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1、nCl-IBRICULTURAE华北农学报·2014,29(2):104—109日I矗E_LI-ll嚣ICn重组大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位在鸭体内的吸收代谢及组织分布周晓丽,王一成,姜平,袁秀芳,李军星,杜晓莉(1.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所,浙江杭州310021;2.南京农业大学动物医学院,江苏南京210095;3.甘肃农业大学,甘肃兰州730070)摘要::研究重组大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(rLTB)在鸭体内的吸收代谢及组织分布,为rLTB的临床应用安全性提供依据。试验鸭分别肌注l,50,100mg/kgrLTB后
2、,以神经节苷脂GM1酶联免疫吸附法(GM1一ELISA)测定注射后不同时间点鸭血清中的rLTB含量;连续3次肌注rLTB后,观察临床症状和剖检病理变化,并采集心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和大脑制备组织切片,HE染观察组织病理学变化,免疫酶组织化学染色观察rLTB在各脏器内的分布及含量变化。结果表明:鸭血清中的rLTB含量变化及维持时间与rLTB注射剂量呈正相关。lmg/kg注射组2h达到峰值,维持至6h开始下降,24h后基本检测不到;50,100mg/kg注射组分别于2h和1h达到峰值,并均维持至12h才开始下降,48h后基本检
3、测不到。HE染色切片显示50mg/kg注射组肝细胞轻度浊肿变性,肺脏轻微炎症;100mg/kg注射组肝细胞浊肿变性明显、肺脏重度炎症、脑组织出现局灶性坏死。免疫组化染色结果显示,在被检脏器中均检出rLTB,以大脑含量最高,脾脏和肝脏次之,心脏和肺脏检出量低。rLTB大剂量肌肉注射可引起鸭一定的组织学病变,对鸭的安全使用剂量应不超过50mg/kg。关键词:大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位;鸭;吸收代谢;组织分布中图分类号:$834文献标识码:A文章编号:1000—7091(2014)02—0104—06DynamicandDistri
4、butionofRecombinantE.coliHeat.1abileEnterotoxinBSubunitinDuckZHOUXiao—li,WANGYi—cheng,JIANGPing。,YUANXiu—fang,LIJun—xing,DUXiao—li,(1.InstituteofAnimalHusbandryandVeterinarian,ZhejiangAcademyofAgriculturalSciences,Hangzhou310021,China;2.CollegeofVeterinaryMedicine,Na
5、njingAgriculturalUniversity,Nanjing210095,China;3.GansuAgriculturalUniversity,Lanzhou730070,China)Abstract:E.coliheat一1abfieenterotoxinBsubunit(rLTB)execsmosteffectivea~uvanteffectsonmucosalimmuneresponses.InordertoelucidatethedynamicandthesafetyofrLTBforclinicalusei
6、nduck,theconcentra—tionsofrLTBinsera,hist0path0l0gica1changesandtissuedistributionofrLTBwereexamined.Duckswerebledpri-ortoinjectionandatdifferenttimeintervalspost—intramuscularinjection(IM)with1,50,100mg/kgrLTB,respec—tively.GM1一ELISAwasappliedforthedeterminationofrL
7、TBconcentrationinsera.Theautopsyofduckswascon—ductedatdifferenttimepointsafterIMofrLTBonceaday,3timesinarow.Samplesofheart,liver,spleen,lung,kidneyandbrainwerefixedin10%paraformaldehydeandthetissuesectionswereexaminedaftercolorationwithhaematoxylinandeosin(HE)orimmun
8、ohistochemical(IHC)staining.TheresultshowedthattherewaspositivecorrelationbetweenconcentrationanddurationofrLTBinseraandthedosageso
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