荞麦子叶节再生体系的建立.pdf

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1、内蒙古农业科技2014(3)：7-9InnerMongoliaA鲥culturalScienceAndTechnology荞麦子叶节再生体系的建立黄／t,"--2，崔荣，曹聪，陈玲玲，孙美丽，雷雪，王婕，邹千稳(内蒙古民族大学生命科学学院，内蒙古通辽028000)摘要：实验以养麦子叶节为研究对象，摸索其再生所需的最适条件，建立荞麦的再生体系，为养麦的转基因研究奠定基础。实验结果表明：种子萌发条件为去掉外种皮的种子用0．1％升汞灭茵lmin，309／L蔗糖+7．5s／L琼脂粉的固体培养基培养。子叶节诱导生芽最适培养基为MS+2．5mg／L6-BA+0．05mg／LNAA+309／L

2、蔗糖+7．59／L琼脂粉，芽诱导生根的培养基为1／4MS+6-BA(2．0mg／L)+NAA(0．05ms／L)+309／L蔗糖+7．59／L琼脂粉。关键词：荞麦；子叶节；再生体系中圈分类号：$517文献标识码：A10．39696．issn．1007-0907．2014．03．005文章编号：1007-0907(2014)03-0007-03EstablishingofRegenerationSysteminBuckwheatCotyledonNodeHUANGFeng-lan(CollegeofLifeScience，InnerMongoliaUniversityforNati

3、onalities,Tongliao028000，China)Abstract：Usingbuckwheatcotyledonnodea8theresearchobject，itsoptimumconditionsofregenerationwasaimedtogrope，toestabhshbuckwheatregenerationsystemandlaythefoundationfortheresearchoftransgeniebuckwheat．’11Ieresultsshowedthatthebestdisinfectionconditionswas0．1％HgCl2f

4、or1．0minand309／Lsucrose+7．59／Lagarmediumonpeeledbuckwheatseeds，thebestculturemediumforcotyledonnodeinducebudswasMS+2．5mg／L6-BA+0．05mg／LNAA+309／Lsucrose+7．59／LagarandthebestculturemediumforbudstoinducerootsWasI／4MS+2．0mg／L6-BA+0．05mg／LNAA+309／Lsucrose+7．5s／Lagar．Keywords：Buckwheat；Cotyledonnod

5、e；Regenerationsystem荞麦(FagopyrumesculentumMoeneh．)是蓼科(Polygonaeeae)、养麦属(FagopyrumMill．)双子叶植物，主要栽培的有甜荞俾escu／entumMoench．也称普通荞麦1和苦荞(只Tatar／cumLGaerth．也称鞑靼养麦)。养麦在世界分布范围较广．其主产国和主要利用国有中国、俄罗斯、日本等。而我国又是养麦生产和出口大国，产量居世界第二。我国的内蒙古通辽市又被誉为“荞麦之乡”，库伦荞麦更是家喻户晓。养麦具有很高的营养保健功能以及药用价值。养麦再生体系的建立可以为荞麦转基因研究奠定基础。荞麦的再生

6、体系多由愈伤组织诱导建立。直接从子叶节诱导并建立再生体系的研究国内尚未见报道。本实验以库伦大三棱养麦为试验材料．摸索不同培养阶段子叶节再生所需要的最适培养条件．以建立高效的养麦子叶节再生体系．为养麦的转基因研究奠定基础。1材料和方法1．1材料库伦大三棱养麦。购于内蒙古通辽市种子公司。1．2方法1．2．1材料的选取与处理将去掉种皮的养麦种子先用75％乙醇表面消毒lmin，再用0．1％升汞灭菌lmin，无菌水涮洗7次，每次约lmin。将灭菌后的种子接种到309／L蔗糖+7．59／L琼脂粉的固体培养基上，放在每日光照16h、黑暗8h、温度(25±1)℃的培养室内进行培养。待无菌苗长至1

7、～2cm时，切掉根部，留取子叶节部分，将子叶上未脱落的种皮轻轻挑开，从子叶中间将其切开。造成伤13，再将切好的子叶节竖直插入诱导生芽培养基中，进行光照培养。1．2．2子叶节诱导生芽培养基中植物生长调节剂(PGR)的浓度配比筛选将养麦子叶节分别接种到309／L蔗糖+7．59／L琼脂粉的MS培养基上，其中有6-BA(0．5ms／L、1．0mCL、1．5mCL、2．0ms／L、2．5mg／L、3．0mg／L)+NAA(0．1mg／L、0．05ms／L)共12个处理，培养5d后统计每个处