重组大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位在鸭体内的吸收代谢及组织分布.pdf

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1、nCl-IBRICULTURAE华北农学报·2014，29(2)：104—109日I矗E_LI-ll嚣ICn重组大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位在鸭体内的吸收代谢及组织分布周晓丽，王一成，姜平，袁秀芳，李军星，杜晓莉(1．浙江省农业科学院畜牧兽医研究所，浙江杭州310021；2．南京农业大学动物医学院，江苏南京210095；3．甘肃农业大学，甘肃兰州730070)摘要：：研究重组大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(rLTB)在鸭体内的吸收代谢及组织分布，为rLTB的临床应用安全性提供依据。试验鸭分别肌注l，50，100mg／kgrLTB后

2、，以神经节苷脂GM1酶联免疫吸附法(GM1一ELISA)测定注射后不同时间点鸭血清中的rLTB含量；连续3次肌注rLTB后，观察临床症状和剖检病理变化，并采集心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和大脑制备组织切片，HE染观察组织病理学变化，免疫酶组织化学染色观察rLTB在各脏器内的分布及含量变化。结果表明：鸭血清中的rLTB含量变化及维持时间与rLTB注射剂量呈正相关。lmg／kg注射组2h达到峰值，维持至6h开始下降，24h后基本检测不到；50，100mg／kg注射组分别于2h和1h达到峰值，并均维持至12h才开始下降，48h后基本检

3、测不到。HE染色切片显示50mg／kg注射组肝细胞轻度浊肿变性，肺脏轻微炎症；100mg／kg注射组肝细胞浊肿变性明显、肺脏重度炎症、脑组织出现局灶性坏死。免疫组化染色结果显示，在被检脏器中均检出rLTB，以大脑含量最高，脾脏和肝脏次之，心脏和肺脏检出量低。rLTB大剂量肌肉注射可引起鸭一定的组织学病变，对鸭的安全使用剂量应不超过50mg／kg。关键词：大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位；鸭；吸收代谢；组织分布中图分类号：$834文献标识码：A文章编号：1000—7091(2014)02—0104—06DynamicandDistri

4、butionofRecombinantE．coliHeat．1abileEnterotoxinBSubunitinDuckZHOUXiao—li，WANGYi—cheng，JIANGPing。，YUANXiu—fang，LIJun—xing，DUXiao—li，(1．InstituteofAnimalHusbandryandVeterinarian，ZhejiangAcademyofAgriculturalSciences，Hangzhou310021，China；2．CollegeofVeterinaryMedicine，Na

5、njingAgriculturalUniversity，Nanjing210095，China；3．GansuAgriculturalUniversity，Lanzhou730070，China)Abstract：E．coliheat一1abfieenterotoxinBsubunit(rLTB)execsmosteffectivea~uvanteffectsonmucosalimmuneresponses．InordertoelucidatethedynamicandthesafetyofrLTBforclinicalusei

6、nduck，theconcentra—tionsofrLTBinsera，hist0path0l0gica1changesandtissuedistributionofrLTBwereexamined．Duckswerebledpri-ortoinjectionandatdifferenttimeintervalspost—intramuscularinjection(IM)with1，50，100mg／kgrLTB，respec—tively．GM1一ELISAwasappliedforthedeterminationofrL

7、TBconcentrationinsera．Theautopsyofduckswascon—ductedatdifferenttimepointsafterIMofrLTBonceaday，3timesinarow．Samplesofheart，liver，spleen，lung，kidneyandbrainwerefixedin10％paraformaldehydeandthetissuesectionswereexaminedaftercolorationwithhaematoxylinandeosin(HE)orimmun

8、ohistochemical(IHC)staining．TheresultshowedthattherewaspositivecorrelationbetweenconcentrationanddurationofrLTBinseraandthedosageso