叶酸聚乙二醇接枝支化聚乙烯亚胺纳米载体转染螺旋神经节细胞.pdf

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1、中国组织工程研究18眷亨2，崩，2014—05—21出版ChineseJournalofTissueEngmeefingResearchMay21，2014Vo1．18，No．21WWW．CRTER．org叶酸聚7_,-醇接枝支化聚乙烯亚胺纳米载体转染螺旋神经节细胞陈观贵，徐亚丽(f-州医科大学附属第二医院耳鼻咽喉科，广东省广州市510260)文章亮点：1叶酸聚乙二醇接枝支化聚乙烯亚胺作为新型非病毒载体己成功应用于多种细胞的转染及基因治疗研究中，陈观贵，男，1975年生，但目前为止未发现其应用于转染耳蜗内细胞的研究报告。广东省湛江市人，博士，副教授，主要从事耳科学2实验首次以叶酸聚乙二

2、醇接枝支化聚乙烯亚胺转染耳蜗螺旋神经节细胞，发现其转染体外螺旋神经节细胞研究。的转染效率及细胞毒性均优于传统的阳离子脂质体。关键词：dohlO．396issn．2095-4344生物材料：纳米材辩：聚乙二醇接枝支化聚乙烯亚跛陌离子瞻质体：基因转染}螺旋神经缀跑：绿色荧2014．21．012光蛋a；广东省自然科学基金【http：／www．crter．org1主题词：中图分类号：R318聚乙烯二醇类：聚乙烯亚姣：鼯质体；螺旋神经节文献标识码：B基金资助：文章编号：2095-4344广东雀自然科学基金(博士启勒s~r(S2011040003553)(2014)21·03345-05缩略语：稿

3、件接受：2014．04-09叶酸聚乙二醇接枝支化聚乙烯亚技：polyethyenimine-polyethyleneglyco1．PEI-PEG摘要背景：新型阳离子纳米材料叶酸聚乙二醇接枝支化聚乙烯亚胺易于合成和改性，稳定性好，结构及性能容易调控，已被作为基因治疗转染载体应用于多种疾病的研究。目的：观察叶酸聚乙二醇接枝支化聚乙烯亚胺转染体外培养小鼠内耳螺旋神经节细胞的可行性及特点。方法：分别以叶酸聚乙二醇接枝支化聚乙烯亚胺(实验组)、阳离子脂质体LipofectamineTM2000(对照组)作为载体，制备携带增强型绿色荧光蛋白的转染载体系统。将昆明小鼠螺旋神经节细胞分别培养于含实验组

4、和对照组转染载体系统的DMEM，F．12培养基中，培养24h后，MTT法观察载体系统的细胞毒性，倒置荧光显微镜观察细胞形态及绿色荧光蛋白表达强度，流式细胞仪检测细胞转染率。结果与结论：两种载体分别转染后，螺旋神经节细胞形态均未发生明显改变，但两组载体对螺旋神经节细胞均有一定的毒性，实验组载体毒性较小且转染效率较高(Pc0．o5)。结果说明叶酸聚乙二醇接枝支化聚乙烯亚胺基因转染体外螺旋神经节细胞的转染效率及细胞毒性均优于传统的阳离子脂质体。陈观贵．徐亚丽．叶酸聚乙二醇接枝支化聚乙烯亚绫纳米载体转染螺旋神经节细胞1中国组织I程碛究．2014，181)：3345—3349．Polyethye

5、nimine-polyethyleneglycolasagenetransfervectorforspiralganglioncells／nvitroChenGuan‘gui，XuYa-li(DepartmentofOtorhinoIarygoIogy，theSecondAfiliatedHospitalofGuangzhouMedicalUniversity，Guangzhou510260，GuangdongProvince。China)AbstractBACKGROUND：Anewkindofpolyethyenimine-polyethyleneglycol(PEI-PEG)is

6、apttosynthesisandmodification，andhasgoodstability，easilyregulatedstructureandproperties，whichhasbeenappliedtoavarietyofdiseasesasgenetransfervectors．OBJECTIVE：TostudythefeasibilityandthecharacteristicsofnanoparticlesPEI—PEGasgenetransfervectorforspiralganglioncelsoftheinnerearofmice．METH0DS：Usin

7、gPEI—PEG(experimentalgroup)andlipofectamine“”2000(controlgroup)asgenetransferChenGuan—gui．M．D．，vectors，withenhancedgreenfluorescentprotein(EGFP)astracingprotein，spiralganglioncellsweretransfectedAssociateprofessor,／nvitro．th