家蚕滞育激素受体体外上调下游海藻糖酶基因的表达.pdf

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1、第28卷第3期江苏科技大学学报(自然科学版)Vo1．28No．32014年6月JournalofJiangsuUniversityofScienceandTechnology(NaturalScienceEdition)Jun．2014doi：10．3969／j．issn．1673—4807．2014．03．019家蚕滞育激素受体体外上调下游海藻糖酶基因的表达沈兴家，王力刚，韦博尤，朱娟，唐顺明，赵巧玲(1．江苏科技大学蚕业研究所，江苏镇江212018)(2．中国农业科学院蚕业研究所，江苏镇江212018)(3．广西蚕业科学研究院，广西南宁530007)摘要：家蚕滞育激素(B

2、ombyxmoridiapausehormone，BmDH)与滞育激素受体(BmDHreceptor，BmDHR)结合，调控其信号通路中的下游基因的表达．在二化性家蚕中，受滞育信号的影响，蛹体卵巢膜上海藻糖酶的活性增强．为了证实BmDHR对家蚕海藻糖酶基因(Bmtre)表达的调控作用，以pcDNA3．1为载体，构建了4种由ie一1启动子驱动的不同Bmdhr的表达质粒pcDNA—iel—Bmdhrl、pcDNA—iel—Bmdhr3、pcDNA—iel—Bmdhr4、pcDNA—iel—Bmdhr5和(Bmtre启动子驱动的萤火虫荧光素酶基因(1uciferase，luc)报告

3、质粒p3Z—Bmtre—luc；用脂质体(Lipofectin)包埋1种Bmdhr表达质粒或不同摩尔比的pcDNA—iel—Bmdhrl／pcDNA—iel—Bmdhr5以及报告质粒后，分别共转染源于卵巢的家蚕细胞BmN，在DH作用下体外检测BmDHRs对海藻糖酶基因启动子活性的影响．结果表明，4种滞育激素受体BmDHR一1、BmDHR一3、BmDHR一4和BmDHR一5分别表达时，均能上调海藻糖酶基因启动子的活性；不同摩尔比(1：3，1：1，3：1)的BmDHR一1／BmDHR一5也均能上调海藻糖酶基因启动子的活性，由此证明BmDHR能上调其信号通路中下游基因Bm￡的表达．

4、关键词：家蚕；滞育激素受体；海藻糖酶；基因表达调控中图分类号：$881．2文献标志码：A文章编号：1673—4807(2014)03—0298—05DiapausehormonereceptorsofBombyxmoriup-regulateexpressionofitsdownstreamgenetrehalaseinvitroShenXingjia，WangLigang，WeiBoyou，ZhuJuan，TangSunming，ZhaoQiaoling’(1．SericulturalResearchInstitute，JiangsuUniversityofSciencea

5、ndTechonology，ZhenjiangJiangsu212018，China)(2．SeficulturalResearchInstitute，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，ZhenjiangJiangsu212018，China)(3．GuangxiAcademyofSericulturalSciences，NanningGuangxi530007，China)Abstract：Bombyxmoridiapausehormone(DH)bondswithdiapausehormonereceptors(BmDHR)tore

6、gulatedownstreamgenesatitssignalpassway．InthepupalstageofbivohinesilkwormB．mori，theenzymeactivityoftrehalaseisenhancedbydiapausesignalonthemembraneofovaries．TovalidatetheregulationfunctionofBm-DHRonBombyxmoritrehalasegene(Bmtre)，weconstructed4differentBmDHRexpressionplasmidsdrivenbyie一1prom

7、oterbyusingpcDNA3．1vector，pcDNA—iel—Bmdhrl，pcDNA—iel—Bmdhr3，pcDNA—iel—Bmdhr4andpcDNA一1一Bmdhr5．andareportplasmidp3Z—Bmtre—lucwithaluciferasegenedrivenbyBmtrepromoter．ThenBmNcellsdeliveredfromtheovaryofB．moriwereco—transfectedrespectivelywithaboveoneBmDHRe