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《蛋氨酸酶联合顺铂协同抑制人肺腺癌细胞GLC生长作用.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、昆明医科大学学报2014,35(1):5—7CN53—1221/RJournalofKunmingMedicalUniversity蛋氨酸酶联合顺铂协同抑制人肺腺癌细胞GLC生长作用胡月新”,徐天勇”,张钰雯”,赵瑜力,田长富∞(1)昆明医科大学科研实验中心;2)生物医学工程研究中心,云南昆明650500)[摘要]目的纯化重组蛋氨酸酶并探讨其联合化疗药物顺铂对人肺腺癌GLC细胞生长的协同抑制效应.方法对原核表达体系pGEX一4T一1一Met/Dh5a菌液破碎后上清过纯化柱(GsT)纯化后,采用M,ITI’比色法测定重组蛋氨酸酶与顺铂联合
2、应用对GLC细胞增殖的抑制作用,采用金正均法计算q值判断两药合用是否具有协同作用.结果重组蛋氨酸裂解酶浓度为0.22mg/mL,纯度达95%,活性为0.568IU/mg.给药72h后单用顺铂对GLC细胞抑制率为24.80%,单用蛋氨酸酶抑制率为27.49%,两药合用抑制率为66.80%.q=1.47>1.15,表现出明显协同作用.结论蛋氨酸酶及顺铂均有抑制GLC增殖作用,并且两者联合使用存在协同作用.[关键词]抑制;蛋氨酸裂解酶;协同;顺铂;肺腺癌细胞[中图分类号]R734.2[文献标识码]A[文章编号]2095-610X(2014)0
3、1—0()05-04SynergeticInhibitionEffectsofMethioninaseandCisplatinagainsttheGrowthofHumanLungAdenocarcinomaCellLineGLCHUYue—xin”,XUTian-yong”,ZHANGYu-wen”,ZHAOYu2),TIANChang-fu)(1)ExperimentCenterforMedicalScienceResearch,KunmingMedicalUniversity;2)BiomedicalEngineeringRese
4、archCenter,KunmingYunnan650500,China)[Abstract]ObjectiveTopuri~recombinantmethioninaseandinvestigatethesynergeticinhibitoryeffectofmethioninaseandcisplatinontheproliferationofhumanlungadenocarcinomacelllineGLC.MethodsRecombinantmethioninasewaspurifiedwithGST-columnfromsu
5、peruatantafterultrasonicdisruptionofculturedEscherichiacoliintheprokaryoticexpressionsystempGEX一4T—l—Met/Dh5a.MTFassaywasusedtodeterminetheinhibitionrateofmethioninaseincombinedwithcisplatinoncellproliferation,andtheirsynergisticeffectwasevaluatedbyusingtheqvaluejudgemet
6、hod.ResultsTheconcentrationofrecombinantmethioninecleavingenzymewas0.22mg/mL,thepuritywas95%,andtheactivitywas0.568IU/mg.After72hculturing,theinhibitionrateofcisplatinmethioninewas24.80%and27.49%respectively,whiletheinhibitionrateofthecombineddrugswas66.80%(q1.47>1.15)wh
7、ichshowedasignificantsyriergisticeffect.ConclusionBothmethioninaseandcisplatinhavetheinhibitioneffect,andthecombineddrugsdisplayasignificantsynergisticeffectontheproliferationofGLC[Keywords]Inhibition;Methioninelyase;Synergy;Cisplatin;Lungadenocarcinomacell研究发现,人类主要肿瘤细胞株
8、的生长和繁殖胞高.肿瘤细胞的这种特性被称为蛋氨酸依赖性,都依赖蛋氨酸.蛋氨酸是人体的必需氨基酸,人体淋巴细胞例外【一.尽管现在蛋氨酸饥饿疗法已经被自身不能合成必须从食物中摄取.与正常细胞相运用于体内肿瘤治疗
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