选修一：微生物的分离和培养.doc

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1、选修一：微生物的分离和培养一、知识梳理1．相关技能、技术和方法(1)无菌操作的技能①干热灭菌法是指将准备灭菌的物品放在内，在℃下加热h以达到灭菌的目的。②湿热灭菌法常采进行，其使用包括加水、、、、出锅等步骤。(2)培养基的配制①培养基的概念：是为人工培养微生物而制备的适合微生物的营养基质。②营养组成：一般都含有、(提供碳元素的物质)、(提供氮元素的物质)和无机盐等最基本的物质。此外，根据拟培养的微生物的不同需要，有时还要加入等特殊的营养物质，并要调节培养基中使之满足微生物生长的需要。③种类：培养基和培养基，前者的主要优点是，缺点是

2、营养成分；后者的优点是，缺点是配。(3)微生物的接种①接种：是指在条件下将微生物接入的操作过程。②常用的工具有等，在涂布平板接种时要用，穿刺接种时要用接种针，在或在固体培养基平板上进行时要用接种环。2．大肠杆菌的接种与分离培养(1)配制牛肉膏蛋白胨培养基其操作步骤：配制培养基→调节pH→分装→包扎→灭菌→搁置斜面。(2)斜面接种和培养大肠杆菌①主要目的：、和等。②主要步骤：准备接种→→→挑取少许菌种→→在中培养大肠杆菌24h→将增殖的菌种放置在冰箱的冷藏室中(4℃)保存。(3)平板划线分离和培养大肠杆菌①平板制作的方法及注意事项a

3、．请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：。b．甲、乙、丙中的灭菌方法是。c．丁中的操作需要等待后才能进行。②平板划线法是指用带有微生物的在平板培养基表面通过而纯化分离微生物的一种方法。二、课时训练1、下列有关平板划线接种法的操作错误的是（）A．将接种环放在火焰上灼烧B．将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液C．蘸取菌液和划线要在火焰旁进行D．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连2．有关倒平板的操作错误的是（）Ａ．将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上B．使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰C．将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上D．等待

4、平板冷却凝固后需要倒过来放置3.有关稀释涂布平板法，叙述错误的是（）Ａ．先将菌液进行一系列的梯度稀释Ｂ．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面Ｃ．适宜条件下培养D.结果都可在培养基表面形成单个的菌落4．微生物培养过程中，肉眼鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是（）A．细菌的大小、形状、颜色B．菌落的大小、形状、颜色C．有无鞭毛D．培养基的不同5．细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌(　　)A．接种环、手、培养基B．高压锅、手、接种环C．培养基、手、接

5、种环D．接种环、手、高压锅6．下图中甲是涂布平板法中的部分操作，乙是平板划线法的操作结果。下列叙述中错误的是(　　)A．甲中涂布前要将涂布器灼烧，冷却后才能取菌液B．对于浓度较高的菌液，如甲中的稀释倍数仅为102，则所得的菌落不一定是由单一的细胞或孢子繁殖而成C．乙培养皿中所得的菌落都符合要求D．乙中的连续划线的起点是上一次划线的末端7、请回答下列微生物培养与应用的有关问题：（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑______、______和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、______

6、、______等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行________（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和______；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能__________。（3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_______。（4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的____________。（5）培

7、养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_________。（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_______处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。8．下图甲、乙是微生物接种常用的两种方法，请回答相关问题。(1)图甲是利用____________法进行微生物接种，图乙是利用__________________法进行微生物接种。这两种方法所用的接种工具分别是________和________；对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是________和酒精消毒。(2)接种

8、操作为什么一定要在火焰附近进行？________________________________________________________________________。(3)接种后，在固体培养基上培养细菌时为什么进行倒置培养？______