复合生物酶用于植物提取工艺.doc

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1、复合生物酶用于植物提取工艺的方法及条件技术领域本发明涉及一种复合生物酶用于植物提取工艺的方法及条件。背景技术植物所含的有效成分大多包裹在细胞壁中，传统的热水、酸、碱、有机溶剂浸提法，因受细胞壁中分纤维素的阻碍，往往萃取时间长，溶剂用量多，提取效率较低，而且细胞内所含杂质（如蛋白，果胶，鞣质，灰分和粘性物质等）也干扰有效成分的提取。同时植物用醇处理后，其成分可能发生不同程度的改变或丢失，以至直接影响中药制剂的药理作用及疗效。因此传统的提取方法不但增加了生产成本高，也浪费了宝贵的植物资源。酶是由生物活体细胞产生的

2、，受多种因素调节控制的具有催化能力的生物催化剂。与一般催化剂相比有其共同性，但又有显著的特点，酶的催化效率高，具有高度的专一性。因此，利用酶可改变细胞壁的通透性，有利于壁内的药效成分溶出，从而提高药效成分的提取率。 发明内容本发明提供一种复合生物酶用于植物提取的方法及条件，不但提取效率高，而且操作简单，生产成本低，提高了植物的利用率。本发明所采用的技术方案是：复合生物酶由纤维素酶、半纤维素酶、淀粉酶、果胶酶和蛋白酶组成，其中纤维素酶5%～60%，半纤维素酶5%～30%，淀粉酶5%～50%，果胶酶5%～50%，

3、蛋白酶1%～25%，总质量组成为100%。酶的活性单位为20万U/g～120万U/g。使用方法：将底物充分粉碎，使其能通过80目～200目筛，然后按料液比为1:5～1:8放入水浴中，用酸（如乙酸、草酸、柠檬酸等）调节水浴的pH值至4.0～5.0后，根据不同底物按比例将复合生物酶倒入水浴中，充分搅匀。水浴的温度控制在15℃～60℃之间，提取时间1h～72h。在提取的同时需适当的搅动水浴，这样有利于酶的水解效果，缩短提取时间。复合生物酶的加量：以陆地植物的花、叶、果为底物时加量为底物质量重量的0.1%—0.5%。

4、以陆地植物的根、茎为底物时加量为底物的0.3%-0.8%；以海洋植物为底物时加量为底物的0.8%-3%。发明依据纤维素酶具有分解、软化纤维素、破坏细胞壁、增加植物细胞内容物的溶出量的作用，它是降解纤维素生成葡萄糖的一组酶的总称，包括内切葡聚糖酶、纤维二糖水解酶、β-葡萄糖苷酶3个组分。最适pH值4～5，最佳作用温度40℃~60℃。半纤维素酶由β-甘露聚糖酶、β-木聚糖酶等内切型酶，β-葡萄糖苷酶、β-甘露糖苷酶、β-木糖苷酶等外切型酶以及阿拉伯糖苷酶、半乳糖苷酶、葡萄糖苷酸酶和乙酰木聚糖酶等组成。具有消化植物

5、细胞壁的作用。果胶酶是分解果胶质的聚糖水解酶、果胶质酰基水解酶的一类复合酶的总称。最适作用温度45℃-50℃，作用pH值3～6。淀粉酶是水解淀粉和糖原的酶类总称，通常分为α-淀粉酶和β-淀粉酶。蛋白酶根据酶的活性中心起催化作用的基团属性，可分为丝氨酸/苏氨酸蛋白酶、巯基蛋白酶、金属蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶等。蛋白酶可将蛋白质分解成肽，再经肽酶水解成氨基酸。本发明复合生物酶用于植物有效成分提取的优点有：1、利用酶反应所具有高度专一性的特点，选择不同的酶按比例混合，将植物细胞壁的组成成分（如纤维素、半纤维素、果胶质

6、等）水解或降解，破坏细胞壁结构，使细胞内的成分充分溶解、混悬或胶溶于溶剂中，从而达到提取目的，提高提取效率，降低生产成本。利用本发明可以使提取率增加15%以上。2、植物复合酶水解条件温和，降低了随后的溶剂提取的难度，使整个提取工艺条件温和化，有助于保持药效成分的原有性质。3、能在低温下迅速有效地破坏植物细胞壁，有助于实现中药有效成分的低温提取，减少有效成分的破坏，降低能源的消耗。具体实施方式以下实施例用于更好地理解本发明，但不用来限制本发明所保护的范围。下面结合实施例对本发明作进一步的描述：实施例1：利用复合

7、生物酶对金银花进行提取。（1）取烘干的金银花2000g，超微粉碎使其能过100目筛。（2）取纤维素酶4.5g，半纤维素酶2.0g，淀粉酶1.5g，果胶酶1.5g，蛋白酶0.5g混合成10g重的复合生物酶，酶的活性单位为50万U/g。（3）将2000g粉碎后的金银花细粉加入6倍量的水，然后将温度升至48℃，加入预先配置好复合生物酶液10g，用草酸调pH值为4.5，搅拌均匀后保持48℃酶解60分钟min，然后升温至100℃进行快速灭活，再保持温度浸提1小时后自然冷却降温。（4）过滤、去渣、浓缩、干燥得浸提物。（5

8、）同时作对照，取烘干的金银花2000g，超微粉碎使其能过100目筛，加入8倍量的水，加热浸提6小时，过滤得浸提物。经检验比较，复合生物酶提取可使绿原酸得率比水提取高24.9%。实施例2：利用生物复合酶对黄连进行提取。（1）取黄连2000g，超微粉碎使其能过200目筛。（2）取纤维素酶7.0g，半纤维素酶3.0g，淀粉酶2.0g，果胶酶1.0g，蛋白酶1.0g混合成14g重的复合生物酶，酶的活性单位为