考点一微生物的分离与培养.doc

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1、专题二微生物的培养与应用知识默写1•培养基(1)概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质。(2)营养组成：_般都含有o此外，还需要满足微生物生长对、以及特殊营养物质的要求。例如：培养乳酸菌时需在培养基中添加培养霉菌时需将培养基的PH调至培养细菌时需将培养基调至(3)种类：按照物理性质可分为培养基和培养基。2.无菌技术(1)含义：指在培养微生物的操作中，所有防止的方法。⑵不同对象的无菌操作方法琏线)方法类型对象3.大肠杆菌的纯化培养%1灼烧灭菌%1干热灭菌%1巴氏消毒%1紫外线%1化学药物高压蒸汽火菌a.消毒灭菌I.接种针(环)U.培养IHni.操作者的衣着和手N冰源

2、地(1)制备牛肉膏蛋白JJ东固体培养基计算称量f(2)纯化大肠杆菌的方法%1纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由细菌繁殖而来的肉眼可见的菌落,即可获得较纯的菌种。%1纯化大肠杆菌的关键步骤是。%1常用的微生物接种方法有两种a.:是通过接种环在琼脂固体培养基表面的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。(注意：在操作的第一步以及每次划线之前要接种环；在做第二次及其后的划线操作时，要从上一次划线的开始划线)b.:是将菌液进行一系列的,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养慕的表而，进行培养。(注意：涂布平板的所有操作都应在进行)(1)菌种的保存方法%1对于频繁使用的菌种

3、，可以采用的方法。%1对于需要长期保存的菌种，可以采用的方法。4、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(1)分离原理：土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成,这种物质在把尿索分解成无机物的过程中起到作用。(2)将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称作(3)统计菌落数目：统计样品中的活菌一般用法(统计的菌落数一般比活菌的实际数);也是测定微生物数量的常用方法；为保证结果准确，一般选择菌落数在的平板计数(4)实验流程：土壤取样〜-微生物的培养与观察一细菌的o(5)鉴定：分解尿素的细菌：在以为唯一氮源的培养基中加入，—如果PH升高，指示剂将5、分解纤

4、维素的微生物的分离(1)纤维素酶作用的原理纤维素(2)纤维素分解菌的筛选%1原理纤维素分解菌刚果红纤维素I空聲红色消失，出现%1筛选方法:法，即通过来筛选纤维素分解菌。%1培养基：以为唯一碳源的选择培养基。%1实验流程土壤取样一选择培养一一涂布平板一挑选菌落%1鉴别：纤维素酶发酵方法有和专题二微生物的培养与应用知识默写1.培养基(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。(2)营养组成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。此外，还需要满足微生物生长对止、氧气以及特殊营养物质的要求。例如：培养乳酸菌时需在培养基中添加维生素；培养霉菌时需将培养基的PH

5、调至酸性，培养细菌时需将培养基调至中性或微碱性(3)种类：按照物理性质可分为液体培养基和固体培养基。2.无菌技术(1)含义：指在培养微生物的操作小，所有防止杂菌污染的方法。(2)关键：防止外来杂菌的入侵。(3)不同对象的无菌操作方法(连线)方法对乂a〉灼烧灭俯⑥疝压蒸汽灭菌类中②I：热火菌II培养mi③巴氏消毒b•灭苗④紫外线⑻匕学药物I•接种针(环)1冰源地3•大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白J］东固体培养基%1操作步骤计算-称量一溶化一灭菌f倒平板%1倒平板的方法及注意事项丙Ta.请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：丙一乙一甲一丁。b.甲、乙、丙中的灭菌方法是灼烧

6、灭菌。c.丁中的操作盂要等待平板冷却凝固才能进行。(2)纯化大肠杆菌的方法①纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细菌繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。%1纯化大肠杆菌的关键步骤是拋E。%1常用的微生物接种方法有两种a.平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表血连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。（注意：在操作的第一步以及每次划线之前要灼烧接种环；在做第二次及其后的划线操作时，要从上一次划线的末端开始划线）b.稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表而，进行培养。（注意：涂布平板的所有操

7、作都应在火焰附近进行）系列稀释操作（如下图所示）：1mLImL用涂布器将菌液均匀地涂布在培芥肚农而涂布时可转动培养1111•使博液涂布均匀取少最菌液（不jn加到培养基衣面X将涂布器浸的烧杯中D知识梳理夯实基础突破要点涂布平板操作（如下图所示）:将沾有少尿酒林的涂布器在火焰上引燃•待酒桁燃尽后•冷却8-10s（3）菌种的保存方法%1对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。%1对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。考点二微生物的筛选和计数1.土壤中分解尿素的细菌的分离与