改变氧化-抗氧化水平对体外培养胃癌细胞增殖的影响

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1、万方数据答辩委员会主席：答辩委员会成员：万方数据目录一、英文缩略词中英文对照表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．01二、论文摘要中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯02英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯03三、论文正文材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．07结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．17分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．21小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．23参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24四、附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．28五、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．29六、综述及参考

2、文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．30七、学位论文独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38万方数据温州医学院硕士学位论文英文缩写PBSDMSOIC500DEDTAQ-PCRMTTDCFH．DABSAddH20FBSTBSTdTTrisDEPCPCRcDNADNAdNTPmI己NADNaseEBVPMTGHP英文缩略词中英文对照表英文全称phosphatebufferedsalinedimethylsulfoxidehalfmaximalinhibitoryconcentrationopticaldensityethylendiamin

3、etetraaceticacidquantitative—polymerasechainreaction3-(4，5-dimethylthiazol一2-y1)-2，5-diphenyltetrazoliumbromide2’．7'-dichlorofluorescindiacetatebovineserumalbuminDoubledistilledH20FetalbovineserumTrisbuffersalineTerminaldeoxynucleotidyltransferaseTrishydroxymethylamin

4、omethaneDdiethylpyrocarbonatePolymerasechainreactionComplementaryDNADeoxyribonucleicaciddeoxy-ribonucleosidetriphosphateMessengerRNAdeoxyribonucleaseEpstein-Barrviruspolygonummultiflorumtotalglycosidehydrogenperoxide中文全称磷酸盐缓冲盐水二甲亚砜半数抑制浓度光密度乙二胺四乙酸定量多聚酶链式反应3．(4，5一二甲基噻唑．

5、2)．2，5．二苯基四氮唑溴盐2’，3’二氯荧光黄双乙酸盐牛血清白蛋白双蒸水牛胎儿血清三羟甲基氨基甲烷缓冲液末端脱氧核酸转移酶三羟甲基氨基甲烷焦磷酸二乙酯多聚酶链式反应互补DNA脱氧核糖核酸脱氧核糖核苷三磷酸信使核糖核酸脱氧核糖核酸酶EB病毒何首乌总苷过氧化氢万方数据温州医学院硕士学位论文二、论文摘要改变氧化一抗氧化水平对体外培养胃癌细胞增殖的影响(中文摘要)目的本实验从何首乌块根中提取何首乌总苷(polygonummultiflorumtotalglycoside，PMTG)，通过调节抗氧化剂．何首乌总苷(PMTG)和过氧化剂一

6、过氧化氢(hydrogenperoxide，HP)浓度改变过氧化．抗氧化水平，观察不同过氧化-抗氧化水平对体外培养胃癌细胞株SGC．7901生长的影响并探求其可能机制方法1．MTT法检测两种药物分别处理后不同氧化水平对胃癌细胞SGC．7901的增殖影响，计算出半数抑制浓度IC50，确定等效曲线：2．流式细胞检测双药处理后细胞内活性氧(reactiveoxygenspecies，ROS)浓度的变化；3．实时荧光定量PCR检测不同浓度双药处理后Nrf2、和下游抗氧化HO．1和NQ01基因的表达。结果1．PMTG在体外能明显抑制人胃癌S

7、GC7901细胞增殖，且呈浓度梯度依赖性(P<0．01)，IC50=221lag／L：HP在体外能明显抑制人胃癌细胞增殖，呈浓度梯度依赖性(P<0．01)，IC50=52umol／L。2．流式细胞DCF法可检测到细胞内ROS改变，SGC细胞内ROS浓度与PMTG处理浓度呈负相关，与HP处理浓度呈正相关。3．rt．PCR法检测凋亡相关下游基因HO．1及NQ01基因表达的情况，PMTG处理组相关基因的表达均明显高于阴性对照组(P

8、P<0．01)；HP处理组的下游基因HO．1及NQ01表达则低于对照组。结论PMTG和HP具有在体外均能抑制胃癌细胞SGC．7901增殖，改变细胞内ROS浓度，进而改变细胞内氧化．抗氧化水平，其机制可能与调节NRF2．KEAPl．ARE通路的下游相