水产品中恩诺沙星残留胶体金免疫层析技术的研究.pdf

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1、安徽农业科学，JoumalofAnhuiAg6．Sci．2014，42(7)：2059—2061责任编辑陈玉敏责任校对李岩水产品中恩诺沙星残留胶体金免疫层析技术的研究余法建，水柏年，龚云飞(1．浙江海洋学院水产学院，浙江舟山31600o；2．中国计量学院浙江省生物计量及检验检疫重点实验室，浙江杭州30018)摘要[目的]制备一种特异、快速、便捷的检测虾及鱼肉中恩诺沙星残留的胶体金免疫层析试纸条。[方法]用柠檬酸三钠还原法制备的胶体金标记恩诺沙星多克隆抗体，喷于试纸的金标垫。将ENR—OVA(恩诺沙星和卵清白蛋白的偶联物)和纯化的羊抗兔IgG分别喷于试纸的T(检测线)处和c(质控线)处，通过挑

2、选试纸条材料和调试工艺参数，并最终组装成试纸条。[结果]制备的试纸条检测体系方法的检出限为0．9ng／ml。试纸条对虾及鱼肉中的恩诺沙星残留的检出限分别为5和10ng／g。[结论]制备的恩诺沙星胶体金检测试纸适用于现场实际样品恩诺沙星残留水平检测，具有良好的应用前景。关键词恩诺沙星；多克隆抗体；胶体金免疫层析；水产品中图分类号$942．3文献标识码A文章编号0517—6611(2014)07—02059—03StudyonColloidalGoldImmunochromatographicStripforRapidDetectionofEnrofloxacininAquaticProduc~

3、YUFa-jian，SHUIBo-nianetal(ZhejiangOceanUniversity，SchoolofFishery，Zhoushan，Zhejiang316000)Abstract[Objective]Theresearchaimedtoprepareakindofspecific，rapid，andconvenientimmunoehromatographicstripfordetectingenrofloxacinresiduesinshrimpandfish．[Method]Colloidalgoldparticleslabeledwithpurifiedpolyclo

4、nalantibodyagainstanti—enrofloxaeinwerepreparedbyusingtfisodiumcitratereductionmethodandsprayedonthegoldpillowoftestpaper．ENR—OVA(theconjugateofenrofloxa—cinandovalbumin)andpurifiedsheepanti—rabbitIgGweresprayedonTline(testline)andCline(controlline)oftestpaper．Thematerialsofstripwereselectedandthep

5、rocessparameterswereconfirmedtoassemblethestrip．[Result]Thedetectionlimitofthestripdetectionmethodwas0．9ng／m1．Andthedetectionlimitsofstripfordetectingtheresidueofenrofloxacininshrimpandfishwere5and10ng／grespee—tively．[Conclusion]Thepreparedenrofloxacincolloidalgolddetectionstripwassuitablefordetect

6、ingenrofloxacinresidueinsamplesinfieldandhadagoodapplicationforeground．KeywordsEnrofloxaein；Polyclonalantibody；Colloidalgoldimmunochromatography；Aquaticproduct恩诺沙星(Enrofloxacin，ENR)是一种人工合成的喹诺酮结果，相比酶联免疫吸附法其操作更加简便，更适合于现场类抗生素，其杀菌机理是抑制细菌DNA旋转酶的活性，从而应用，因此在食品安全及医学检验领域有广泛应用。遏制细菌繁殖，因此被作为兽药广泛用于畜禽与水产养殖笔者初步制备

7、了恩诺沙星胶体金检测试纸条。中的疾病防治。但过量或长期使用代谓十半衰期长的恩诺1材料与方法沙星会导致动物食品中形成药物残留，从而威胁人类健康并1．1主要试剂恩诺沙星(纯度>98．5％)，购自生工生物逐渐引起社会的广泛重视。目前，世界各国对恩诺沙星在工程(上海)股份有限公司；羊抗鼠IgG、氯金酸(HAuC1)以动物食品中的最高残留量进行了规定：欧盟与Et本规定动物及柠檬酸三钠，均购自Sigma公司；PVC底板、