血栓与止血试验.ppt

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1、血栓与止血检验临床血液学教研室第一节血栓与止血的筛选检验一、一期止血缺陷的筛选检验二、二期止血缺陷的筛选检验三、纤溶活性增强的的筛选检验四、抗凝物质检验出血时间测定血小板计数束臂试验（毛细血管脆性实验）血块收缩试验毛细血管抵抗力试验第一节一期止血筛查试验出血时间测定(bleedingtime，BT)一、原理：测定在皮肤受特定条件外伤后，出血自然停止所需的时间即为出血时间。此过程反映了毛细血管与血小板的相互作用，包括内皮下组织与血小板粘附（通过vWF的作用）、血小板的聚集和释放等反应，以及PGI2与TXA2的动态平衡。二、方法Duke法

2、、Ivy法、出血时间测定器法（TBT法）（卫生部推荐方法）三、试剂与器材：1、血压计，秒表，干净滤纸2、出血时间测定器四、操作：1、血压计袖带缚于测定上肢的上臂，加压并维持在40mmHg,儿童减半。2、在肘前窝下5cm处的尺侧做局部消毒后，将测定器垂直贴于皮肤表面，按下按钮，同时启动秒表，移开测定器。3、每隔30s,用干净滤纸吸去流出的血液，直至流血自然停止，并记录秒表读数。五、参考值：2.3-9.5min六、临床意义：延长：1、血小板数量异常，如ITP、TTP2、血小板功能异常，如plt无力症、巨大plt综合征、储存池病3、血管壁异

3、常血管性血友病、遗传性毛细血管扩张症4、某些严重的凝血因子缺乏缩短：高凝状态和血栓性疾病七、质量控制1、注意影响BT测定的因素2、滤纸吸去血液时，避免与伤口接触3、注意药物的影响（抗凝剂、Apc）血小板检验一、血小板计数二、血小板生存时间检测三、血小板相关抗体检测四、血小板粘附试验五、血小板聚集试验六、血小板第3因子有效性检测七、血小板膜糖蛋白检测八、血小板活化指标检测（血浆β-TG、PF4、血小板P选择素检测）血小板计数（plateletcount,PC或plt）正常值：（100～300）×109/L危险PC＜20×109/L可引起

4、自发性出血血小板粘附试验(plateletadhensiontest,PAdT)原理：受检者血液一定速度通过一定量玻璃珠的塑料管，测定通过玻璃珠前后血液中血小板数的差值，即为粘附于玻珠和塑料管的血小板数，由此可计算出其占血小板总数的百分比，即为血小板粘附率。方法：玻球法、玻璃滤器法、玻珠法临床意义：血管性血友病、巨大血小板综合症、血小板无力症、肝硬化、MDS、急性白血病、服用抗血小板药物等血栓前状态和血栓性疾病、妊高症、口服避孕药等粘附率减低粘附率增高诱聚剂PPPPRP血小板聚集试验plateletaggregationtset，PA

5、gT比浊法：以PPP设最低浊度，PRP设最高浊度，在血浆中加入诱聚剂，测定血浆浊度的变化，绘制血小板聚集曲线。临床意义：血小板无力症、血管性血友病、巨大血小板综合症、血小板贮存池病、低（无）纤维蛋白原血症、肝硬化、使用血小板抑制剂等。高凝状态、血栓形成性疾病、动脉粥样硬化、糖尿病、口服避孕药、人工瓣膜移植术后、吸烟等。聚集率减低聚集率增高质量控制：1.采血要顺利，避免组织液混入，抗凝剂使用合理（不用EDTA抗凝）2.采集后3h内室温下完成3.试验前十天停用一切抑制血小板聚集的药物；试验前禁食高脂类食物4.注意PRP：1000r/min

6、离心10minPLT(100～300)×109/LPPP：3000r/min离心20minPLT＜20×109/L全血凝固时间测定（CT）活化部分凝血活酶时间测定（APTT）血浆凝血酶原时间测定（PT）第二节二期止血缺陷筛查检验全血凝固时间测定(coagulationtime,CT)[原理]观察血液自离体后，到玻璃试管中凝固所需时间血液从血管中抽出与带负电荷表面接触内源性凝血途径启动纤维蛋白形成（血液凝固）XIIXIIa临床意义1.因子VIII、IX、XI活性减低；严重的因子Ⅴ、Ⅹ和纤维蛋白原缺乏2.原发性纤溶亢进；血循环中存在抗凝物

7、质高凝状态和血栓性疾病CT延长CT缩短肝素治疗用量检测指标活化部分凝血活酶时间测定(activatedpartialthromboplastintime，APTT)一、原理APTTCa2+脑磷脂白陶土Ca2+脑磷脂部分凝血活酶二、操作（一）APTT手工法(试管法）血浆0.1ml＋APTT试剂各0.1ml+CaCl20.1ml（混匀计时）结果观察：缓慢倾斜试管，观察液体流动状态，流动停止停止计时参考值25∼45s(二）仪器法37℃水浴5min37℃温浴APTT延长缩短因子VIII、IX、XI活性减低高凝状态三、临床意义肝素抗凝监测APT

8、T纠正试验于患者血浆中分别加入1/4的正常新鲜血浆、硫酸钡吸附血浆、正常血清，再作APTT试验。硫酸钡吸附血浆VIII、XI、XII（不含IX）正常血清IX、XI、XII（不含VIII）新鲜血浆VIII、IX、XI、XI