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1、实验4离体家兔肠肌运动[摘要]目的：观察HCl、NaOH、18摄氏度台氏液和肾上腺素乙酰胆碱对离体家兔肠肌运动的影响。方法：利用RM6240系统采集实验数据，并进行统计分析。结果：统计分析得最大张力较对照组的P<0.01,最小张力的P<0.05,张力差值>0.05,说明8个小组的最大张力和最小张力较对照组差异显著，张力差值差异不显著。结论：肠肌易受到离子环境、神经递质、激素和温度影响，HCl、乙酰胆碱对肠肌收缩有加强作用，NaOH、肾上腺素、18℃台氏液对肠肌收缩有抑制作用。[关键词]离体家兔肠肌；张力；1材
2、料1.1实验动物家兔。1.2主要仪器张力换能器，微机生物信号采集处理系统，麦氏浴槽，超级恒温器；兔手术台，通气管，手术器械。1.3主要试剂台氏液，HCl,NaOH,肾上腺素，乙酰胆碱溶液。2方法2.1体家兔肠肌标本制备：取健康家兔一只，用木槌击其头部致昏，立即剖开腹部，找到十二指肠取出15cm左右一段，置于氧饱和的台氏液培养皿中，，沿肠壁除去肠系膜，用5ml注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净，然后将十二指肠剪成1.5cm8段，在台氏液培养皿中将每段肠肌在其两端对角壁处缝针穿线并打结。注意保持肠管通畅，勿使其封
3、闭。2.2标本固定：肠管一端连线系于张力换能器的悬臂梁上，然后放入37氏度麦氏浴槽中，再将肠管另一端系于与曹固定钩上，调节肌张力至2-3g。2.3实验系统连接及参数设置:（1）麦氏浴槽中加15ml台氏液，调节超级恒温器的温度，使麦氏浴槽内温度稳定在37±0.5摄氏度。通气管接百分之95氧气+百分之5的二氧化碳混合气体管道。用螺丝夹调节气体管道的气体流量，调节至浴槽中气泡一个个逸出为止。（2）能器接输出线接微机生物信号处理系统，仪器参数：开启RM6240系统，点击第一通道，选择“张力”。3实验观察3.1滴加HC
4、l，观察并记录其收缩幅度，反应稳定后换液冲洗。3.2滴加NaOH，观察并记录其收缩幅度，待曲线恢复至基线或基本稳定后换液冲洗。3.3用18摄氏度的台氏液灌流肠肌，观察并记录其收缩幅度，待恢复正常。3.4加入肾上腺素溶液后，观察其反应。反应稳定后换液冲洗。3.5加入乙酰胆碱溶液，观察并记录其反应。-3.6统计方法结果以X+S表示，用Excel统计函数进行数据统计。4.实验结果数据分析统计结果如下表：得结果当p<0.05差异显著；p>0.05差异不显著。与对照组比较：*P<0.01,**P<0.05,***P>0
5、.05，前两者差异显著，后一者差异不显著。5.讨论1正常情况下,我们观察到离体十二指肠平滑肌在台氏液中可以自动地、缓慢地收缩。2、在浴槽中加入0.001%乙酰胆碱(Ach)2滴后,可见离体肠管活动增强,描记曲线出现收缩频率变快,幅度增加。机制如下:①Ach与肌膜M受体结合,使平滑肌Ca2+专用通道开放,Ca2+内流上升,一方面使肌浆[Ca2+]上升,收缩幅度上升;另一方面,使平滑肌兴奋性上升,直接或间接使其收缩频率上升。②Ach与肌膜M受体结合,引起生电性钠泵活动,使静息点位下降,最终引起平滑肌兴奋性上升,使
6、其收缩频率上升。.3、在浴槽中加入0.001%肾上腺素2滴(约0.2ml)后,可见离体肠管活动减弱,描记曲线出现收缩频率变慢,幅度减小以及基线下移。机制如下:①肾上腺素与肠肌细胞膜上的α和β两种受体共同结合,使K+、Ca2+外流增多,细胞膜发生超极化,肠肌兴奋性降低,收缩频率下降。②同时,肾上腺素还单独作用于β受体,使Ca2+泵活动上升,还可以使Ca2+外流增加,使肌浆[Ca2+]下降,使收缩频率下降。③此外,肾上腺素还能使生电钠泵活动上升,引起细胞膜发生超极化,肠肌兴奋性降低,收缩频率下降。.4、消化道平滑
7、肌对温度刺激敏感，将38度的台氏液迅速换成25度的台氏液，前期肠肌的代谢水平尚未适应新环境，随后肠肌的代谢逐渐升高至超过正常水平，最后趋于正常。.5、在浴槽中加入1NNaOH溶液2滴后,离体肠管活动增强,描记曲线出现收缩幅度增加。机制如下:NaOH可以中和H+,使[H+]下降,使得Ca2+内流上升使平滑肌兴奋性上升,同时使肌浆网[H+]上升并使Ca2+与肌钙蛋白结合上升,最后使得其收缩频率和幅度上升。.6、在浴槽中加入1N盐酸溶液2滴后,离体肠管活动减弱,描记曲线出现收缩幅度降低,频率变慢。机制如下:①细胞外
8、[H+]升高时,Ca2+通道的活性受到抑制,使得Ca2+内流减少,使肠肌兴奋性降低,收缩频率下降。②同时使肌浆网[H+]上升,使肌浆网[H+]下降,Ca2+与肌钙蛋白结合下降,使收缩幅度下降。另外家兔离体小肠各段平滑肌尽管失去外来神经支的支配,但壁内神经丛依然存在。由位于环行肌粘膜下边缘与肠肌丝Cajal间质细胞是小肠慢波活动的起搏器和传导者。由Cajal间质细胞自发活动的产生和传导易受到离子环境、
