×1012/L新生儿：（5.2～6.4）×1012/L婴儿：（4.0～4.3）×1012/L儿童：（4.0～4.5）×1012/L六、附注1．采血时不能挤压过甚，因此针刺深度必须适当。2．稀释液要过滤，试管、计数板均须清洁，以免杂质、微粒等被误认为红细胞。3.参考范围数值内，两次红细胞计数相差不得超过5%。4.不允许以血红蛋白浓度来折算红细胞数。七、临床意义　　红细胞增加或减少的临床意义与血红蛋白测定相似。一般情况下，红细胞数与血红蛋白浓度之间有一定的比例关系。但在病理情况下，

4、此比例关系会打破，因此，同时测定二者，对贫血诊断和鉴别诊断有帮助。