环丙沙星时间分辨荧光免疫分析方法的建立与应用.pdf

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1、2162012，Vo1．33，No．08食品科学※分析检测环丙沙星时间分辨荧光免疫分析方法的建立与应用李丽华，白瑞樱2，孙远明，沈玉栋-，徐振林1，雷红涛，张挺，王弘，杨金易，(1．广东省食品质量安全重点实验室，华南农业大学食品学院，广东广州510642；2．新乡医学院基础医学院生理学与神经生物学教研室，河南新乡453003)摘要：建立基于时间分辨荧光免疫分析技术的环丙沙星(cPF)间接竞争检测方法。将环丙沙星一卵清白蛋白(CPF—OVA)包被于固相微孔板，CPF标准品或样品中CPF与CPF包被原(CPF—OVA)

2、共同竞争限量的CPF抗体，用铕标羊抗兔IgG示踪，建立环丙沙星时间分辨荧光免疫分析方法(CPF—TRFIA)；考察包被质量浓度、抗体稀释液、反应时问等对方法灵敏度的影响。结果表明：在优化条件下，该方法的检测限为0．5gtg／L，半抑制质量浓度(IC5o)为4．32g／L，线性范围(IC20-ICso)为1．14~28．85g／L；该方法对蜂蜜中CPF平均回收率为80．66％100．30％，对牛奶中CPF的平均回收率为76．30％~95．22％，两者的平均批内和批间变异系数分别为7．42％和10．92％。CPF．TR

3、FIA间接竞争法测定环丙沙星具有灵敏度高、特异性好、性能稳定的优点，适于高通量筛查。关键词：环丙沙星；时问分辨荧光免疫分析；抗体；添加回收DevelopmentandApplicationofTime—resolvedFluroimmunoassay(TR-FIA)forCiprofloxacinDeterminationLILi—hua，BAIRui—ying，SUNYuan—ming，SHENYu—dong，XUZhen—lin，LEIHong—tao，ZHANGTing，WANGHong，YANGJin—yi

4、t(1．GuangdongProvincialKeyLaboratoryofFoodQualityandSafety，CollegeofFoodScience，SouthChinaAgriculturalUniversityGuangzhou510642，China；2．DepartmentofPhysiologyandNeurobiology，SchoolofBasicMedicalSciences，XinxiangMedicalUniversity，Xinxiang453000，China)Abstract：A

5、time—resolvedfluroimmunoassay(TR凡A)forthedeterminationofciprofoxacin(CPF)inalindirectcompetitiveimmunoassaymodewasdevelopedandapplied．CPF—OVAwascoatedbyphysicaladsorptionontoamicrotitreplate．andCPFstandardorsamplewascompetedwithCPF-OVAfor1imitedanti．CPFantibod

6、ywhichwastracedusingeuropitim，labe1edgoatantirabbitIgG．TheeffectsofexperimentalconditionsincludingCPF-OVAconcentration．bufertype．andreactiontimeonthesensitivityofTRFlAwereexplored．Underoptimalconditions，themethodrevealedadetectionlimitof0．5“g，L，anIC50Of4．32，La

7、ndalinearrange(IC2o-IC8o)ofl_l3—28．85g，L．ThespikerecoveryratesofCPFinhoneyandmilkatthreespikelevelswereintherangeof80．66％一100．30％and76．30％一95．22％，respectively，andtheintra。batchandinter-batchcoeffi—cientsofvariationwere7．42％and10．92％，respectively．Themethodwasse

8、nsitive，specifc，stableandsuitabletobeusedforhigh—throughputdeterminationofCPFresidues．Keywords：ciprofloxacin；time．resolvedfluroimmunoassay：antibody；recovery中图分类号：$859；0625．6文献标识码：A