电刺激对体外培养C2C12细胞抗氧化能力的影响.pdf

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1、第37卷第5期北京体育大学学报VoL37No.52014年5月JournalofBeijingSp0rtUniversityMav.2014电刺激对体外培养C2C2细胞抗氧化能力的影响刘永,潘其乐,罗冬梅(北京体育大学,北京100084)摘要:目的:通过电刺激体外培养的骨骼肌卫星细胞(C:C:),观察其对细胞活性和抗氧化能力的影响,探索适宜的体外电刺激条件及细胞抗氧化能力改变的机制。方法:C-PaceEP电刺激仪刺激体外培养的C2C:细胞,MTF法检测细胞活性,DCF法检测细胞内ROS含量,We

2、sternblot法检测细胞核内Nrf2蛋白含量。结果:1)0—40.0V电压刺激细胞,各组细胞相对吸光度值分别为1.000、0.993、0.969、0.968、0.954、0.947、0.836、0.798;0—20.0Hz频率刺激后,各组细胞相对吸光度值分别为1.000、1.022、1.023、1.055、1.055、1.154、1.140、1.104、1.102。2)与对照组比较,l5V电刺激细胞内相对DCF荧光强度显著增强。3)对照组细胞核内Nrf2蛋白含量均较低,电刺激后含量显著增加,

3、5V和15Hz组分别是所检测不同电压和频率条件下促Nrf2入核作用最强组。结论:体外培养C2C细胞进行电刺激干预时,要考虑电刺激的电压和频率,适宜的电刺激可通过促进Nrf2入核增强细胞的抗氧化能力。关键词:C:C】2;电刺激;细胞增殖;抗氧化中图分类号:G804.7文献标志码:A文章编号:1007—3612(2014)05—0067—05EfectofElectricStimulationonAnti-oxidationCapacityofC2C12CellinVitroLIUYong.PANQ

4、i.1e,LUODong.mei(BeijingSpoaUniversity,Beijing100084,China)Abstract:Objective:Thisstudyobservedtheeffectofelectricstimulationoncellactivityandanti—oxidationcapac—itvofC.C1,ce11invitro,andexploredthesuitableconditionofelectricstimulationandthemechanis

5、mofchangeofanti—oxidativecapacity.Methods:C2C12cellwascultivatedandstimulatedbyC—PaceEP.CellactivityofC2C12cellwastestedbyMTF,thecontentofreactiveoxygenspecies(ROS)ofC2Cl2cellwastestedbyDCFandtheproteincontentofNrf2innucleusofC,C1,cellwastestedbywest

6、ernblot.Resuhs:1)Comparedwithcontrolgroup,therelativeabsorbanceofeachgroupstimulatedbydifferentvoltage(0—40.0V)is1.000,0.993,0.969,0.968,0.954.0.947.0.836.and0.798respectively.Whenstimulatedbydifferentfrequency(0—20.0Hz),therela—tiveabsorbanceofeachg

7、roupis1.000,1.022,1.023,1.055,1.055,1.154,1.140,1.104,and1.102re—spectively.2)Comparedwithcontrolgroup,relativeDCFfluorescenceintensityinothergroupsisimprovedsignif-icantlvafter15Velectri(stimulation.3)TheproteinlevelofNrf2incellnucleusislowincontrol

8、group,andit’sincreased/fterelectricstimulation.Thegroupsstimulatedby5Velectricand15VelectricarethemostpowerfulgrouDstopromoteNrf2intocellnucleus.Conclusion:Thevoltageandfrequencyofelectricstimulationshouldbeconsideredwhenusingelectrictostimulatec2c12

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