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时间:2020-03-21
《肠肌灌流实验豚鼠.doc》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、M胆碱受体和H1受体激动药对离题豚鼠回肠的作用实验步骤1.实验装置准备和仪器参数设置(1)离体肠管描记装置的准备见图7-15-1,麦氏浴槽中加固定量的台氏液,调节超级恒温器的温度,使麦氏浴槽内温度稳定在37±0.5℃。通气管接95%O2+5%CO2混合气体管道。用螺丝夹调节气体管道的气体流量,调节至浴槽中气泡一个个逸出为止。(2)张力换能器固定于铁支柱上,换能器输出线接微机生物信号处理系统,仪器参数设置:RM6240系统:点击“实验”菜单,“自定义实验项目”菜单中的“肠肌记录”。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数:通道时间常数为直流,滤波频率10
2、Hz,灵敏度3g,采样频率200Hz,扫描速度1s/div。2.标本准备(1)取豚鼠一只,用木槌击其头部致昏死,立即剖开腹腔,找到回盲部,然后,在离回盲部1cm处剪断,取出回肠约10cm左右一段,置于氧饱和的台氏液培养皿中,沿肠壁除去肠系膜,然后将回肠剪成数小段(约1~1.5cm),用5ml注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净,换以新鲜台氏液备用。注意操作时勿牵拉肠段以免影响收缩功能。(2)取一小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中,在其两端对角壁处,分别用缝针穿线,并打结。注意保持肠管通畅,勿使其封闭。肠管一端连线系于浴槽固定钩上,然后放入37℃麦氏浴槽
3、中。再将肠管的另一端系结在张力换能器的悬臂梁上,调节肌张力至2~3g(图7-15-1)。【观察项目】1.待离体回肠稳定10~30分钟后,记录一段正常收缩曲线后,依次向麦氏浴槽中滴加下列药物。加入一种药液后,观察2~3分钟,并连续记录肠管收缩曲线,然后用台氏液连续冲洗二次,待基线恢复到用药前的水平,随后记录一段基线。再加入第二种药液。浴槽液体的容量应相等。2.加入10-2g/LACh0.2ml,观察并记录其收缩曲线,2~3分钟后换液。3.重复以上Ach剂量,待收缩达最高点时,加入1g/Latropine0.2ml,观察并记录其收缩曲线。不换液,待曲线
4、降至基线或基本稳定后,再加入相同浓度的ACh,观察并记录其收缩曲线。4.加入10-2g/Lhistamine0.3ml,待作用明显时(1~2分钟),迅速换液。使肠肌张力恢复正常。5.加入10-3g/Lchlorpheniramine溶液0.2ml5分钟后(不换液),加入同量histamine,观察并记录其收缩曲线。6.加入10g/LBaCl2溶液1ml,观察其反应,当作用达最高点,肠段持续于痉挛收缩状态时,加入1g/Latropine溶液0.2ml(或更大剂量),观察并记录其收缩曲线收缩曲线基线离体回肠10-2g/LACh0.2mlAch收缩最高值
5、加入1g/Latropine0.2mlAch收缩最高值加入1g/Latropine0.2ml稳定后加入1g/LAch0.2ml10-3g/Lchlorpheniramine5min后加入同量histamine10g/LBaCl2溶液1ml,作用达最高点,1g/Latropine溶液0.2ml(或更大剂量)问题1.5个关键词小鼠M胆碱受体H1受体离体豚鼠回肠单因素方差分析2.哺乳类消化道平滑肌细胞膜上受体B8受体,M3受体,H1、H2、H3受体小肠:虽然M3是调节环肌收缩的主要受体,M3和M2两者都参与纵肌的收缩,除m2和m3外,m1和m4也可在鼠和
6、兔回肠中检测到。大肠:Maedaetal在猪和鼠大肠组织曾检测到m2和m3两类受体mRNA有表达.M2和M3两型受体可能都参与结肠环肌的收缩,但M3的成分更大M胆碱能受体激动剂——毛果芸香碱、新斯的明、碘解磷定M胆碱能受体拮抗剂——阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱、筒箭毒碱、3.M胆碱能受体激动对消化道平滑肌有何影响胆碱受体激动药(cholinoceptoragonists)与胆碱受体结合,激动受体,产生与递质乙酰胆碱相似的作用按其对不同胆碱受体亚型的选择性,可分:①M,N胆碱受体激动药;②M胆碱受体激动药;③N胆碱受体激动药。许多器官是由胆碱能和去甲肾
7、上腺素能神经双重支配的,通常是其中一占优势。例如,在胃肠道、膀胱平滑肌和腺体是以胆碱能神经占优势,而心肌收缩和小血管方面则以去甲肾上腺素能神经占优势。静脉注射小剂量Ach即能激动M胆碱受体,产生与兴奋胆碱能神经节后纤维相似的作用,引起心率减慢、血管舒张、血压下降,支气管和胃肠道平滑肌兴奋,瞳孔括约肌和睫状肌收缩以及腺体分泌增加等兴奋平滑肌,使其收缩M胆碱受体拮抗剂对乙酰胆碱的效应影响M抗胆碱药物阻断M3受体组胺H1受体激动对消化道平滑肌影响激活H1受体,通过三磷酸肌醇、二脂酰甘油介导,兴奋支气管和胃肠道平滑肌,增加毛细血管通透性和扩张部分血管H1受
8、体阻断剂扑尔敏对组胺效应的影响氯苯吡胺品是最强的抗组胺药之一,镇静作用较异丙嗪弱,也有一定的抗胆碱作用。它与苯海拉明相似,
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