仪器法与手工法网织红细胞计数对比分析

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1、仪器法与手工法网织红细胞计数对比分析作者:龚永启,蒋玉叶,刘更夫,胡芳,左芳【摘要】目的:比较仪器法与手工法网织红细胞(Ret)计数差异情况。方法:EDTAK2抗凝全血标本分别采用仪器法和手工法(显微镜)作Ret计数。结果:仪器法和手工法Ret计数结果差异均无显著性(P>0.05),但Hb含量在90g/L~110g/L之间的血液标本采用仪器法Ret计数时,有35%的患者超过正常参考范围,有2.4%的患者低于正常参考范围。结论:仪器法较手工法Ret计数方便、快捷、重复性好、准确性高、结果稳定,在大、中型医疗机构中可广泛应用。另外应加大临床上轻度贫血患者

2、Ret检查的力度,以防漏诊。【关键词】仪器法;手工法;网织红细胞  目前,基层大多数医院的网织红细胞(Ret)计数,仍然使用传统的显微镜计数方法,此方法操作较烦琐,影响结果的因素较多,既费时,又费精力,工作量大,而仪器法操作简单,时间短,重复性好,结果准确,笔者就仪器法与手工法计数Ret作比较分析,现报告如下。  1材料与方法6  1.1材料  1.1.1仪器与试剂日本希森美康公司生产的SysmexSE9000全自动血液分析仪及进口配套Ret试剂及质控物,所有试剂均在有效期内使用。  1.1.2标本来源本病例均为我院2006年7月至8月间的住院患者,

3、其中有血液内科、肾内科、妇科、产科、消化内科、肝肠科等各科住院患者标本。  1.2方法患者标本用EDTAK2真空抗凝管抽血2ml。仪器在测定前自动校准,待各项检测参数在允许的范围之内应进行室内质控物监控,最后测定Ret,结果备用。作仪器法Ret计数的同时,用珠海贝索生物技术有限公司提供的10g/L煌焦油蓝染液与血液1∶1比例于刻度离心管中进行20min的染色后推片备用。显微镜计数前,目镜放置米勒窥盘,以提高计数速度和准确性。本镜检实验由5位技术熟练工作人员操作,统一计数方法和计数标准,要求涂片均匀,厚薄适宜,每份标本选2张血膜片,血膜长约3cm,选择

4、染色深浅适中。遇有异常细胞须经多人共同商议确定。计数时选择涂片体尾相交处细胞展开良好,分散较均匀的部位,由近边到中心顺序计数,避免重复或遗漏。人工显微镜测定油镜下计数16000个红细胞中的Ret数,以百分率表示[1]。  1.3统计方法采用t检验。  2结果  2.1计数人员间差异性比较取20份Hb在111g/L~150g/L之间的全血标本作Ret计数,选7名工作人员计数,从中选取5名人员计数结果差异较小的参与手工法与仪器法Ret比较,结果见表1。  表1人与人之间Ret计数差异比较(略)  注:1~5之间比较P>0.05;6、7与1~5比较P<0.0

5、5。  2.2仪器法与手工法Ret计数重复性比较仪器法与手工法对质控物,患者全血标本作平行实验,质控物为A组,Ret在0.5%~1.5%范围为B组,Ret计数>1.5%为C组,仪器法A、B、C各检测20份标本,手工法相对应的编为A、B、C组,5位工作人员操作每份标本各工作人员操作2张血膜片结果取均值。将5位人员各自的均值去掉最高值和最低值后再均值作为手工法结果A、B、C。仪器法与手工法Ret数据基本接近差异无显著性(P>0.05),不过手工法的CV值大于仪器法CV值,说明仪器法测定结果重复性更好,其结果见表2。  表2仪器法与手工法Ret重复性比较(略

6、)6  注:仪器法与手工法Ret结果两组比较P>0.05。  2.3选Hb在90g/L~110g/L之间235例作Ret计数,有35%的人超过正常参考值,约有2.4%人低于正常参考值。  3讨论6  仪器法Ret计数与一般血细胞分析仪原理一样,均为流式细胞术中的鞘流技术,射频技术。由于激光束可摄入红细胞内容物的分析,而Ret是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间尚未成熟的红细胞,其胞浆内含有一定量RNA,经染色后可显示网织结构,且与形式和RNA含量有关[2]。根据这一原理可将Ret分为:早期Ret(HFR)、中期Ret(MFR)和晚期Ret(LFR),它们比

7、率的高低,组合比例的高低对贫血的诊断和鉴别诊断,贫血的疗效观察,肿瘤治疗过程中起着决定性的重要作用。Ret计数仪可得出Ret结果的相对值和绝对值,计数速度快、时间短、重复性好、结果准确可靠。通过对40份全血标本作仪器法与手工法Ret计数结果比较差异无显著性(P>0.05),质控物结果也在允许范围之内。当然存在不足的是,此仪器成本高,价格贵,基层医疗单位投入较为困难。手工Ret计数以试管法重复性较好,容易掌握,被列为手工法Ret计数的参考方法[3]。近年来使用了米勒窥盘计数,规范了计数区域,减少了实验误差,使结果的准确性有所提高。本次实验手工法结果较仪器

8、法结果稍有偏低,究其原因可能是,计数区域误差,染色深浅判断Ret误差,染色液与血液的比例不恰当

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