瘦素-p38MAPK通路介导高糖对H9c2心肌细胞的损伤.pdf

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1、CN431262／R中国动脉硬化杂志2014年第22卷第5期433[文章编号]1007—3949(2014)22-05-0433-05·实验研究·瘦素一p38MAPK通路介导高糖对H9c2心肌细胞的损伤徐文明，陈景福，田丽红。郭润民，冯鉴强。陈培熹，郭瑞鲜。，吴铿(1．中山大学附属第一医院黄埔院区内科，广东省广州市510700；2．广东医学院附属医院心内科，广东省湛江市524001；3．中山大学中山医学院生理学教研室，广东省广州市510080)[关键词]瘦素；p38丝裂原激活蛋白激酶；高糖；细胞凋亡；心肌细

2、胞[摘要]目的探讨瘦素-p38丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)通路在高糖损伤H9e2心肌细胞中的作用。方法应用35mmol／L葡萄糖处理H9c2心肌细胞以建立高糖损伤细胞模型。应用细胞计数试剂盒检测细胞存活率；双氯荧光素染色荧光显微镜照相测定胞内活性氧水平；Hoeehst33258核染色检测凋亡细胞形态与数量的改变；罗丹明123染色荧光显微镜照相测定线粒体膜电位；Westernblot检测瘦素和p38MAPK蛋白的表达水平。结果35mmo~L葡萄糖处理H9c2心肌细胞明显促进瘦素的表达。在高糖处理H9c2心肌

3、细胞前，应用50g／L瘦素拮抗剂预处理24h明显抑制高糖对磷酸化p38MAPK表达的上调作用。瘦素拮抗剂预处理24h或p38MAPK抑制剂(SB203580)预处理60min均能抑制高糖对H9c2心肌细胞的损伤作用，使细胞存活率升高，凋亡细胞数量减少，活性氧生成及线粒体膜电位丢失减小。结论瘦素一p38MAPK通路参与高糖对心肌细胞的损伤。[中图分类号】R363[文献标识码]ALeptin-p38MAPKPathwayMediatesIIigllGlucose-inducedInjuryin固c2Cardia

4、cCellsXUWen-Ming，CHENJing．Fu，TIANLi-Hong，GUORun—Min，FENGJian—Qiang，CHENPei．Xi。，GUORui-Xian。，andWUKeng(1．DepartmentofInternalMedicineinHuangpuDivision，TheFirstAffiliatedHospital，SunYat—SenUniversity，Guang-zhou，Guangdong510700，China；2．DepartmentofCardiology，

5、AfiliatedHospitalofGuangdongMedicalCollege，Zhan—jiang，Guangdong524001，China；3．DepartmentofPhysiology，ZhongshanSchoolofMedicine，SunYat-SenUniversity，Guangzhou，Guangdong510080，China)[KEYWORDS]Leptin；p38Mitogen-activatedProteinKinase；HighGlucose；Apoptosis；Car

6、diomyocyte[ABSTRACT]AimToinvestigatetheroleofleptiu—p38mitogen-activatedproteinkinase(MAPK)pathwayinhighglucose(HG)·inducedinjuryinH9c2cardiaccells．MethodsH9c2cardiaccellsweretreatedwithHGtoestablishamodelofcellularinjuryinducedbyHG．Cellviabilitywastestedb

7、ycellcounterkit8(CCK-8)．Theintracellularlevelofreactiveoxygenspecies(ROS)wasmeasuredbydichlorfluoresceinstainingandphotofluorography．ThechangesinmorphologyandamountofapoptoticcellsweretestedbyHoechst33258nuclearstaining．Mitochondtialmembranepoten-tial(MMP)

8、wasdetectedbyrhodamine123(Rh123)stainingfollowedbyphotofluorography．Theexpressionlevelsofleptinandp38MAPKproteinweremeasuredbyWesternblotassay．ResultsExposureofH9e2cardiaccellsto35mmol／Lglucose(HG)markedlyenh