黄连素通过NF-κB信号通路对TNF-α诱导的VEGF表达的影响.pdf

《黄连素通过NF-κB信号通路对TNF-α诱导的VEGF表达的影响.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、第43卷第4期第386页华中科技大学学报(医学版)Vo1．43No．4P．3862014年8月ActaMedUnivSciTechnolHuazhongAug．2014黄连素通过NF一，cB信号通路对TNF一诱导的VEGF表达的影响*李井彬，柯善栋。，胡少明华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合科，武汉430030。湖北省黄石市中心医院血液科，黄石435000摘要：目的观察黄连素对肿瘤坏死因子一d(tumornecrosisfactor—a，TNF-a)诱导的血管内皮细胞生长因子(vascu—larendoth

2、elialgrowthfactor，VEGF)表达的影响及探讨其可能机制。方法实验分两部分，第1部分：以10ng／mL的TNF—d分别作用人肝癌细胞(HepG2)0、12、24、48h；第2部分：分别以0、10、25、50gmol／L的黄连素预孵育HepG2细胞24h后，继续与TNF_a共孵育24h。MTT法检测黄连素对HepG2细胞增殖能力的影响；Real—timePCR检测各组细胞VEGFmRNA水平；Westernblot检测各组细胞VEGF、IxBa、NF-xBp65蛋白表达；ELISA检测NF-xB的活性。

3、结果黄连素对HepG2细胞生长的抑制能力呈浓度依赖性；TNF-u显著上调HepG2细胞中VEGFmRNA和蛋白表达且呈时间依赖性；黄连素显著下调TNF-a诱导的HepG2细胞中VEGFmRNA和蛋白表达且呈浓度依赖性；TNF_d显著下调IxBa表达且呈时间依赖性，上调NF-xBP65的表达及NF-xB活性且呈时间依赖性；黄连素显著上调IxBa表达且呈浓度依赖性，下调NF—xBP65的表达及NF-xB活性且呈浓度依赖性。结论TNF-~在HepG2细胞中能上调VEGF的表达，而黄连素能下调由其诱导的VEGF表达，可能是通

4、过NF-~B信号通路所介导的。关键词：黄连素；HepG2；血管内皮细胞生长因子；肿瘤坏死因子一a；核转录因子一xB中图分类号：R282．71DOI：10．3870／j．issn．1672-0741．2014．04．004EffectofBerberineonTNF-a·-inducedVEGFExpressionviaNF_。KBSignalingPathwayLiJingbin，KeShandong，HuShaoming△DepartmentofIntegratedTraditionalChineseandWest

5、ernMedicine，TongJiHospital，TongjiMedicalCollege。HuazhongUniversityofScienceandTechnology，Wuhan430030，ChinaDepartmento，Hematology，HuangshiCentralHospital，Huangshi435000，ChinaAbstractObjectiveToexaminetheeffectofberberineontumornecrosisfactor—a(TNF—a)一inducedVEGF

6、expressionandthepossiblemechanism．MethodsThereweretwosessionsinthisstudy．Inthefirstsession，HepG2ceilsweretreatedwith1Ong／mITNF-afor0，12，24and48h，respectively．Inthesecondsession，HepG2cellswerepre—incubatedwith0，1O，25and50umol／Lberberinefor24h，respectively，andthe

7、ntreatedwith10ng／mLTNF—afor24h．Theeffectofberberineontheprolifer—ationofHepG2cellswasassayedbyMTT．Theleve1ofVEGFmRNAwasdetectedbyreal—timePCR，andtheexpression1evels0fVEGF，IxBdandNF-xBp65proteinsbyWesternblot．TheactivityofNF—xBwasmeasuredbyEIISA．ResultsBerberine

8、coulddose—dependentlyinhibitthegrowthofHepG2cells。TNF-dcouldincreasethemRNAandproteinexpressionleveIsofVEGFinHeDG2cellsinatime—dependentmanner．Berberinecouldsignificantlydos