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《CK_MB时间分辨荧光免疫分析的建立》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、第四军医大学学报(JFourthMilMedUniv)2006;27(22)http://journal.fmmu.edu.cn2103·研究原著·文章编号:100022790(2006)2222103203CK2MB时间分辨荧光免疫分析的建立11121杭建峰,吴英松,徐伟文,余伟鸿,李明12(南方医科大学生物技术学院,广州510515,广州市达瑞抗体工程技术有限公司,广州510663)的要求,可用于临床血清CK2MB水平的测定.Time2resolvedfluoroimmunoassayof【
2、关键词】肌酸激酶同工酶2MB(CK2MB);荧光免疫测定CK2MB【中图号】R392.33【文献标识码】B111HANGJian2Feng,WUYing2Song,XUWei2Wen,YUWei221Hong,LIMing0引言1SchoolofBiotechnology,SouthernMedicalUniversity,Guang22血清肌酸激酶同工酶2MB(CK2MB)在心肌不可zhou510515China,GuangzhouDaruiAntibodyCO.LTD,逆损伤后4～6h即开始
3、升高,是反映心肌损伤灵敏Guangzhou510663,China[1]度高特异性强的一项指标,近年来随着免疫学检【Abstract】AIM:TomakeafastquantitativedetectionofCrea2测技术的发展,CK2MB的检测技术趋于多样化,检测tineKinase2MBIsoenzyme(CK2MB)basedontime2resolved时间也不断缩短.但对一些亚急性心肌梗塞及小灶fluoroimmunoassay(TRFIA).METHODS:Thesandwich
4、TRFIA性心肌梗塞的患者,用传统的免疫抑制法测定CK2wasestablishedfordetectionofserumCK2MBlevelusinganti2MB活性仍有一定的局限性.本研究使用三价稀土离CK2MBmAbs(Onemonoclonalantibodywasimmobilizedonsur2[2]子作为标记物的时间分辨荧光免疫分析技术测定faceofmicrotiterplatestripwells,andanotherwaslabelledwith血清CK2MB,并对相关指标
5、进行了评价.3+Eu).RESULTS:ThelinearmeasurementrangeofCK2MBTRFIAwas5-400μg/L.Thesensitivitywas0.24μg/L.Theintra2andinter2assaycoefficientsofvariation(CV)were4.9%-1材料和方法3+7.3%and8.4%-11.7%,respectively.Therewasnocross21.1材料用于包被和Eu标记的配对抗CK2MBreactiontoCK2MMan
6、dCK2BB.Thecorrelationcoefficientof82单抗及CK2MB抗原均购自Biodesign公司;96孔板为bloodsamplesdetectedbyCK2MBTRFIAandcommerciallyavail2厦门新创公司产品;SephadexG250为Pharmacia公司ableCLIAkitwas0.895.CONCLUSION:CK2MBTRFIAisa产品;Eu3+标记试剂盒、Eu3+荧光增强液及Auto2newimmunoassaywhichhasseve
7、raladvantagesincludinghighDelfia1235全自动时间分辨免疫荧光检测系统均为sensitivity,specificityandwidelyworkingrange.ItissuitableforPerkinElmer公司产品;带有滤膜的离心管购自Milli2routineclinicaldetectionofserumCK2MBlevel.pore公司;CK2MB血清标本82份(年龄45～78岁,【Keywords】creatinekinase2MBIsoenzy
8、me(CK2MB);fluoro2平均年龄61岁,其中男性43人,女性39人,包括急immunoassay性心肌梗塞患者血清73份,病毒性心肌炎病人血清【摘要】目的:利用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术,4份,心绞痛患者血清5份)及正常人血清423份来建立人血清CK2MB的快速定量检测方法.方法:采用双抗体自南方医院和广州军区总医院;其他试剂均为国产分夹心法(1株抗CK2MB的单抗用于包被微孔板,另1株抗CK2析纯.MB的单抗用于铕标记)建立CK2MBTRFIA.结果:CK2MB1.2方法
