恩诺沙星在黄羽肉鸡组织中残留消除规律研究

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1、《上海畜牧兽医通讯》２０１４年第６期·５·恩诺沙星在黄羽肉鸡组织中残留消除规律研究吴波１２２３段龙川罗厚强杨飞萍（１温州市动物疫病预防控制中心温州３２５０００２温州科技职业学院动科系温州３２５００６３温州市农产品检测中心温州３２５０００）【摘要】为了掌握恩诺沙星在黄羽肉鸡不同组织内的残留消除规律，确定该品种肉鸡的合理休药期。饲料中分别添加５０、１００和２００ｍｇ／Ｌ三个梯度剂量的乳酸恩诺沙星，喂饲５０日龄黄羽肉鸡，连续用药７ｄ，分别在停药后０、３、５、７、８、９、１０、１２、１５、２０ｄ时间点对肌肉、

2、肝和肾等组织采样，用ＵＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳ方法测定乳酸恩诺沙星残留浓度。结果１００ｍｇ／Ｌ试验组（临床用药量）动物肌肉、肝、肾在分别停药１０、７、７ｄ后，药物残留量才低于最高残留限量，分别为０．０５５、０．１７８、０．１５９ｍｇ／ｋｇ。结果表明临床用药量乳酸恩诺沙星对于黄羽肉鸡的休药期应在１０ｄ以上。关键词：恩诺沙星；ＵＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳ；黄羽肉鸡DOI:10.14170/j.cnki.cn31-1278/s.2014.06.002恩诺沙星（Ｅｎｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ，ＥＦ）是广泛应用于畜喹诺酮类药物。禽

3、养殖业中的第三代氟喹诺酮类抗菌药，主要用于１．２方法〔１〕治疗畜禽细菌性疾病和支原体感染，作为动物专１．２．１试验动物分组。试验黄羽肉鸡分为试验组用抗菌药物，具有抗菌谱广、杀菌活性强、与其他抗和对照组，低、中、高三个梯度剂量试验组各４０羽，〔２〕菌药物无交叉耐药性等特点，已备受兽医界重视。对照组４０羽。恩诺沙星在畜禽组织中的残留标志物为恩诺沙星１．２．２饲养及给药方法。笼养，自由采食和饮水。及其活性代谢物环丙沙星之和（ＥＦｓ），其在组织内从５０日龄开始，对照组仅饲喂基础日粮；试验组饮分布快而广泛，并且

4、在组织中的浓度要高于血浆中水中分别以５０、１００和２００ｍｇ／Ｌ水平添加乳酸恩〔３〕的浓度，在动物体内消除缓慢，半衰期长。诺沙星，连续给药７ｄ后停药，停药后于不同时间点在养殖生产中，滥用恩诺沙星的现象普遍存测定试验动物可食组织中ＥＦｓ残留量。在，不仅造成畜禽中毒、病原菌对该类药物耐药等１．２．３采样。于停药后０、３、５、７、８、９、１０、１２、１５、〔４〕问题，还会造成兽药在畜禽可食组织中的残留，严２０ｄ时间点从对照组和试验组各抽取４羽鸡，称重重影响人类健康。中华人民共和国农业部２３５公告后立即屠宰，

5、进行取样。每羽鸡各取胸肌和腿肌约规定的最高残留限量（ＭＲＬ）为：肌肉０．１ｍｇ／ｋｇ、２５ｇ、全肝、全肾，将样品编号后置于－２０℃冷冻保肝脏０．３ｍｇ／ｋｇ、肾脏０．２ｍｇ／ｋｇ。恩诺沙星在健存，待测。［５～９］康畜禽体内药物动力学的研究已有不少报道，１．２．４样品前处理。取（５±０．０２）ｇ经切碎匀浆但是在黄羽肉鸡可食组织内药物残留消除规律研的畜禽可食组织样品，置于５０ｍＬ具塞离心管中，究尚未见报道。笔者通过恩诺沙星药物在黄羽肉加入约５ｇ无水硫酸钠和２０ｍＬ乙腈，涡旋混匀鸡组织内的残留消除试验，为合

6、理休药提供参考。２ｍｉｎ，超声５ｍｉｎ，以８０００ｒ／ｍｉｎ冷冻离心５ｍｉｎ。１材料与方法将上层提取液转移至１００ｍＬ棕色鸡心瓶中，残渣１．１材料再加入２０ｍＬ乙腈，重复上述操作１次。合并提取１．１．１主要药品及仪器。乳酸恩诺沙星：由浙江液，向鸡心瓶中再加入１０ｍＬ异丙醇。在４０℃以下国邦药业有限公司提供，批号１２１１０８－１，含量水浴减压浓缩至近干，再用氮气吹干。准确加入９９．５％；临床推荐用量为混饮，鸡１００ｍｇ／Ｌ。恩诺１．００ｍＬ初始流动相，涡旋混匀溶解残留物，转移到沙星标准品：由Ｄｒ．Ｅｈｒ

7、ｅｎｓｔｏｒｆｅｒＧｍｂＨ公司提供，１０ｍＬ具塞聚丙乙烯离心管中，再加入１ｍＬ正己含量９９．２３％。环丙沙星标准品：由Ｄｒ．Ｅｈｒｅｎｓｔｏｒｆ－烷混匀，以１００００ｒ／ｍｉｎ冷冻离心５ｍｉｎ，取下层液ｅｒＧｍｂＨ公司提供，含量９９．１８％。ＡＣＱＵＩＴＹ过０．２μｍ微孔滤膜，滤液待测定。ＵＰＬＣ－ＸｅｖｏＴＱ超高效液相色谱－串联质谱联用１．２．５色谱条件。ＡＣＱＵＩＴＹＵＰＬＣＴＭＢＥＨＣ１８仪：配有电喷雾离子（ＥＳＩ）源；高速冷冻离心机，超色谱柱（１００ｍｍ×２１ｍｍ，１．７μｍ；Ｗａｔｅｒｓ公司

8、）；声清洗仪，旋转蒸发仪，漩涡混匀器。柱温３５℃；样品温度１０℃；进样体积５μＬ；流动相１．１．２试验动物。５０日龄黄羽肉鸡１６０羽，体重Ａ为乙腈，Ｂ为０．１％（体积分数）甲酸水溶液；流速（１．５±０．２）ｋｇ，雌雄各半，试验前确保没有使用氟０．２５ｍＬ／ｍｉｎ。·６·《上海畜牧兽医通讯》２０１４年第６期１．２．６质谱条件。电离方式ＥＳＩ＋；电离电压９３％～１１６％，相对标准偏差均小于１０．０％，表明３．５０Ｋｖ；离子源温度１５０℃；锥孔反吹气流量５０Ｌ